Eg5基因在神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡中的作用

目的探讨Eg5基因对神经母细胞瘤(NB)细胞增殖和凋亡的影响。方法取2株NB细胞株SHSY-5Y和NBL-S,分别转染针对Eg5基因的小干扰RNA(siRNA),分为细胞对照组(用等体积的水代替siRNA,只含有脂质体,未转染细胞)、siRNA对照组(转染siRNA对照)和siRNA干扰组(转染Eg5 siRNA),每组6孔,每孔1×10~6个细胞。使用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测Eg5 mRNA表达水平的变化;使用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)掺入实验和克隆形成实验检测下调Eg5表达对NB细胞增殖的影响;使用流式细胞术检测下调Eg5表达对NB细胞凋亡和细胞周期的影响。结果荧光定量PCR检测结果显示,siRNA干扰组Eg5 mRNA表达水平与细胞对照组和siRNA对照组相比显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);EdU掺入实验和克隆形成结果表明,siRNA干扰组细胞中DNA的合成量和细胞克隆数量低于细胞对照和siRNA对照组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞的凋亡比率低于siRNA干扰组细胞的凋亡比率,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期的检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞中G0/G1期所占比率<50%,而siRNA干扰组细胞中G0/G1期所占比率>70%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在NB细胞中使用siRNA下调Eg5表达,能够抑制NB细胞增殖,促进细胞凋亡。     

经脐腹腔镜手术治疗小儿肠套叠的疗效分析

目的 研究应用腹腔镜治疗小儿急性肠套叠的价值。方法 回顾性分析2015年6月到2018年6月中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）50例肠套叠手术患儿的病例资料,其中25例行腹腔镜复位术（腹腔镜组）,25例行传统开腹复位术（开腹组）,比较两组患儿性别、体质量、年龄、发病时间、术前及术后血清C反应蛋白（CRP）水平、手术出血量、手术所需时间、术后下床活动时间、术后肛门通气时间以及并发症情况和住院时间的差异。结果 腹腔镜组患儿手术所需时间、手术出血量及术后24小时CRP水平均低于传统手术组患儿,差异均有统计学意义（P<0.05）;腹腔镜组患儿术后下床活动时间、术后肛门通气时间及住院时间均短于开腹组患儿,术后并发症发生例数少于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。术后两组患儿均随访12个月,腹腔镜组患儿未有复发病例,开腹组有1例患儿因过敏性紫癜导致肠套叠复发。结论 相比于传统的开腹手术,经脐腹腔镜手术治疗小儿急性肠套叠的效果较好。     

经肛门巨结肠根治术治疗126例儿童先天性巨结肠临床疗效研究

目的探讨经肛门巨结肠根治术治疗儿童先天性巨结肠临床疗效及手术技巧。方法回顾分析经肛门手术治疗126例先天性巨结肠患儿的临床资料,采用经肛改良Soave术95例,经肛改良Swenson术31例。结果除早期经肛Soave术中7例（5．6％）二期手术外,余均一期完成手术（94．4％）。辅助腹部小切口5例,腹腔镜12例。术后并发症35例,其发生率为27．8％,其中肛周糜烂15例,小肠结肠炎9例,吻合口狭窄5例,污粪2例,再手术4例,两种术式的术后并发症比较差异无统计学意义（P〉0．05）。103例获随访1—10（中位数2）年,痊愈96例（93．2％）,好转5例（4．9％）,无效2例（1．9％）,两种术式不同类型的术后排便功能优良率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论两种术式治疗先天性巨结肠临床疗效好,各有其优点,均存在一定的并发症,但经肛Swenson术较经肛Soave术操作更简单方便,术后不需扩肛。     

经脐腹腔镜手术治疗小儿肠套叠的疗效分析

目的研究应用腹腔镜治疗小儿急性肠套叠的价值。方法回顾性分析2015年6月到2018年6月中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院) 50例肠套叠手术患儿的病例资料,其中25例行腹腔镜复位术(腹腔镜组),25例行传统开腹复位术(开腹组),比较两组患儿性别、体质量、年龄、发病时间、术前及术后血清C反应蛋白(CRP)水平、手术出血量、手术所需时间、术后下床活动时间、术后肛门通气时间以及并发症情况和住院时间的差异。结果腹腔镜组患儿手术所需时间、手术出血量及术后24小时CRP水平均低于传统手术组患儿,差异均有统计学意义(P <0. 05);腹腔镜组患儿术后下床活动时间、术后肛门通气时间及住院时间均短于开腹组患儿,术后并发症发生例数少于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。术后两组患儿均随访12个月,腹腔镜组患儿未有复发病例,开腹组有1例患儿因过敏性紫癜导致肠套叠复发。结论相比于传统的开腹手术,经脐腹腔镜手术治疗小儿急性肠套叠的效果较好。     

Eg5基因在神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡中的作用

目的 探讨Eg5基因对神经母细胞瘤（NB）细胞增殖和凋亡的影响。方法 取2株NB细胞株SHSY-5Y和NBL-S,分别转染针对Eg5基因的小干扰RNA （siRNA）,分为细胞对照组（用等体积的水代替siRNA,只含有脂质体,未转染细胞）、siRNA对照组（转染siRNA对照）和siRNA干扰组（转染Eg5 siRNA）,每组6孔,每孔1×10⁶个细胞。使用实时定量聚合酶链式反应（real-time PCR）检测Eg5 mRNA表达水平的变化;使用5-乙炔基-2''-脱氧尿苷（EdU）掺入实验和克隆形成实验检测下调Eg5表达对NB细胞增殖的影响;使用流式细胞术检测下调Eg5表达对NB细胞凋亡和细胞周期的影响。结果 荧光定量PCR检测结果显示,siRNA干扰组Eg5 mRNA表达水平与细胞对照组和siRNA对照组相比显著减少,差异有统计学意义（P < 0.05）;EdU掺入实验和克隆形成结果表明,siRNA干扰组细胞中DNA的合成量和细胞克隆数量低于细胞对照和siRNA对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）;流式细胞术检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞的凋亡比率低于siRNA干扰组细胞的凋亡比率,差异有统计学意义（P < 0.05）;细胞周期的检测结果显示,细胞对照组和siRNA对照组细胞中G0/G1期所占比率< 50%,而siRNA干扰组细胞中G0/G1期所占比率>70%,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 在NB细胞中使用siRNA下调Eg5表达,能够抑制NB细胞增殖,促进细胞凋亡。     

儿童外伤性脾破裂非手术疗法探讨

目的　探讨儿童脾外伤非手术治疗的特殊性。方法　 1988～ 1999年共收治儿童脾外伤 6 4例 ,其中非手术治疗 18例 ,均经B型超声或CT证实。结果　非手术治疗的选择率为 2 8.1% ,成功率为 94 .4 % ,输血率为 5 0 %。结论　采用非手术治疗必须具备一定的先决条件 ,合理掌握适应证 ,避免不必要的手术。减少不必要的重症监护 ,可降低患儿住院费用 ,节省人力、物力。减少输血的随意性 ,可避免输血引起血清感染的可能性     

小儿腹部节细胞神经瘤的诊断和治疗

目的提高小儿腹腔节细胞神经瘤的诊治水平。方法回顾分析3例腹腔节细胞神经瘤的临床资料，结合文献对其发病情况、生物学特性、临床、病理诊断及手术原则进行讨论。结果术前经B超、CT检查，2例分别诊断神经母细胞瘤和腹膜后肿瘤；1例考虑节细胞神经瘤。3例均手术切除肿瘤，2例为腹膜后节细胞神经瘤，1例为肾上腺节细胞神经瘤。术后恢复顺利。随访6个月～8年，患儿健康，无肿瘤复发。结论小儿腹部节细胞神经瘤临床少见，平均发病年龄6岁左右，除腹部包块外，一般情况良好。B超、CT可了解肿瘤的部位及其与周围组织、脏器的关系，对于诊断和指导手术有帮助。确诊有赖病理。完全切除肿瘤，预后良好。     

超声引导下水压灌肠治疗小儿肠套叠后复发危险因素

目的探讨超声引导下水压灌肠治疗小儿肠套叠后复发的危险因素。方法回顾性分析92例经超声引导下水压灌肠的肠套叠患儿,其中50例治疗后复发(复发组),42例未复发(未复发组)。采用Logistic回归方程分析复发危险因素,以ROC曲线评估各因素预测复发的诊断效能。结果 2组患儿血便、肠套叠继发因素及超声所示肠套叠"同心圆"最大径、肠壁血流信号、腹腔积液差异均有统计学意义(P均0.05),且上述各项均为肠套叠复发的危险因素(P均0.05)。取肠套叠"同心圆"最大径截断值为35 mm时,其预判复发的AUC为0.87,高于其他因素(P均0.05)。结论肠套叠"同心圆"最大径≥35 mm、血便、肠套叠套头部位无明显血流信号、存在继发性因素及腹腔积液为超声引导下小儿肠套叠水压灌肠成功后复发的危险因素。     

miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响

目的探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpi C,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测人卵巢上皮细胞HOSEpi C以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平。利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3’端非编码区(3’-UTR)的野生型(WT)和突变型(mut)荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用。利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞,使用荧光定量PCR和Western blot检测靶基因的表达水平。利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化。结果正常人卵巢上皮细胞HOSEpi C中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义(P <0. 05),选择SKOV3进行后续实验。生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3’-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3’-UTR。筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组。在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SKOV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

小儿肝脓肿180例回顾分析

我院外科1970～1998年共收治小儿细菌性肝脓肿180例,现将其发病情况、诊断措施和治疗方法总结如下。1临床资料1．1一般资料男131例,女49例;年龄2～14岁,其中1～3岁16例,4～6岁51例,7～10岁52例,11～14岁61例。174例来自农村,占96．7％。就诊前病程2天～6月,平均20天。部位：右肝132例,肛肝34例,左右肝14例。单发163例,多发17例。引流脓量2～2600ml。1．2临床表现及实验室检查发热或伴畏寒160例（88．9％）,腹痛156例（86．7％）,肝肿大触痛138例（76．7％）。血WBC＞12．0×109／L患者为669％（119／178）,N＞0．60为91．1…