SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选

目的:构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株,为研究SLC7A11基因的表达沉默对肝癌发生发展的影响奠定基础。方法:针对SLC7A11基因的不同部位合成3个siRNA的寡核苷酸片段,分别将其克隆到真核表达载体p GPU6/GFP/Neo中。利用脂质体转染法分别将质粒导入肝癌LM3细胞,24小时后观察细胞内GFP表达情况,并通过real-time PCR及Western blot的方法比较各组细胞SLC7A11基因mRNA和蛋白的表达水平,然后用G418对转染细胞进行筛选培养。结果:经酶切分析及测序验证,成功构建了靶向沉默SLC7A11基因的真核表达质粒p GPU6-SLC7A11-siRNA;通过real-time PCR及Western blot的方法验证,成功筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株。结论:成功构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株,为进一步研究SLC7A11基因表达沉默对肝癌细胞发生发展的影响奠定了基础。     

桃红四物汤在痛经模型大鼠体内代谢产物研究

目的:分析桃红四物汤在痛经模型大鼠尿液、粪便、胆汁中代谢产物。方法:建立痛经大鼠模型,采用UHPLC-Q-TOFMS技术分析桃红四物汤在痛经大鼠模型中的代谢产物。结果:从桃红四物汤给药后大鼠尿液中发现并鉴定了22个代谢产物成分,粪便中发现并鉴定了4个代谢产物成分,胆汁中发现并鉴定了18个代谢产物成分。在尿液、粪便及胆汁中检测到了酚酸类、苷类、苯酞内酯类、黄酮类成分的原型及代谢物,主要发生水解、硫酸化结合、甲基化和葡萄糖醛酸化等代谢过程,其中尿液及胆汁中代谢产物较多,粪便中较少。结论:本研究为治疗原发性痛经的的桃红四物汤在体内的生物转化特点,体内作用过程、药效作用机理及物质基础提供依据。     

甘草毛状根中甘草总黄酮和甘草酸的检测和分析

目的 检测甘草毛状根中总黄酮和甘草酸的含量。方法 采用紫外分光光度法检测甘草总黄酮含量,采用HPLC检测甘草酸含量。结果 甘草毛状根中的总黄酮含量在不同根系中有很大差异,最高可达0.803%,接近生药根;大多数根系高于正常组培根;总黄酮含量随着培养时间的延长呈增加趋势,至9周时增加了68.5%。不同甘草毛状根系中的甘草酸含量差异显著,部分根系未检出甘草酸,能检出的根系最高干重含量为0.69 mg·g^-1,远低于生药根(干重含量32.13 mg·g^-1),且含量不受培养时间影响。结论 甘草毛状根在目前情况下不适于作为甘草酸的获取资源,但作为甘草总黄酮获取的新资源,是值得进一步研究的。     

RP—HPLC法测定布洛芬-聚乙二醇6000固体分散体中布洛芬的含量

目的 建立反相高效液相色谱法测定布洛芬-聚乙二醇6000固体分散体中布洛芬的含量.方法 色谱柱为Shimadzu C18柱,流动相为0.02 mol·L^-1醋酸钠（冰醋酸调节pH至3.0±0.1）-乙腈（40：60）,流速1.0ml·min^-1,检测波长为264nm,进样量为20μl.结果 布洛芬质量浓度在0.051～1.02 mg·ml^-1范围内与相应峰面积呈良好线性关系（r=0.999 9,n=6）,平均加样回收率为98.40%,RSD为0.92%（n=9）.结论 所用方法准确、简便、快速,适用于布洛芬-聚乙二醇6000固体分散体中布洛芬的含量测定.     

原因不明反复自然流产患者血硒和GPX水平变化

目的 检测原因不明反复自然流产(URSA)患者血硒和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)水平变化,探讨其在反复自然流产发病中的作用.方法 采集URSA患者、正常妊娠妇女和非妊娠妇女(各30例)外周血检测血硒和GPX水平,以及红细胞谷胱甘肽(GSH)水平.结果 URSA患者血硒水平与正常妊娠妇女比较,差异无统计学意义(P>0.05),但比非妊娠妇女明显降低(P<0.01),URSA患者血浆GPX水平均比正常妊娠妇女和非妊娠妇女低(P<0.01),而红细胞GSH水平则明显增高(P<0.01).结论 GPX水平降低可能在URSA发生中扮演了重要角色.     

脑得生有效部位三七皂苷类成分含量测定

目的:建立脑得生有效部位中三七皂苷类成分的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为0.9 ml/min,检测波长为201nm;柱温为25℃。结果:人参皂苷Rg1的平均加样回收率为99.73%,RSD=1.59%,人参皂苷Rb1的平均加样回收率为99.16%,RSD=1.37%,三七皂苷R1的平均加样回收率为100.34%,RSD=1.90%。结论:该方法操作简便、易行、可用于脑得生有效部位中三七皂苷类成分的含量测定。     

凤尾蕨属6种药用植物抗肿瘤有效部位筛选

目的 对凤尾蕨属6种药用植物抗肿瘤有效部位进行筛选.方法 采用MTT法对凤尾蕨属6种药用植物不同溶剂萃取物进行体外抗肿瘤活性测试.结果 半边旗的醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物;刺齿半边旗的石油醚萃取物、醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物;井栏边草的醋酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物;剑叶凤尾蕨的醋酸乙酯萃取物;线羽凤尾蕨的正丁醇萃取物对人肺癌细胞A549增殖均有明显的抑制作用.结论 上述凤尾蕨属几种药用植物的萃取物具有较好的体外抗肿瘤活性,是其抗肿瘤作用的有效部位.     

光谱法研究人面果提取物12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A与牛血清白蛋白的相互作用

目的 研究傣药人面果的提取物126-羟基-去-D-杰氏山竹子素A与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.方法 应用紫外光谱法和荧光光谱法测定了12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A与BSA反应的结合平衡常数K、结合位点数n及其相互作用的机理.结果 在生理条件下,12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A与BSA作用导致BSA内源荧光猝灭,其猝灭机理为静态猝灭.其结合常数为:Ka =1.37×10(5)L·mol(-1),结合位点数为:n =0.95.结论 12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A与牛血清白蛋白具有较强的相互作用,能够结合形成较稳定的缔合物.     

黄芩汤对湿热型溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞因子的影响

目的观察湿热型结肠炎中Th1/Th2的状态以及黄芩汤对Th1/Th2的影响,探讨其治疗湿热型结肠炎的免疫学机制。方法采用高脂、高糖饲料联合人工气候箱法造出大鼠湿热型体质,结合三硝基苯磺酸(TNBS)法建立湿热型结肠炎模型;将60只大鼠随机分为空白组、湿热+TNBS组、黄芩汤组、美沙拉嗪组;对大鼠进行临床活动度观察、结肠组织的宏观和微观观察、检测结肠长度重量、脾脏和胸腺的重量和髓过氧化物酶(MPO)的活性、采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析大鼠血清和结肠组织中γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素10(IL-10)水平。结果黄芩汤能够有效缓解湿热型溃疡性结肠炎大鼠临床症状,降低大鼠血清及结肠组织Th1细胞因子INF-γ和IL-12并提高Th2细胞因子IL-4和IL-10的表达。结论黄芩汤可以改善湿热型溃疡性结肠炎的炎症反应,调节Th1/Th2细胞的平衡,这可能是其治疗湿热型溃疡性结肠炎的作用机制之一。     

两种实验优化方法的比较研究:在制备薄荷油-β-环糊精包合物过程中的应用

目的 比较正交实验与box-behnken实验两种实验设计方法在制备薄荷油-p-环糊精包合物过程中的应用,以期对两种实验设计方法进行合理选择.方法 采用饱和水溶液法制备包合物,考察因素为B-环糊精/薄荷油比例(w/v)(X1)、包合时间(X2)与包合温度(X3),以包封率和收率为考察指标,在薄荷油-p-环糊精包合物实验设计中应用上述两种设计方法,优化制备薄荷油包合物最佳条件,并对两种方法得到的优化结果进行了比较.结果 正交实验结果为β-CD用量与挥发油比例为8∶1,包合时间为3h,包合温度为45℃;box-behnken实验结果为β-CD用量与挥发油比例为6∶1,包合时间为3.4h,包合温度为45℃.正交实验所需实验次数少,相对简单.结论 用两种方法来寻求薄荷油-B环糊精包合物最佳制备工艺都是可行的,两者实验结果基本接近,正交实验所需实验次数少相对简单,但Box-behnken实验设计在进行非线性模式设计和研究中具有优势.