中国西部地区男男性行为人群艾滋病相关知识及行为调查分析

目的:中国西部地区男男性行为人群(Men who have sex with men,MSM)艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染率较高,对该地区MSM的艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)相关知识及行为进行调查,为制定该人群艾滋病防治策略及行为干预措施提供较为切实的依据和参考.方法:研究设计为横断面调查,于2009年7月至2010年4月对我国西部的重庆、四川、广西三省市1407名MSM进行问卷调查.结果:MSM的年龄中位数是26岁,同性恋者占69.26%,双性恋者占21.40%.艾滋病相关知识知晓率为88.37%.最近6个月,61.22%的MSM有2个及以上同性性伴,7.42%的有同性商业性行为,12.48%的有异性性行为.近6个月内男男肛交性行为时每次都坚持使用安全套的占46.40%.最近6个月与不同对象发生性行为时的安全套使用有差别(P＜0.05).不同地区、是否多性伴和是否有同性商业行为与安全套的使用有关联.结论:中国西部地区MSM人群中普遍存在感染艾滋病的高危行为,且与其较高的艾滋病知识水平分离现象严重,这对该人群的行为干预提出了挑战,因此,探索控制MSM人群艾滋病传播的新干预模式具有重要意义.     

载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体结合脂质后抗炎性能的变化

目的 探讨载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白抗炎能力.方法 应用脂多糖诱导构建内毒素血症小鼠模型,选取3种半胱氨酸突变体[A-I(S52C)、A-I(K107C)、A-I(R173C)]及野生型载脂蛋白A-I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)构建重组高密度脂蛋白(rHDL52、rHDL107、rHDL173、rHDLwt)注射小鼠作为干预组(每组10只小鼠),以脂多糖组(9只小鼠)、生理盐水组(5只小鼠)作为对照.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测4种重组高密度脂蛋白干预后对肿瘤坏死因子(TNF)α,白细胞介素(IL)1β和IL-6的影响.病理检测各组小鼠肺组织.结果 小鼠注射后24 h,rHDL52组血清中TNF-α和IL-1β明显低于rHDLwt组[(39.66±2.44)pg/ml比(135.28±12.84)pg/ml;(66.83 ±6.24)pg/ml比(82.00±8.19)pg/ml,均P＜0.05].常规病理分析显示,rHDL52比rHDL107、rHDL173及rHDLwt更能够降低炎症细胞的浸润,保护肺器官免受损伤.结论 rHDL52拥有较野生型载脂蛋白更强的抗炎能力.     

应用锁核酸探针技术检测肿瘤样本中K—ras基因突变

目的应用锁核酸探针技术检测肿瘤样本中K—ras基因突变,探讨其诊断价值。方法结合锁核酸TaqMan探针与实时荧光PCR技术建立K一ras基因突变快速检测法,与传统聚合酶链反应一单链构象多态性分析法（PCR—SSCP）及测序结果进行比较,评价新方法的诊断价值。结果锁核酸探针PCR法可对肿瘤样本中K—ras基因突变进行有效检测,操作简便;可在104倍的野生型K—rag基因背景下检测出突变,灵敏度为0．1％,可检测突变基因最低限为10拷贝/mL,相对应传统方法,本方法可同时进行较大规模的样品检测,更快捷和灵敏。结论锁核酸探针实时荧光PCR法较PCR—SSCP法有明显优势,适用于大规模临床样本的K—ras基因突变检测,可作为肿瘤筛查和预后判断有效手段。     

炎症干扰PPARγ-LXRα-ABCA1途径介导的肾小球系膜细胞胆固醇外流

目的:观察炎症能否干扰过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)-肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)途径介导的人肾小球系膜细胞(HMCs)的胆固醇外流。方法:将HMCs分为4组:对照组、高脂组[细胞给予100 mg/L低密度脂蛋白(LDL)处理]、炎症组[细胞给予20μg/L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理]、联合干预组(细胞给予20μg/L TNF-α+100 mg/L LDL处理)。采用实时定量PCR和W esternb lotting方法检测PPARγ、LXRα和ABCA1的mRNA及蛋白表达水平。用[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。用油红O染色法及化学酶促-比色法观察HMCs中脂质积聚情况。结果:与对照组相比,高脂组PPARγ、LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白的表达明显增加,单纯的炎症刺激可下调它们的表达,而联合干预组中上述各基因和蛋白表达量比高脂组明显下降。胆固醇外流测定结果显示:与对照组相比,高脂组胆固醇外流量增加,而炎症组胆固醇外流量降低,联合干预组比高脂组胆固醇外流量明显减少。油红O染色提示联合干预组细胞内脂质积聚明显高于其余3组。细胞内胆固醇含量测定亦显示炎症能进一步加重胞内脂质积聚。结论:炎症因子可通过抑制PPARγ-LXRα-ABCA1表达导致HMCs胆固醇外流减少,加重细胞内脂质积聚。     

hnRNP A2/B1 mRNA在非小细胞肺癌和转移淋巴结中表达及意义

目的：探讨肺癌早期诊断基因核内不均一核糖体表达对肺癌淋巴结微转移的作用。观察hnRNP A2/B1 在各组织类型肺癌中的表达。方法：42例非小细胞肺癌患者开胸手术纵隔淋巴结清扫获取原发灶及纵隔淋巴结病理标本,12例肺良性病变手术切除标本作正常对照。荧光定量PCR检测切除肿块和淋巴结的hnRNP A2/B1 mRNA表达。结果：(1)转移性淋巴结中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平561.393显著高于无转移淋巴结156.669 (P＜0.05)。(2)Ⅲ期肺癌组织中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平305（249,533）显著高于Ⅰ期和Ⅱ期肺癌组织(2＝13.453,P＜0.01)。(3)hnRNP A2/B1 mRNA在鳞癌和腺癌中的表达水平分别为207(152,305)和249(177,476), Z=-0.899,P>0.05。(4)58组淋巴结阳性,84组阴性,42个病人142组区域淋巴结hnRNP A2/B1 mRNA阳性率为40.84%(58/142),12例肺良性疾病组织均阴性,HE染色42个病人的50组转移淋巴结阳性率为35.21%,与FQ-PCR 58枚（52.11%）无显著差异（P>0.05）。结论：NSCLC 癌组织存在着hnRNP A2/B1 的过度表达。NSCLC癌组织中hnRNP A2/B1表达水平与淋巴结转移状态及P-TNM 分期有关。 hnRNP A2/B1 检验敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断的标记。     

ERK在ALR抑制免疫过程中的变化及意义

目的观察肝再生增强因子(ALR)对外周血单核细胞增殖时ERK的影响,以探明ALR免疫抑制相关机理。方法梯度离心法分离健康人外周单核细胞,用ConA 5μg/ml刺激细胞增殖,选定最佳研究时间;观察不同剂量ALR抑制功能,选用最佳抑制剂量;利用Western blot检测ALR抑制细胞增殖时ERK的磷酸化改变。结果 ConA刺激细胞增殖最佳时间是60 h,ALR能抑制细胞增殖,并呈剂量依赖关系,30μg/ml ALR抑制效果最显著;ALR对单核细胞无直接增殖作用。ConA能引起ERK含量和磷酸化明显增加,ALR则抑制ConA对ERK的刺激,以抑制ERK2最明显。结论 ALR可能通ERK的含量和抑制ERK2的磷酸化抑制细胞增殖。     

贵州少数民族胱硫醚-β-合酶基因C699T的分布

目的 对中国贵州雷山苗族和三都水族群体胱硫醚-β-合酶基因C699T进行多态性分析,计算其基因频率,获取相应的遗传信息.方法 采用nest-PCR和变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术寻找突变基因,对突变基因的PCR产物进行基因直接测序,并与文献报道的各种人群的相应数据进行比较.结果 雷山苗族和三都水族群体的胱硫醚-β-合酶基因699T等位基因频率分别为5.1%和5.4%.结论 雷山苗族和三都水族两个群体间胱硫醚-β-合酶基因699T等位基因差异无统计学意义,但它们均显著低于黑种人和白种人群体.     

胃癌与癌旁组织miRNA差异表达谱的研究

目的 研究胃癌中表达失调的miRNA及其生物学功能,从而进一步阐明miRNA在胃癌发生中的分子机制.方法 将总RNA加ploy(A)尾后进行反转录PCR扩增特异miRNA,使用QuantityOne软件进行定量分析,计算每对样本胃癌与癌旁组织比值(T/N Ratio),使用SAM软件进行统计分析.MTT法检测miR-21和miR-17-5p对胃癌细胞系生长的影响.结果 在8对胃癌及癌旁组织样本中对237个miRNA进行了表达谱分析.对于检测到表达的161个miRNA,使用SAM软件进行统计分析,确认22个在胃癌中表达上调,2个在胃癌中表达下调(FDR=0.0963).进一步通过生长抑制试验证实在胃癌组织中表达异常增高的miR-21和miR-17-5p对胃癌细胞的生长有明显的促进作用.结论 这些在胃癌中异常表达的miRNAs具有成为新一代胃癌标记物的潜力,能够为胃癌的精确诊断分型提供依据,同时针对这些靶点可以开发新的核酸治疗技术,通过抑制或增强其功能来达到治疗胃癌的目的.     

程序性细胞死亡因子4在喉鳞状细胞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的:探讨喉鳞状细胞癌中程序性细胞死亡因子4(PDCD4)蛋白表达与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系及其临床意义。方法:采用免疫组织化学技术检测60例喉鳞状细胞癌组织及21例正常喉黏膜上皮组织中PDCD4和Ki-67的表达,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,以细胞增殖指数(PI)和细胞凋亡指数(AI)表示增殖与凋亡。结果:喉鳞状细胞癌组织中PDCD4蛋白阳性表达率低于癌旁正常喉黏膜组织(P<0.01),喉鳞状细胞癌组织中PDCD4蛋白阳性表达和喉鳞状细胞癌临床分型(肿瘤部位)、TNM分期无关,与病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05);喉鳞状细胞癌组织细胞PI明显高于癌旁正常喉黏膜组织(P<0.01),细胞PI与喉鳞状细胞癌临床分型(肿瘤部位)、病理分级、淋巴结转移无关,与TNM分期有关(P<0.05);喉鳞状细胞癌组织细胞AI明显高于癌旁正常喉黏膜组织(P<0.01),细胞AI与喉鳞状细胞癌临床分型(肿瘤部位)、TNM分期、淋巴结转移无关,与病理分级有关(P<0.01);喉鳞状细胞癌PDCD4阳性表达的细胞PI低于阴性组(P<0.05),细胞AI高于阴性组(P<0.05)。结论:PDCD4在喉鳞状细胞癌中低表达,可能与喉鳞状细胞癌细胞的增殖和凋亡均有一定的关联。     

阿尔茨海默病G蛋白-腺苷酸环化酶系统信号途经的机理、防治综述

在AD的发病过程中,多种信号分子的含量异常及分布改变,以及信息传递通路异常,在AD病理改变改变中发挥重要作用;信息传递与信号通路异常是AD发病机制的一个共同途径。第一,AD中,Gia、Gsa蛋白的表达差异是引起腺苷酸环化酶信号系统功能失调;第二,G蛋白的偶联活性的差异是引起腺苷酸环化酶系统信号功能失调的原因:(1)AC与Gia、Gsa蛋白偶联环节出现障碍是AD中AC功能失调的重要原因。(2)G蛋白及其GTP酶活性失常是AD信号转导功能障碍的原因;第三,AD中,G蛋白与受体偶联障碍及受体脱敏是影响G蛋白活性的重要方面;第四,配体激活G蛋白偶联受体的能力损害也是AD中AC功能失调的重要原因;最后,腺苷酸环化酶信号系统功能失调是导致AD病理改变的原因。AD中,G蛋白介导腺苷酸环化酶信号系统功能失调对AD的防治策略有重要启示作用。