Fas基因沉默对帕金森病大鼠脑纹状体多巴胺能神经元凋亡的影响及机制研究

目的 探讨脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,Fas)基因沉默对帕金森病大鼠脑纹状体多巴胺能神经元凋亡的影响及机制。方法 取40只大鼠,30只大鼠脑纹状体注射4 μL 6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine Hydrobromide,6-OHDA)建立帕金森病大鼠模型,剩余10只为假手术组,脑纹状体注射等量2 g/L抗坏血酸的生理盐水; 取建模成功的27只大鼠并随机分为模型组、阴性对照组和沉默组,每组各9只; 阴性对照组和沉默组分别向大鼠纹状体内注射3 μL含无义序列的短片断干扰RNA(Small interfer RNA,siRNA)和Fas siRNA,模型组和假手术组分别向大鼠纹状体内注射等量生理盐水; 干预1周后实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测大鼠纹状体多巴胺能神经元Fas mRNA和蛋白相对表达水平,苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察大鼠纹状体多巴胺能神经元损伤情况,原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick and labeling,TUNEL)染色检测大鼠纹状体多巴胺能神经元凋亡,RT-qPCR,Western blot检测纹状体多巴胺能神经元Fas配体(Fas Ligand,Fasl)、Fas相关死亡结构域蛋白(Fas-associateddeathdomain,FADD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Cysteine containing aspartate-specific proteases-8,Caspase-8)mRNA、蛋白相对表达水平。结果 与假手术组比较,模型组、阴性对照组和沉默组Fas mRNA和蛋白相对表达水平升高(P<0.05); 与模型组和阴性对照组比较,沉默组Fas mRNA和蛋白相对表达水平降低(P<0.05); HE染色显示,Fas基因沉默后神经元排列紊乱程度及胞质肿胀程度减轻,间质较为清晰,空泡皱缩坏死减少; 与假手术组比较,模型组、阴性对照组和沉默组神经元凋亡率升高(P<0.05); 与模型组和阴性对照组比较,沉默组神经元凋亡率降低(P<0.05); 与假手术组比较,模型组、阴性对照组和沉默组Fasl,FADD,Caspase-8 mRNA及蛋白相对表达水平升高(P<0.05); 与模型组比较,沉默组Fasl,FADD,Caspase-8 mRNA及蛋白相对表达水平降低(P<0.05)。结论 Fas基因沉默能抑制帕金森病大鼠脑纹状体多巴胺能神经元凋亡,且可能通过下调Fas,Fasl,FADD,Caspase-8 mRNA及蛋白表达水平来发挥调控作用。     

两种检测方法对牛环形泰勒虫病感染的调查

为进一步了解新疆托克逊县某地各年龄段牛环形泰勒虫病的感染情况,本实验应用血液涂片法和PCR检测法分别对随机采集的104头份牛全血进行了对比检测,并分析了4个年龄段牛环形泰勒虫病的感染情况。结果表明,104头份牛全血涂片染色镜检的阳性率为51.0%(53/104),PCR方法检测阳性率为57.7%(60/104),PCR的检测阳性率高于全血涂片染色结果;该地四个年龄段牛,1~2岁龄牛环形泰勒虫病的感染率高于其它三个年龄段,感染率为72.7%(8/11)。     

非优势A1侧翼点入路夹闭破裂前交通动脉瘤的临床研究

目的比较非优势A1侧翼点开颅与优势A1侧翼点开颅夹闭破裂前交通动脉瘤的效果,并探讨其相关适应证。 方法回顾性分析江西省人民医院神经外科自2013年9月至2019年9月存在优势A1现象的58例破裂前交通动脉瘤患者的临床资料。其中32例采用非优势A1侧翼点开颅,为非优势A1侧组;26例采用优势A1侧翼点开颅,为优势A1侧组;比较2组患者的显微镜下操作时间,夹闭方式（简单夹闭、复杂夹闭）,术后3个月及1年的动脉瘤残留或复发情况,术后1年GOS评分等指标。 结果非优势A1侧组简单夹闭25例,复杂夹闭7例;优势A1侧组简单夹闭12例,复杂夹闭14例,2组比较差异有统计学意义（χ²=5.148,P=0.022）。非优势A1侧组的显微镜下操作时间为（1.57±0.32）h,术后3个月动脉瘤残留或复发有2例（6.25%）、3例（9.38%）,术后1年预后良好率为90.63%;优势A1侧组的显微镜下操作时间为（1.63±0.37）h,术后3个月动脉瘤残留或复发有2例（7.69%）、2例（7.69%）,术后1年预后良好率为92.31%;2组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论采用非优势A1侧翼点开颅夹闭前交通动脉瘤能够易化动脉瘤颈显露过程并简化夹闭方式,但需严格把握手术指征。     

瑞舒伐他汀与阿托伐他汀治疗老年高脂血症患者临床疗效的比较

目的探讨瑞舒伐他汀治疗老年高脂血症患者的疗效和安全性,并与阿托伐他汀进行比较。方法选择2012年6¹2月在我院门诊干部诊疗科就诊的老年患者128例,随机分为瑞舒伐他汀组64例(瑞舒伐他汀5mg/d)和阿托伐他汀组64例(阿托伐他汀10mg/d),共治疗8周。2组患者继续原发病的常规治疗,停用其他调脂药物2周,以减少对疗效判断的干扰。结果治疗8周后,瑞舒伐他汀组TC、TG和LDL-C下降幅度分别为25.9%、13.5%和33.7%,阿托伐他汀组下降幅度分别为22.6%、12.1%和31.4%,2组下降幅度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。瑞舒伐他汀组与阿托伐他汀组HDL-C上升幅度差异有统计学意义(9.7%vs 3.2%,P<0.05)。2组患者对药物的依从性好,无药物不良反应。结论瑞舒伐他汀5mg与阿托伐他汀10mg在降低TC、TG及LDL-C方面相似;瑞舒伐他汀可提高HDL-C水平,且在老年患者中两者安全性相同。     

天王补心丹的临床应用

天王补心丹出自《摄生秘剖》由酸枣仁、柏子仁、麦冬、天冬、五味子、党参、当归、生地黄、玄参、丹参、茯苓、远志、桔梗组成,具有滋阴清热、养血安神之功效,主治阴虚火扰证[1]。西苑医院周绍华教授善用该方,因为抓住了心阴虚这一根本病机,根据异病同治的宗旨,辨病与辨证结合的原则,将原方适当加减治疗神经科、精神科及内科其他杂病,取得满意疗效。现举验案四则如下。     

乳腺癌相关成纤维细胞miRNA表达的检测和分析

目的研究人乳腺癌微环境癌相关成纤维细胞(CAF)与正常成纤维细胞(NF)miRNA表达的差异及其对CAF的生物学功能的影响。方法运用1型胶原酶消化法分别处理临床乳腺癌患者的癌组织和对应癌旁组织标本,原代分离培养CAF和NF细胞;利用免疫荧光法和Western blot法分析CAF和NF细胞成纤维细胞分泌蛋白(FSP)的表达情况,对所分离培养的细胞进行纯度和特性鉴定;利用TranswellTM实验比较CAF与NF细胞的侵袭能力;利用miRNA芯片和芯片结果显著性差异(SAM)分析法分析CAF与NF细胞miRNA表达的差异;对差异miR-205和miR-221,在原代培养的CAF和NF进行实时定量PCR(qRT-PCR)验证;利用多种生物信息学软件预测差异miRNA的靶基因;利用DAVID软件对靶基因进行信号通路富集度分析。利用ELISA检测TGF-β和IL-6信号通路的核心蛋白基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2和MMP-9的表达差异。结果成功分离得到原代培养的CAF与NF细胞,纯度大于95%;与NF细胞相比,CAF细胞的侵袭能力明显增强;miRNA芯片分析结果显示,CAF有10个变化倍数1.5的异常表达miRNA(P0.05),其中3个上调表达(miR-221-5p、miR-31-3p、miR-221-3p),7个下调表达(miR-205、miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-101、miR-342-3p、let-7g)。信号通路富集度分析发现,miRNA靶基因与细胞分化、细胞黏附、细胞迁移、细胞增殖、细胞分泌和细胞间相互作用等密切相关,其中,异常表达的miR-200b/c和miR-141等miRNA通过抑制其靶基因,影响TGF-β信号通路、IL-6信号通路,进而影响CAF的侵袭和转移。结论人乳腺癌微环境CAF的miRNA表达谱发生显著变化,CAF细胞中异常表达miRNA可能参与了NF向CAF的转化,并与CAF细胞的增殖、黏附、侵袭、转移有密切关系。     

重庆某三甲医院2011年—2017年住院患者医院感染现患率调查*

目的 了解重庆市某三甲医院住院患者医院感染现患率及其变化趋势,为有效预防和控制医院感染提供科学依据。方法 采用横断面调查的方法,从2011年—2017年连续7年对重庆市涪陵中心医院住院患者医院感染现患率进行调查与分析。结果 7年共调查住院患者8?663例,发生医院感染427例、483例次,感染现患率为4.93%、例次感染率为5.58%;7年感染科室均以重症医学科等为主;感染部位以下呼吸道为主;病原微生物检出率67.68%,前5位病原微生物以鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、真菌为主,其中大肠埃希菌的检出率呈下降趋势,肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的检出率呈上升趋势;抗菌药物平均使用率为30.77%,预防性用药比例呈下降趋势,联合用药均以一联单用为主。结论 在横断面调查的基础上,要加强临床医师对相关专业知识的培训,增强医务人员医院感染预防控制的观念,做好监测工作,健全监测制度,完善监测体系,使医院感染率控制在较低水平。     

非布司他治疗慢性肾病伴高尿酸血症的疗效和机制分析

目的 分析非布司他治疗慢性肾病伴高尿酸血症的疗效和机制。方法 回顾2015年10月-2017年10月到河南医学高等专科学校附属医院诊治的慢性肾病伴高尿酸血症的患者共108例,按照随机原则分为两组,观察组54例患者采用非布司他治疗,对照组54例患者采用别嘌醇治疗,疗程均为24周。检测两组患者治疗前后血尿酸（UA）、血肌酐（Scr）、肾小球滤过率估算值（eGFR）、血尿素氮（BUN）、血白蛋白（Alb）和尿微量蛋白尿（u-mAlb）水平,比较两组患者疗效,记录肝功能受损、皮疹、胃肠道反应和血脂升高等不良反应发生情况。结果 治疗前两组患者各项指标无明显差异;治疗后UA、Scr、BUN、u-mAlb、eGFR均较治疗前明显降低,Alb较治疗前明显升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）;且治疗后观察组患者UA、Scr、BUN和u-mAlb明显低于对照组,eGFR和Alb明显高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组患者高尿酸血症治疗总有效率为77.78%,明显高于对照组患者的55.56%,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组患者肾功能治疗总有效率为83.33%,明显高于对照组患者的62.96%,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组肝功能受损、皮疹、胃肠道反应和血脂升高等不良反应发生率明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 非布司他治疗慢性肾病伴高尿酸血症疗效确切,能够有效降低血尿酸水平,保护患者肾功能,不良反应发生率低,建议临床推广应用。     

解除大鼠腹主动脉缩窄逆转左心室肥厚的形态学观察

目的通过解除大鼠腹主动脉缩窄逆转左心室肥厚,并比较逆转后大鼠心脏和左心室肥厚心脏及正常大鼠心脏的形态学、胶原容积分数和凋亡指数的差别。方法雄性SD大鼠75只,随机分为正常组(n=15)、缩窄组(n=30)和解除缩窄组(n=30)。缩窄组和解除缩窄组行第1次手术通过缩窄腹主动脉方法建立左心室肥厚模型。术后第5周确认动物模型成功后,解除缩窄组大鼠行第2次手术解除腹主动脉狭窄。采用心脏超声、常规病理和定量病理等多种技术方法,对各组大鼠在第1次手术(腹主动脉缩窄)后第5周、第2次手术(解除缩窄)后第4周行形态学观察及形态学定量分析。结果腹主动脉缩窄后第5周,大鼠室间隔舒张期末厚度、左心室后壁舒张期末厚度显著增厚;心脏质量指数、左心室质量指数、心肌胶原容积分数、心肌凋亡指数显著增加;解除缩窄后的第4周,解除缩窄组大鼠上述指标显著下降,但仍高于正常组。结论通过解除大鼠腹主动脉缩窄可以部分逆转左心室肥厚,大鼠心脏形态、心肌胶原容积分数、凋亡指数有明显改善,但与正常大鼠仍有差异。