siRNAs介导的基因沉默技术和相关应用的研究进展

RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的、序列特异的转录后基因沉默机制,是一古老的细胞反应通路,其在抵抗病毒感染、抑制转座子活动、调控内源性基因表达等方面发挥重要作用.近年来,短链RNA干扰(siRNAs)已成功地应用于哺乳动物中,该文就其介导的基因沉默技术和相关应用的研究进展进行综述.     

丙酮缩去炎舒松局部注射治疗Graves病伴甲状腺肿大30例疗效观察

目的对Graves病伴甲状腺肿大的患者局部注射长效糖皮质激素,观察其对甲状腺肿大的疗效.方法将60例患者随机分为注射组和对照组,每组30例,均给予抗甲状腺药物治疗.另外,注射组在肿大的甲状腺内注射丙酮缩去炎舒松,每次40mg,每月注射1次,3次为一疗程.结果一疗程结束后观察到注射组有明显的消甲状腺肿效果,与治疗前比较有显著性差异(P＜0.005),较对照组疗效为优(P＜0.01),且同时观察到本疗法有助于下调甲状腺球蛋白抗体(TGA)、甲状腺微粒体抗体(MCA).结论局部注射长效糖皮质激素丙酮缩去炎舒松,对于Graves病患者的甲状腺肿大具有显著的消退作用,且可能对Graves病的总体疗效有促进作用.     

高龄乳腺癌患者并存病的围手术期处理

目的探讨高龄乳腺癌患者并存病的围手术期处理。方法回顾分析80例60岁以上乳腺癌患者并存病的围手术期处理资料。结果并存糖尿病20例，高血压35例，心脏病10例，呼吸系统疾病5例，肝功能不全10例；术后伤口感染4例，肺部感染2例，皮下积液4例；围手术期无1例死亡。结论虽然并存病增加了手术风险，但术前全面了解病情，加强并存病的围手术期处理可大大提高手术成功率，降低手术死亡率和并发症发生率。     

鼻咽癌放射治疗后放射性脑损伤的诊断及防治

目的:探讨鼻咽癌放射治疗后放射性脑损伤的防治。方法:回顾分析放射性脑损伤4例,探讨其临床特点、诊断方法及防治。结果:1例脑干损伤经多方治疗不可逆转,在出现神经症状6个月后全身衰竭死亡。无瘤生存3例,生存时间48~60个月,生活自理。结论:放射性脑损伤是鼻咽癌放射治疗后长期生存者常见的并发症,治疗效果不理想,疗效难以评定,主要在于预防,预防的关键在于合理的设野。     

肝包虫病的螺旋CT诊断

目的:提高对肝包虫病的螺旋CT表现的认识。方法:回顾分析经本院螺旋CT检查及手术病理证实的21例肝包虫病螺旋CT表现。结果:囊型包虫病18例,其中单纯囊肿8例,表现为圆形水样密度区。多子囊型10例,表现为在一个大囊内可见数量不等的更低密度小圆形低密度区,边界清晰。钙化14例,为囊壁壳状钙化囊内不定形条片状钙化。包虫囊肿合并感染4例,表现为囊壁增厚,强化明显。泡型包虫病3例,呈不规则及不均匀密度影,所有病灶内均有钙化灶,其中1例病灶边缘有晕样改变区。所有病例CT均诊断正确。结论:螺旋CT可以很好显示肝包虫病病灶,对肝包虫病具有较高的诊断率。     

经皮激光椎间盘减压术加中药内服治疗腰椎间盘突出症36例疗效观察

目的：观察经皮激光椎间盘减压术（PLDD）加中药内服治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将73例患者随机分为2组。治疗组36例，采用PLDD术后联合中药二陈汤加活血祛瘀药内服治疗；对照组37倒，单纯采用椎板开窗髓核摘除术治疗。观察临床疗效及住院天数、手术时间、术中出血量等情况。结果：优良率治疗组为80．56％，对照组为81．08％，2组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。但在住院天数、手术时间、术中出血量方面，治疗组与对照组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）。结论：PLDD术后联合中药二陈汤加活血祛瘀药内服治疗腰椎间盘突出症，具有住院天数短、手术时间短、术中出血量少和术后恢复快等优点，是微创加中药内服治疗腰椎间盘突出症的首选方法。     

高效液相色谱法测定参茸口服液中人参皂苷Rg1含量

目的:测定参茸口服液人参皂苷Rg1的含量。方法:用高效液相色谱法测定Rg1的含量。色谱分析采用DiamonsilTM(钻石),C18色谱分析柱,流动相为乙腈-磷酸二氢钾缓冲液(25∶75)pH3.5,柱温30℃;紫外检测波长为203nm;流速为1.0mL·min-1。实验数据用Gilson715液相色谱工作站处理。以峰面积外标法定量。结果:人参皂苷Rg1进样量在0.10042~0.90378μg,与峰面积分值呈良好的线性关系。r=0.9996(n=5),平均回收率为100.06%。结论:此方法简便、快速、精度高、分离度好,可作为参茸口服液成品中人参皂苷Rg1的定量分析。     

具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙的体外细胞毒性研究

目的 利用体外细胞培养技术,对具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙的细胞毒性进行研究.方法 采用体外培养的小鼠成纤维细胞(L-929),在培养液中分别添加不同浓度的β-磷酸三钙浸提液(原液及2、4、8、16倍稀释液),于接种后 72 h 通过 MTT 法显色,在酶标仪 490 nm 波长处测定吸光度值,计算相对增殖率(RGR),对β-酸三钙的细胞毒性进行评价.结果 各组的 RGR 值均≥80%,各浓度组之间差异无显著性意义(P>0.05),提示L-929细胞增殖与β-磷酸三钙浸提液的浓度无明显相关,不同浓度浸提液的细胞毒性为0～1级.结论 具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙对细胞的生长和增殖无明显抑制作用,无明显的细胞毒性.     

成人Bartter综合征2例报道并文献复习

目的 分析成人Bamer综合征的临床特点。方法 回顾性分析2例本病。结果 2例均为青年女性，均有不同程度的多饮、多尿、肌无力和抽搐；实验室检查均表现为低血钾、代谢性碱中毒，血肾素活性、血管紧张素Ⅱ及醛固酮明显升高，而血压正常；补钾、补镁、安体舒通等治疗后症状缓解，血钾水平升高。结论 成人出现双下肢乏力，低血钾碱中毒，而血压正常时需考虑本病，本病行立-卧位肾素-血管紧张素-醛固酮测定可基本诊断，必要时行肾穿刺活检；治疗以补钾为主，辅助治疗包括补镁、前列腺素合成酶抑制剂、醛固酮拮抗剂等。     

抑制端粒保护蛋白TPP1表达诱导ATM依赖的DNA损伤反应

目的:构建端粒保护蛋白TPP1短发夹RNA表达载体,探讨抑制TPP1表达后对端粒DNA损伤及细胞增殖的影响.方法:体外构建端粒保护蛋白TPP1 shRNA逆转录病毒表达载体shTPP1-01,shTPP1-02,与表达外源性TPP1的TPP1-HA质粒共同转染293T细胞,Western Blot检测shTPP1抑制外源性TPP1蛋白表达;RT-PCR检测shTPP1抑制小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast, MEF)内源性TPP1 mRNA的表达. 再用shTPP1分别感染ATM / MEF和ATM-/- MEF细胞后,分别采用细胞生长曲线和BrdU掺入法检测细胞增殖,免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交法(IF/PNA-FISH)检测端粒功能障碍诱导损伤灶(TIF)的形成.结果:shTPP1-01和shTPP1-02均能明显抑制外源性TPP1蛋白和内源性TPP1mRNA的表达,shTPP1-01和shTPP1-02作用于原代培养的MEFs后细胞生长缓慢,BrdU阳性细胞数量分别占8.0%和8.7%,显著低于对照细胞的29.3%(P＜0.01, P＜0.01);而细胞表现为体积变大,形态扁平等类似细胞衰老的形态学改变;IF/PNA-FISH法检测结果显示,shTPP1作用于ATM / MEF细胞后导致端粒DNA损伤标志物-磷酸化的H2AX(γ-H2AX)和53BP1损伤灶(TIF)的形成,定量结果显示约50%的ATM / 细胞中出现至少5个TIF;而在shTPP1作用后的ATM-/-细胞中,端粒γ-H2AX 和53BP1形成的TIF数量显著减少,出现5个TIF的细胞数量不足5%,与对照组细胞相比无显著性差异.结论:抑制TPP1表达后诱发端粒ATM依赖的DNA损伤反应,进而抑制细胞增殖,促进细胞衰老.