Novel estrogen receptor ligands and their structure–activity relationship evaluated by scintillation proximity assay for high‐throughput screening

The estrogen receptor (ER) is an important drug target with allosteric characteristics that binds orthotopic hormones and other ligands. A recently developed scintillation proximity (SPA)‐based assay for high‐throughput screening (HTS) of compound libraries was used to identify novel estrogen receptor ligands that might have ER subtype selective binding activity. Radioligand binding was determined in a multi‐detector scintillation counter designed for microtitration plates. Equilibrium binding experiments and kinetic competition tests were performed with [³H]‐estradiol and human ERα and ERβ receptors. A library of 6,000 structurally diverse compounds was screened. From this, several novel ligands were identified that showed pronounced subtype‐selective differences in ligand binding for ERα and ERβ. The observed equilibrium dissociation constant (K_d) for the binding of [³H]estradiol to ERα and ERβ receptors were approximately 0.25 and 0.64 nM, respectively. When 17β‐estradiol, raloxifene and daidzein were tested for binding affinity to ERα in a competition assay, the IC₅₀ values were 0.34, 1.31, and 75.6 nM, respectively. When tested for binding affinity to ERβ, the IC₅₀ values were 1.05, 11.4, and 10.6 nM, respectively. The results obtained show that the methodology is valid in comparison to previously published data regarding estradiol and other standard compounds (raloxifene and daidzein) binding characteristics of estrogen receptors. The assay is also well suited to applied research as a tool in HTS of compound libraries in the search of ER ligands. Several novel active compounds were identified and selected as potent ER subtype ligands. Drug Dev Res 64:203–212, 2005. © 2005 Wiley‐Liss, Inc.     

黄精首乌有效部分均匀设计组合对高脂血症大鼠抗氧化能力的影响

目的:研究黄精、首乌有效部分的不同组合对高脂血症大鼠抗氧化能力的影响,为有效部分的优化组合提供依据。方法:将大鼠分为对照组、模型组和实验组。用生化测定方法测定各组大鼠的生化指标,用单因素方差分析及多重比较分析组间均值;采用综合平衡法,通过逐步回归分析和数论网格法对有效部分组合进行优选。结果:与模型组比,NO有3个实验组、MDA的8个实验组、GSH -Px有6个实验组、SOD有5个实验组、TAo有4个实验组存在显著差异(P <0 0 5 )。与对照组比,5个实验组的HDL有显著差异(P <0 0 5 ) ;GSH有5个实验组、GSH -Px有2个实验组、SOD有4个组、TAo有4个实验组存在显著差异(P <0 0 5 ) ;NO、MDA和CAT的8个实验组均无明显差异(P >0 0 5 )。结论:黄精、首乌有效部分的不同组合对高脂血症大鼠抗氧化能力提高作用程度不同。因此,通过研究黄精、首乌有效部分不同组合的量-效关系以便达到合理提取、组合及应用的目的是极其必要的     

计算机编程建立肝脏移植患者他克莫司的有效血药浓度范围

目的 :为临床合理化使用免疫抑制剂他克莫司 (FK5 0 6 )提供理论依据 ,建立适合中国人肝脏移植受者FK5 0 6的有效血药浓度范围。方法 :用VISUALBASIC 6 .0开发程序 ;程序对用微粒子酶免分析法 (MEIA)测定全血FK5 0 6的血药浓度数据进行处理。结果 :肝脏移植术后 1mo内FK5 0 6理想有效血药浓度范围为 7～ 14 μg·L-1。结论 :该程序是开展治疗药物监测工作非常实用的工具 ,按程序所推荐浓度范围调整给药方案 ,既可获得满意的免疫抑制效果 ,又能减少排斥反应和FK5 0 6毒性     

超滤法在海洋真菌多糖分离纯化工艺中的应用

目的用超滤法代替透析法去除海洋真菌多糖提取液中的单糖等小分子杂质。方法采用中空纤维超滤膜 ,对多糖去蛋白质后的提取液通过超滤去除小分子杂质 ,同一批提取液中取出部分用透析法处理 ,作平行对照。结果原液浓度、操作压力等影响参数优化后得到的产品 ,多糖得率和含量都不低于对照组 ,而且洗脱曲线也与对照组相似。结论超滤法适用于海洋真菌多糖的分离纯化 ,可供中试生产使用     

壳聚糖复方制剂对脂肪肝大鼠的治疗作用及其机制的探讨

目的 :进一步研究壳聚糖复方制剂对实验性脂肪肝大鼠的治疗作用及其机制。方法 :采用小剂量CCl4 致肝损伤并高脂饮食建立大鼠脂肪肝模型 ,给予模型大鼠壳聚糖复方制剂 0 .7g·kg- 1·d- 1灌服 8wk ,检测肝脏三酰甘油 (TG )、总胆固醇(TC)、血清及肝脏游离脂肪酸 (FFA)含量 ,检测肝脂变面积及肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA的表达情况。结果 :CCl4 损伤并高脂饮食可引起实验性大鼠肝脏明显脂肪变性 ,肝脏TG ,TC ,FFA及血清FFA含量升高 ,肝细胞PPARαmRNA表达减少。与模型组比较 ,壳聚糖复方制剂能明显降低肝脏TG ,TC ,FFA及血清FFA含量(P <0 .0 1) ,提高肝细胞PPARαmRNA的表达(P <0 .0 1)。结论 :壳聚糖复方制剂对实验性脂肪肝大鼠具有一定的治疗作用 ,其作用机制可能与其诱导PPARα表达 ,促进肝脏摄取、氧化脂肪酸有关。     

枸杞多糖免疫调节作用机制研究进展

枸杞子是传统的名贵补益中药,具有"滋阴补血、益精明目"之功效.枸杞多糖是其中的主要生物活性成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老等多种生物学作用.近年来,随着植物化学分离纯化技术的不断改进,枸杞多糖得到了进一步的分离和纯化,因此其免疫作用的分子机制如其作用的靶细胞、信号转导途径等研究取得了较明显进展.     

斑蝥素脂质体凝胶剂的研制与质量评价

目的 :研究斑蝥素脂质体凝胶的制备工艺 ,并初步评价其质量。方法 :用均匀设计法优选斑蝥素脂质体 (LC)的最佳处方及制备工艺 ,借助数字显微镜及病理图像分析系统 (MoticB5 professionalseries)观测其外观、大小及分布 ;用离心法结合GC法测定其包封率及渗漏率 ;并进一步将其制成凝胶剂 ,初步观察其稳定性 ,并以家兔为试验对象与对照品 (较膏剂 )比较其皮肤刺激性 ,用大鼠离体皮肤的扩散实验与对照品比较斑蝥素的透皮扩散情况。结果 :所得脂质体外观圆整 ,粒径分布均匀 ,平均包封率为 (79.7± 1 .2 ) %(n =5 ) ,稳定性良好 ;所得凝胶剂为半透明粘稠状胶体 ,与对照品相比皮肤刺激性显著减小 ,2 4h后皮肤内斑蝥素的滞留量显著增加 (为对照组的 2 .6倍 ) ,而透皮扩散的量极微。结论 :该脂质体凝胶制备工艺可行 ,质量稳定 ,检测方法可靠 ,高效、低毒 ,可望成为临床治疗斑秃的新制剂。     

复方联苯苄唑凝胶剂的研制与质量评价

目的:研制联苯苄唑和新霉素等药物凝胶剂的制备工艺与质量评价.方法:用卡波姆-940作基质,三乙醇胺为中和剂,加入联苯苄唑、新霉素等,制成凝胶剂;采用紫外双波长法测定联苯苄唑、新霉素的含量.结果:制备的凝胶剂细腻、光洁、稳定性好,释放药物快, 含量测定简单易行.结论:该凝胶剂配方合理,符合中国药典2000年版的规定.     

pH依赖型万氏牛黄清心缓释胶囊的制备与体外释放

分别以HPMC和pH依赖型丙烯酸树脂(Eudragit)的肠溶水分散体为包衣材料制备了3种微丸.结果表明,当Eudragit L30D-55包衣增重达30%,L100/S100混合物(1∶5)增重达40%,可达到较好的抗胃溶作用,并分别在预定的pH条件下溶解.3种微丸混合制得的万氏牛黄清心缓释胶囊,体外呈现出pH依赖型的梯度脉冲释药行为.     

帕珠沙星消旋体的合成及HPLC法拆分

以3-甲基-9,10-二氟-7-氧代-2,3-二氢-7H-吡啶并[1,2,3-de][1,4]苯并噁嗪-6-羧酸乙酯(3)为原料,经亲核取代、脱羧、环合、水解、Hofmann降解可制得帕珠沙星消旋体(1),总收率25.1%.并建立了HPLC法分离1的光学异构体.采用Zorbax C18柱,甲醇-手性溶液(8mmol/L L-苯丙氨酸和4mmol/L硫酸铜混合溶液,用NaOH溶液调至pH3.5)(15:85)为流动相,检测波长为324nm,光学异构体可被良好分离,检测限2ng.