联合检测自发凋亡率及p27kip1在膀胱移行细胞癌中的意义

目的探讨自发凋亡率、p27kip1在人膀胱移行细胞癌中表达的临床意义。方法采用TUNEL法检测自发凋亡细胞,用S’P法检测p27kip1基因在50例膀胱移行细胞癌中的表达,分析各检测指标在上述标本中的表达及与膀胱移行细胞癌分级、临床分期间的关系。结果在膀胱移行细胞癌中,自发凋亡率AI均数为(3.0±1.5)%,p27kip1基因的阳性表达率为58.0%(29/50)。其二者的阳性表达均随膀胱癌分级、分期的升高而降低。p27kip1蛋白阳性组中AI均数显著高于p27kip1蛋白阴性组(P<0.05)。结论p27kip1蛋白和自发凋亡率与肿瘤的恶性程度和进展密切相关,联合检测p27kip1和自发凋亡率有助于更准确地解释和描述膀胱癌的生物学行为。     

经尿道膀胱肿瘤切除专用手术刀具的临床应用

目的对经尿道膀胱肿瘤切除专用手术刀具治疗浅表性膀胱肿瘤进行临床应用评价。方法在传统电切刀的远端添加保护襻组成膀胱肿瘤切除专用手术刀具。使用该种手术刀具治疗浅表性膀胱肿瘤48例,使用方法与普通电切刀近似。男26例,女22例。年龄23~76岁,平均43岁。肿瘤分期Tis者1例,T0~T1者47例。肿瘤分级G1~G2者36例,G3~G4者12例。瘤体直径0.5~8.0 cm。肿瘤位于膀胱顶部4例,左侧壁11例,右侧壁9例,前壁4例,后壁13例,颈部7例。肿瘤单发31例,多发17例。术后常规卡介苗膀胱灌注1年,每3个月行膀胱镜检查1次。结果48例平均手术时间(23±10)m in。术中18例(37.5%)发生闭孔神经反射,未出现膀胱穿孔病例;无瘤体后部的正常膀胱黏膜误切。46例术后随访1年,14例复发,均为远位新生膀胱肿瘤,术后3个月时发现1例,4~6个月时3例,7~9个月时6例,10~12个月时4例。结论使用该专用手术刀具治疗浅表性膀胱肿瘤容易控制切除深度,可最大限度地避免膀胱穿孔,并可保护大体积肿瘤后部盲区的正常黏膜以免误切。     

莱菔硫烷对人膀胱癌细胞周期的影响及机制研究

背景与目的:探讨莱菔硫烷对人膀胱癌细胞(T24)细胞周期的影响及作用机制。材料与方法:采用噻唑蓝(MTT)法研究不同浓度的莱菔硫烷对T24细胞生长的抑制作用并测定其半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞仪检测莱菔硫烷对T24细胞周期的影响;采用westernblot研究莱菔硫烷对T24细胞中细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂P16和P27的表达情况。结果:在较低剂量范围内(≤40μmol/L),随着作用剂量的增加,莱菔硫烷对T24细胞的生长的抑制作用也明显增强。10、20、40μmol/L莱菔硫烷的抑制率分别为(12.5±3.95)%,(25.0±2.50)%、(50.0±5.33)%;在较高剂量(60μmol/L~160μmol/L)时,这种抑制作用不再呈剂量依赖性;莱菔硫烷作用72h后的IC50值为(51.12±7.10)μmol/L;莱菔硫烷能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期,20μmol/L莱菔硫烷作用48h后,在G0/G1峰之前出现凋亡峰;20μmol/L莱菔硫烷作用于T24细胞8、12、24h后能明显诱导P27蛋白的表达,作用早期(8h)时能诱导P16蛋白的表达。结论:莱菔硫烷能抑制T24细胞生长并使该细胞周期阻断在G0/G1期,其作用机制主要是通过诱导P27蛋白及早期诱导P16蛋白来实现的。     

磁共振成像在乳腺癌中的应用：究竟是进了一步还是退了两步？

目前，人们正对乳腺磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）的应用进行研究，表现在两个不同方面：一是将MRI列为乳腺癌高危妇女（例如BRCA1和BRCA2基因发生突变者）的筛查方法；二是对乳腺癌确诊或可疑患者行乳腺X线的同时辅以MRI以决定是否选用局部疗法。这两种用途的依据迥然不同。有预置性突变（predisposition mutations）的妇女乳腺癌发病年龄通常较低，此时由于乳腺组织较为致密，因而乳腺X线筛查的敏感性有所减低。     

大鼠骨髓间质干细胞体外分离培养及生物学特性研究

目的：建立大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)体外分离培养方法，并对大鼠MSCs的生物学特性进行研究。方法：分离5～8周龄的大鼠股骨骨髓进行体外培养，取5代以后的MSCs观察形态特征，绘制生长曲线，进行细胞化学染色，并用流式细胞仪检测其表面标志和进行细胞周期分析。结果：大鼠MSCs细胞形态呈长梭形或多边形，细胞生长曲线呈S形，群体倍增时间为30h，细胞化学染色显示碱性磷酸酶(ALP)、过氧化物酶(POX)、苏丹黑B(SB)阴性，而*醋酸萘酚醋酶(α-NAE)与糖原(PAS)阳性，流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD90表达阳性，而CD34、CD38、CD45表达阴性；细胞周期分析显示，G0／G1期：79．48％，G2／M期：6．10％，S期：14．42％。结论：本方法分离纯化出的是MSCs，其在体外具有生长稳定，增殖较快的特点，是组织工程研究中良好的细胞来源，也是转基因研究优良的载体细胞。     

胃癌个体危险度及人群筛检数量化评价的研究

目的：建立胃癌个体危险度判定及人群筛检的数量化模型。方法：在人群为基础的胃癌危险因素病例对照研究的基础上筛选出有统计学意义变化，应用概率论、模糊数学等原理和方法对胃癌危险因素和保护因素数量化，建立用于个体胃癌危险度测量和人群筛检的数量化评价方法（数学模型）。采用两种不同的加权系数计算方法，分别确定该数量化方法的判别阈值为0．20和0．17，对63例胃癌患者和693名正常人进行实际判别。结果：灵敏度和特异度均分别达到69％和63％左右，加权系数计算方法不同并不影响实际判别效果。结论：建立的胃癌个体危险度及人群筛检的数量化模型灵敏度和特异度尚理想；方法简便、易行、经济，有利于获得满意的受检率；可用于个体和群体（社区）的胃癌危险度测定。     

维生素E琥珀酸酯诱导人胃腺癌细胞凋亡途径

目的　探讨维生素E琥珀酸酯 (VES)诱导人胃腺癌SGC -790 1细胞凋亡的死亡受体 (Fas)信号转导途径。方法　人胃腺癌SGC -790 1细胞经不同剂量VES(5,10 ,2 0 μg/ml)处理 ,同时做琥珀酸、维生素E和空白对照 ,采用DAPI(4,6-贰脒基 -2 -苯基吲哚 )荧光染色法观察细胞凋亡情况 ,用WesternBlot法检测Fas、带有死亡结构域的Fas相关蛋白 (FADD)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 (caspase -8)蛋白表达情况 ,Fas和FADD反义寡聚核苷分别转染SGC -790 1细胞后 ,用荧光法检测caspase -8活性。 结果　经VES处理后的细胞DAPI染色可见凋亡的形态学改变 ,2 0 μg/mlVES处理 48h后的细胞凋亡率为 89.6% ;VES处理 48h后Fas、FADD和caspase -8蛋白表达明显增加 ,且呈剂量 -效应关系 ;阻断Fas可明显抑制FADD蛋白表达 ,Fas和FADD反义寡聚核苷转染细胞后caspase -8活性明显降低 (P <0 .0 1) ,其中阻断Fas的效果高于阻断FADD。结论　维生素E琥珀酸酯诱导人胃腺癌SGC -790 1细胞凋亡过程中启动了Fas信号转导途径 ,VES启动Fas后 ,FADD将Fas和caspase -8联接起来 ,活化caspases级联反应 ,从而构成Fas/FADD/caspase -8的凋亡信号途径     

海风藤酚、甲基海风藤酚、海风藤醇A和海风藤醇B对兔血小板聚集的影响

海风藤酚、甲基海风藤酚、海风藤醇Ａ和海风藤醇Ｂ均有抑制血小板激活因子（ＰＡＦ）诱导的兔血小板聚集作用，ＩＣ_（５０）分别为１７．９、９．２、１４２．０、１４．０μｍｏｌ·Ｌ~（－１）。经阿司匹林（ＡＳＡ）、磷酸肌酸／磷酸肌酸激酶（ＣＰ／ＣＰＫ）预处理的兔洗涤血小板，甲基海风藤酚和海风藤醇Ｂ仍能抑制ＰＡＦ诱导的兔血小板聚集，ＩＣ_（５０）为９．０、１６．５μｍｏｌ·Ｌ~（－１）。同时，４种成分对于二磷酸腺苷（ＡＤＰ），花生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集抑制作用较弱，海风藤Ｂ能使ＰＡＦ诱导血小板聚集量－效曲线平行右移，ＥＣ_（５０）由１．５９ｎｍｏｌ·Ｌ~（－１）升为２０．６ｎｍｏｌ·Ｌ~（－１）。结果表明：４种成分能选择性拮抗ＰＡＦ对兔血小板的聚集作用。     

葡萄糖酸铜的毒性评价

通过葡萄糖酸铜的食品安全性评价表明,葡萄糖酸铜是中等急性毒性(LD_(50)为41mg/kg)和弱蓄积毒性的化学物质。在小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸变分析中,葡萄糖酸铜均显示阴性结果,并且在Ames试验中对鼠伤寒沙门氏菌株也无基因突变作用。     

Retrospective case-analysis of the magnetic resonance imaging characteristics in the brain of patients with Wilson disease

BACKGROUND:Wilson disease (WD)damages liver,brain,kidney,cornea and nervous system severely.It is manifested in four ways:brain,liver,kidney and bone muscle.Whether or not magnetic resonance imagling (MRI)can clearly display the diseased region and range in brain of patient with WD,which provides imageological evidence for clinical practice,is unclear.OBJECTIVE:To observe the charactedstics of MRI of brain in patient with SD,and analyze the correlation of diseased region with clinical symptoms.DESIGN:Retrospective case-analysis.SETTING:Department of Radiology,Second Hospital Affiliated to the General Hospital of Chinese PLA.PARTICIPANTS:Thirty-one patients,including 18 males and 13 females,with WD admitted to the Department of Neurology,Second Hospital Affiliated to the General Hospital of Chinese PLA between January 1999and December 2005 were retrieved.The involved patients presented serum copper oxidase (sCP) activity decreasling and/or caruloplasmin Ievel decreasling and/or urinary copper content increasling;typical extrapyramidal symptoms and/or physical sign;abnormality showed by slit-lamp examination,Kayser-Fleischer rling positive.METHODS:①All the involved patients underwent MRI examination.A GE 1.5T imagling equipment was used.Spin-echo sequence was adopted to perform T2 and T1-weighed image at transverse axis level.Partial cases subjected to head scannling at coronal and/or sagittal level.Gd-DTPA With dosage of 0.1 mmol/kg was the strongest in 4 cases.②MRI characteristics of patients with dliferent clinical symptoms were observed.MAIN OUTCOME MEASURES:MRI detection results of patients with WD and MRI characteristics of patients with different clinical symptoms.RESULTS:Thirty-one patients with WD participated in the result analysis.①Imageological examination results:WD lnvolved many regions in the brain:dorsal caudate putamen(n=28),thalamencephalon(n=25),mesencaphalon(n=25),globus pallidus(n=23),pons(n=21),posterlor limb of intemal capsule(n=16),dentate nucleus(n=16),caudata nucleus(n=15)and cerebral cortex(n=11).MRI presented hypo-intensity signal on T2-weighted image and T1-weighted image or isointensity signal on T1-weighted image in 24 patients,characteristic hypo-intensity signal of globus pallidus in 4 patients,mixed signal of hyper-and hypo-intensity in 2 patients,hypo-intensity signal of globus pallidus,pars anterior pedunculi carebd and pontine tegmentum on T1-weighted image in 1 patient.Pathological changes distdbuted in symmetry and focus of infection mostly presented mottling,lamellar or strip.Different degrses of cerebral cortex atrophy,especially subtentodal cerebellar atrophy,ware found in 20 patients.Four patients subjected to enhancement scannling,but no clear imaqling was found.③MRI characteristics of patients with different symptoms:Abnormal signal of dorsal caudate putamen was found in 28 patients with dystonia,21 patients with dysarthda and 16 patients with bradykinesia;Abnormal signal of mesencaphalon was found in 22 patients with trepidation,among which,18 presented abnormal signal of pons;Abnormal signal of caudate nucleus and lenticular nucleus was found in 15 patients with dysphagia;Abnormal signal of dentate nucleus was found in 16 patients with carebellar ataxia;Different degrees of changes in cerebral atrophy were found in 14 patients with detedoratling memory and dementia.CONCLUSION:MRI can clearly display the characteristics of diseased regions in brain of patient with WD.Diseased regions reflected by MRI have obvious differences in patients with different clinical neurosigns.