急性B淋巴细胞白血病TGF-β信号转导通路基因表达差异的研究

本研究旨在探讨急性B淋巴细胞白血病（B—ALL）TGF—β信号转导通路基因表达谱。应用荧光实时定量RT-PCR和包含人TGF-β／BMP信号转导通路上113个基因的芯片分别检测经过FAB分型和免疫学分型的B—ALL患者白血病细胞、急性B淋巴细胞白血病细胞株NALM6细胞、Raji细胞的TGF—β，mRNA及TGF—β信号转导通路上各基因表达谱，以经流式细胞术分选的健康人的外周血B淋巴细胞为对照，比较两者差异。结果表明，同健康人外周血B淋巴细胞相比较，B—ALL细胞、NALM6细胞、Raji细胞TGF-β1表达水平下调，cyc和Smad-1基因表达上调，几击、Smad-7基因表达下调。结论：急性B淋巴细胞白血病存在TGF—β信号转导通路异常。     

急性B淋巴细胞白血病TGF-β信号转导通路基因表达差异的研究

本研究旨在探讨急性B淋巴细胞白血病（B—ALL）TGF—β信号转导通路基因表达谱。应用荧光实时定量RT-PCR和包含人TGF-β／BMP信号转导通路上113个基因的芯片分别检测经过FAB分型和免疫学分型的B—ALL患者白血病细胞、急性B淋巴细胞白血病细胞株NALM6细胞、Raji细胞的TGF—β，mRNA及TGF—β信号转导通路上各基因表达谱，以经流式细胞术分选的健康人的外周血B淋巴细胞为对照，比较两者差异。结果表明，同健康人外周血B淋巴细胞相比较，B—ALL细胞、NALM6细胞、Raji细胞TGF-β1表达水平下调，cyc和Smad-1基因表达上调，几击、Smad-7基因表达下调。结论：急性B淋巴细胞白血病存在TGF—β信号转导通路异常。     

直接接触骨髓基质HS-5细胞可降低HEL细胞对药物的敏感性

本研究探讨与骨髓基质HS-5细胞直接接触对HEL白血病细胞耐药性的诱发作用及其机制。采用人急性红白血病HEL细胞株与HS-5细胞共培养模式模拟体内白血病细胞及其周围的造血微环境,应用CCK-8法检测HEL细胞对Ara-C,DNR,VP16,MTX等化疗药物的敏感性,流式细胞术检测HEL细胞周期时相分布,实时RT-PCR方法检测p19、p21、p27、MDR1、ABCG2、Bcl-2等基因的mRNA表达,Western blot方法检测p-AktSer473、p-GSK3βSer9、p-STAT3Tyr705、Bcl-2、cleaved-Notch1V1754及Hes1等蛋白表达。结果表明,与HS-5细胞共培养后的HEL细胞对4种化疗药物的敏感性均显著降低。在共培养24 h时,HEL细胞阻滞于G0/G1期,G0/G1期的细胞比例明显增多。PCR结果显示,p21基因的转录水平随着共培养时间的延长逐渐上调;p19基因的mRNA水平在12 h时明显下调,随后又恢复;其它基因的改变均无统计学意义。Western blot结果表明,共培养后HEL细胞的p-AktSer473、p-GSK3βSer9、cleaved-Notch1V1754蛋白及Bcl-2蛋白表达上调,Hes1蛋白表达下调,p-STAT3Tyr705表达无明显变化。结论:直接接触骨髓基质HS-5细胞可增强HEL细胞对化疗药物的抵抗作用。     

全反式维甲酸和三氧化二砷诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化前后微小RNA表达变化

目的 研究急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化前后微小RNA(miRNA,miR)表达变化.方法 采用全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)诱导APL细胞系NB4 细胞分化,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志CD11b的表达,用实时定量RT-PCR检测miRNA表达谱miR-15b、miR-16、miR-34a、miR-107、miR-124a、miR-146、miR-155、miR-181a、miR-223、miR-342、let7c等miRNA的表达水平,用2-△△Ct法计算miRNA相对表达水平.收集15例APL初诊和15例APL缓解期患者骨髓单个核细胞(MNC),用RT-PCR检测MNC miRNA 的表达水平,用2-△Ct法计算miRNA表达水平.结果 ATRA作用NB4细胞96 h,miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平均显著上调,分别为对照组的3.40、4.22、5.41、20.03和5.29倍,As2O3作用NB4细胞96 h,miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平也显著上调,分别为对照组的3.62、2.49、2.58、4.27和1.94倍,除miR-15b外,ATRA处理组miR-16、miR-107、miR-223和miR-342表达水平上调程度均高于As2O3处理组,其中尤以miR-223为甚.ATRA和As2O3治疗后缓解期APL患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223和miR-342表达水平(2-△Ct值)分别为0.4137、0.6367、0.1260、0.0522、0.6611和0.0280,而APL初诊患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223、miR-342表达水平分别为0.0751、0.2022、0.0425、0.3064、0.1733和0.0090,APL缓解期miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223和miR-342表达水平高于APL初诊者(P值均<0.05),而APL缓解期miR-181a表达水平低于APL初诊者(P<0.05).结论 特定miRNA参与APL细胞分化过程.     

藻酸双酯钠与细胞因子对巨核细胞生成的调控作用

目的和方法,采用血浆凝块（ＰＣ）,无血清琼脂（ＳＦＡ）培养及（＾１２５Ｉ）－ｂＦＧＦ结合试验等方法研究了ＰＳＳ及ＴＳＰ等８种细胞因子对巨核细胞生成的作用与机制。结果：在ＰＣ系统,ＰＳＳ刺激ＣＦＵ－ＭＫ形成,在ＳＦＡ系统,ＰＳＳ无此作用,ＰＳＳ加强ｂＦＧＦ或再障血清对ＣＦＵ－ＭＫ形成的刺激作用,但ＰＳＳ不增加ｂＦＧＦ与其高亲和力受体的结合,ＴＳＰ及具有肝素结合位点（ＨＢＤ）的ＴＳＰ多肽片段明显抑制Ｃ     

九例成人T淋巴细胞白血病的临床与实验研究

目的探讨成人Ｔ淋巴细胞白血病（ＡＴＬ）的临床、细胞学、免疫学、细胞遗传学、血清学及分子生物学等特征。方法采用间接免疫荧光法及酶联免疫吸附法检测血清ＨＴＬＶⅠ抗体,建立ＰＣＲ和液相杂交法检测前病毒基因序列,结合ＭＩＣ特征确诊ＡＴＬ。结果和结论确诊９例ＡＴＬ,其临床特征主要为淋巴结肿大,皮损及溶骨改变少见,外周血及骨髓出现典型的花瓣状核淋巴细胞,胞体大,核畸形,免疫表型为ＣＤ－１、ＣＤ＋２、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ－８,还表达ＣＤ２５等激活标记,染色体核型及ＨＬＡ分型未发现有规律性的变化。８例ＡＴＬ中有７例血清ＨＴＬＶⅠ抗体阳性,应用ＰＣＲ及液相杂交法可检出整合到宿主细胞ＤＮＡ中的ＨＴＬＶⅠ病毒序列,表明在我国ＨＴＬＶⅠ也是ＡＴＬ的病因。９例中１例为淋巴瘤型,１例为慢性型,７例为急性型ＡＴＬ,治疗效果及预后均不良     

应用PCR技术检测急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ基因重排

目的寻找可作为急性淋巴细胞白血病恶性克隆的基因标记。方法应用ＰＣＲ技术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，选用四种限制性核酸内切酶消化扩增产物。结果初诊或复发１０例急性淋巴细胞白血病病人中，有５例出现清晰扩增带，约４００ｂｐ，扩增物经四种限制性核酸内切酶消化后形成的限制性核酸内切酶图谱各具特色；５例处于缓解期的急性淋巴细胞白血病病人，有４例被检出清晰扩增带。结论应用ＰＣＲ扩术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，能用于检测急性淋巴细胞白血病微小残留病，如果结合限制性核酸内切酶图谱分析，则能用于研究白血病细胞的克隆演化     

ITP患者血小板内β—TG含量与血小板聚集功能及出血程度的关系

应用放射免疫分析法测定４３例特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者血小板内β－ＴＧ含量，结给血小板聚集功能及ＰＡＩｇＧ测定，探讨这些指标与出血程度之间的关系。发现血小板聚集功能与血小板内β－ＴＧ含量之间存在相关，血小板内β－ＴＧ含量低者出血较明显；ＩＴＰ患者的血小板聚集功能减低并非因ＰＡＩｇＧ从空间上阻碍了致聚剂在血小板上的结合部位所致，而是与血小板贮存池缺陷有关。