人外周血淋巴细胞褪黑素受体的基因与蛋白表达的研究

目的:研究人外周血淋巴细胞褪黑素受体(MR)的基因与蛋白表达的特点。方法:分离健康成年人外周血淋巴细胞,采用异硫氢酸胍-苯酚-氯仿一步法抽提总RNA,分别采用Northern印迹和RT-PCR方法检测MR亚型mt₁和MT₂的mRNA,并将RT-PCR的阳性产物通过自动测序仪测序;同时应用免疫组化染色方法检测mt₁和MT₂受体亚型蛋白在淋巴细胞内的分布特点。结果:Northern印迹方法检测出长约1.1 kb mt₁ mRNA,但未检出长约1.1 kb MT₂ 的mRNA;RT-PCR方法则得到了368 bp mt₁ cDNA片段,无321 bp MT₂ cDNA片段,同时将mt₁阳性条带通过胶回收、测序,结果显示扩增产物与人mt₁受体亚型的基因序列相吻合;免疫组化结果显示:人外周血淋巴细胞存在mt₁受体蛋白,主要分布于细胞膜和细胞浆,呈棕褐色阳性颗粒,而细胞核上未见阳性颗粒,MT₂受体蛋白则未检出。结论:证实正常人外周血淋巴细胞存在mt₁的基因与蛋白的表达,而无MT₂的基因与蛋白的表达,提示外周血淋巴细胞为褪黑素(Mel)作用的外周靶器官,为研究生理及病理情况下Mel对免疫系统的调节奠定了基础。     

内皮祖细胞在血管组织工程的应用

内皮祖细胞是一群具有游走特性,能进一步增殖分化成为成熟内皮细胞的幼稚内皮细胞.内皮祖细胞参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复.内皮祖细胞的发现为血管组织工程种子细胞增添了一个新来源.本文重点介绍成体内皮祖细胞的来源、鉴定、生物学特性、功能以及在血管组织工程中的应用.     

3D打印体外建模辅助微创治疗复杂骨盆骨折

目的探讨3D打印体外建模辅助微创治疗复杂骨盆骨折的临床疗效。方法选择2016年4月至2017年6月采用3D打印体外建模辅助治疗的18例复杂骨盆骨折病例,记录手术时间及术中出血量,术后通过X射线片、CT及Matta评分标准评估骨折复位情况,通过Majeed功能评分评估功能恢复情况。结果手术时间80～160 min,平均(120±23.1) min;术中出血量75～160 m L,平均(113.6±29.1) m L;切口长度7～14 cm,平均(9.3±1.8) cm。18例患者均获随访12～24个月,平均15.8个月。根据Matta评分标准,骨折复位:优12例,良4例,可2例,优良率88.9%。术后6个月使用Majeed评分标准评定功能恢复情况,结果显示:优13例,良4例,可1例,优良率94.4%。所有患者随访期间无内固定松动、断裂等并发症发生。结论采用3D打印体外建模辅助治疗复杂骨盆骨折可使手术操作更加精准及微创,减少并发症的发生,有利于患者术后康复。     

人胚胎中枢神经系统褪黑素受体的鉴定及生物学特性

目的：证实人胚胎脑及脊髓组织是否存在褪黑素（Mel)受体（MR）,阐明Mel生物学行性及对神经系统作用的机制。方法：应用放射配体结合法检测人胚胎脑及脊髓组织^125I-Mel特异结合情况。结果：视网膜^125I-Mil特异结合量最高,视交叉及嗅球次之,其次为下丘脑、海马、脑干;动力学分析表明Mel与其受体的结合为可逆性结合;特异性结合分析提示对Mel呈高度特异性;10和50umol/LGTPγS使^125I-Mel特异结合降低。结论：人胚胎脑和脊髓组织均存在^125I-Mel特异结合位点,GTPγS对^125I-Mel特异结合及亲和力均有一定的影响。支持MR与抑制性G蛋白偶联的观点。     

人胚胎肾上腺皮质褪黑素受体亚型蛋白的分布

目的：研究褪黑素（Mel)受体亚型在人胚胎肾上腺皮质的分布。方法：应用免疫组化染色检测Ｍel受体亚型的人胚胎肾上腺皮质的分布。结果：在人胚胎肾上腺皮质的球状速、束状带和网状带均存在Ｍel受体mt1(Mella)和ＭＴ２（Ｍellb)亚型蛋白的表达,且主要分布于细胞质。结论：人胚胎肾上腺皮质存在Ｍel受体mt1和ＭＴ２亚型。     

肝内胆管空肠吻合术临床应用

目的 用肝肠“挂靠式”胆肠吻合来有效地加强吻合后的可靠性,避免术后胆瘘、肠瘘等并发症发生。方法 对１４例肝内胆管空肠吻合术施行了肝肠“挂靠式”缝合,其中肝门部胆管癌７例,肝内胆管结石并胆管狭窄４例,肝门部胆管损伤３例。结果 本组均收到了满意治疗效果,术后无１例发生胆瘘、肠瘘等并发症。结论 肝肠“挂靠式”胆肠吻合术克服了由于肝组织脆弱,缺乏韧性、难以牢固缝合的缺点,提高手术成功率。     

御风胶囊对脑缺血-再灌注损伤大鼠的预防性神经保护作用

目的 探讨御风胶囊对脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法 实验分为模型组、假手术组、御风胶囊高、低剂量组和阳性药对照组。线栓法制备大鼠脑缺血-再灌注模型，分别观察脑缺血2h再灌注1h及24h神经细胞凋亡、凋亡相关基因p53、bcl-2、C-fos表达及脑组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性变化。结果 御风胶囊能显著抑制脑缺血-再灌注所致的神经细胞凋亡、抑制脑缺血-再灌注后p53的表达并诱导bcl-2表达，与模型组比较差异显著(P＜0．05)，显著抑制脑缺血-再灌注后MDA的产生，提高SOD活性(P＜0．05)；并对CAT活性呈现一定的保护作用。结论 御风胶囊对缺血-再灌注脑组织具有一定的神经保护作用，其机制与其抑制脑缺血-再灌注后神经细胞周亡，调节凋亡相关基因表达及抗脂质过氧化有关。     

雌二醇对大鼠肝缺血再灌注损伤NOS表达的影响

目的 探讨雌激素对大鼠肝缺血再灌注损伤（HIRI）中诱生型一氧化氮合酶（iNIS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响及其作用机制。方法将48只Wistar大鼠分为4组：A组，雄性组；B组，卵巢去势组（OVX组）；C组，雌性对照组（假手术组）；D组，给予17β-雌二醇的卵巢去势组（OVX＋E2组）。建立原位大鼠HIRI模型，观察大鼠肝缺血再灌注40min后6，12，24h大鼠的血清雌二醇（E2）水平变化，同时采集肝组织标本，利用免疫组化方法观察肝细胞胞质一氧化氮合酶（NOS）表达情况。结果 ①各时点A组与B组赐水平较低，两组间比较无统计学差异（P〉0．05）。C组赐水平增高，D组B水平最高。A组与B组组间比较无差异，其余各组间比较均有显著差异（P〈0．05）。②再灌注6h各组肝细胞、枯否细胞均少许表达iNOS，肝窦内皮细胞均表达eNOS，再灌注12—24hiNOS表达明显升高。eNOS表达明显降低；各时点NOS表达A组与B组比较、C组与D组比较无统计学差异（P〉0．05），其余各组间比较均有显著差异（P〈0．05）。结论 大鼠HIRI后雌激素促进eNOS表达，抑制iNOS表达，可能是其减轻HIRI作用的机制之一。     

5b对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7ADR的耐药逆转作用

目的研究板蓝根活性单体-5b逆转乳腺癌耐药株MCF-7/ADR细胞的作用及逆转机理。方法选取人乳腺癌MCF-7细胞及耐药株MCF-7/ADR细胞作为主要研究细胞,在2种细胞中加入活性单体-5b,采用MTT法观察活性单体-5b对多药耐药(MDR)逆转作用;采用FCM法观察阿霉素对2种细胞的抑制浓度及倍数。结果当活性单体-5b的剂量低于150μmol/L时,其对2种细胞无毒性作用;活性单体-5b能提高MCF-7/ADR细胞的凋亡率;活性单体-5b能增加阿霉素在体内的积累。结论活性单体-5b对MCF-7/ADR细胞的MDR具有一定的逆转作用,是一种有效的乳腺癌化疗增敏剂。     

胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段肾皮质血管内皮功能的改变

目的通过检测肾皮质内皮素1（ET-1）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达，研究胰岛素抵抗（IR）大鼠血糖正常阶段肾皮质血管内皮功能的改变。方法以免疫组织化学、RT-PCR方法检测IR大鼠模型肾皮质ET-1、eNOS蛋白和mRNA表达的改变。结果与正常大鼠相比，IR大鼠SBP、TG、FFA、Ins水平升高（P均〈0．01），胰岛素敏感指数、HDL-C降低（P均〈0．01）。FBG、2hBG在正常范围。HE染色IR组大鼠肾皮质出现组织学的异常改变，肾皮质ET-1蛋白及mRNA表达升高，eNOS蛋白和mRNA表达减低。结论IR大鼠模型在血糖正常阶段已存在肾皮质ET-1与eNOS平衡的异常，表明在IR早期已存在肾血管内皮功能的损害。