雌激素对老年大鼠脂肪干细胞体外诱导成骨能力的影响

目的：通过观察雌激素对老年大鼠脂肪干细胞（ADSCs）体外增殖和成骨分化能力的影响,进一步明确雌激素水平和增龄变化与骨代谢相关性。方法：选取18月龄雌性SD大鼠ADSCs,雌激素刺激浓度为10-7mol/L,采用MTT法,茜素红染色及生化检测雌激素对ADSCs体外增殖与成骨分化能力的影响。结果：成骨诱导21d镜下观测含雌激素组茜素红染色阳性面积大于常规诱导组,非诱导组染色阴性。RT-PCR半定量检测显示含雌激素组较常规诱导组OCN表达强烈。结论：雌激素能增强老年大鼠ADSCs体外增殖与诱导成骨分化能力。     

口疡防愈凝胶对大鼠放射性口腔炎的保护作用及机制研究

目的观察口疡防愈凝胶(Kouyang Fangyu gel,KFG)对放射性口腔炎的保护作用,并探讨其机制。方法将50只SD大鼠随机分为空白对照组、轻度模型组、重度模型组、轻度模型+KFG治疗组、重度模型+KFG治疗组,每组10只。采用单次照射15 Gy和25 Gy X射线的方法分别建立轻度和重度口腔炎模型,并分别给予KFG药物治疗,连续7 d。于给药前及给药第3、5、7天时分别进行口腔黏膜炎症评分,采用HE染色法观察口腔黏膜病理变化,ELISA法检测血清促炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及抗炎性因子IL-10的水平,免疫组化法检测黏膜TLR4、NF-κB表达。结果轻度模型组口腔炎症自愈性明显,KFG不能明显缩短其愈合时间;重度模型组口腔溃疡面积及程度虽随着时间推移有减轻趋势,但在经KFG治疗后其评分快速下降,愈合明显加快;KFG能够改善重度口腔炎模型大鼠口腔黏膜病理形态,降低血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量(P<0.05或P<0.01),升高IL-10水平(P<0.05),并抑制黏膜TLR4和NF-κB蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论KFG对于重度放射性口腔炎有明显的治疗作用,其机制可能与抑制口腔黏膜TLR4/NF-κB信号通路,进而调节炎症因子水平有关。     

Intervention Timing and Effect of PJ34 on Astrocytes During Oxygen-glucose Deprivation/reperfusion and Cell Death Pathways

Poly(ADP-ribose) polymerase-1(PARP-1) plays as a double edged sword in cerebral ischemia-reperfusion, hinging on its effect on the intracellular energy storage and injury severity, and the prognosis has relationship with intervention timing. During ischemia injury, apoptosis and oncosis are the two main cell death pathway sin the ischemic core. The participation of astrocytes in ischemia-reperfusion induced cell death has triggered more and more attention. Here, we examined the protective effects and intervention timing of the PARP-1 inhibitor PJ34, by using a mixed oxygen-glucose deprivation/reperfusion(OGDR) model of primary rat astrocytes in vitro, which could mimic the ischemia-reperfusion damage in the “ischemic core”. Meanwhile, cell death pathways of various PJ34 treated astrocytes were also investigated. Our results showed that PJ34 incubation(10 μmol/L) did not affect release of lactate dehydrogenase(LDH) from astrocytes and cell viability or survival 1 h after OGDR. Interestingly, after 3 or 5 h OGDR, PJ34 significantly reduced LDH release and percentage of PI-positive cells and increased cell viability, and simultaneously increased the caspase-dependent apoptotic rate. The intervention timing study demonstrated that an earlier and longer PJ34 intervention during reperfusion was associated with more apparent protective effects. In conclusion, earlier and longer PJ34 intervention provides remarkable protective effects for astrocytes in the “ischaemic core” mainly by reducing oncosis of the astrocytes, especially following serious OGDR damage.     

麦门冬汤主治病证探讨

历代医家及现代教材多认为《金匮要略》麦门冬汤是治疗虚热肺痿,作者认为该方原治上气,即哮喘,可移用于虚热肺痿。其病位在于肺而关于胃,病性乃气阴两虚,痰火搏结。临床上只要谨守肺胃气阴两虚,痰火搏结的病机特征,可将该方灵活应用于呼吸系统疾病、五官科疾病、消化系统疾病等多个方面。     

运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分作用研究

目的:明确开心散提取物经大鼠灌胃后有效抗抑郁成分的吸收情况。方法:用水蒸气蒸馏法回收石菖蒲挥发油部分,用50%乙醇提取开心散复方有效成分,按原方比例予Wistar大鼠灌胃,分离含药血清和脑组织。含药血清经HPLC检测,定性分析有效抗抑郁成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6’-二芥子酰基蔗糖;脑组织匀浆离心后分离上清液,经萃取后,GC-MS定性分析复方中石菖蒲挥发油有效抗抑郁成分α-细辛醚和β-细辛醚入脑情况。结果:HPLC得到人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6’-二芥子酰基蔗糖;GC-MS得到α-细辛醚和β-细辛醚。结论:开心散的5种有效抗抑郁成分均能被大鼠吸收,进一步明确了开心散抗抑郁疗效的物质基础。     

川芎、瓜蒌仁、桑叶提取物对肝微粒体脂质过氧化模型的影响

目的:观察川芎、瓜蒌仁、桑叶的抗氧化作用,分析其剂量效应关系。方法:实验于2005-05/06在解放军第四军医大学毒理学教研室完成。①选用二级雄性成年SD大鼠50只。动物禁食24h,处死后取出肝脏,制成匀浆。采用钙盐沉淀法制备鼠肝微粒体。②过氧基异丙苯激发的肝微粒体脂质过氧化模型:反应体系中的缓冲液为Tris/HCl(0.1mol/L,pH=7.4)与0.15mol/LKCl按1∶2的体积比配制。将制备的微粒体按照1mL/g肝湿重的比例用预冷的0.15mol/LKCl缓冲液悬浮。在模型反应体系中含缓冲液1.00mL,1mmol/L过氧基异丙苯0.15mL,微粒体悬液0.1mL和中药提取物0.15mL(川芎、瓜蒌仁、桑叶购于西安万寿路中药材市场。采用煎煮法制备3种中药水提物。粗粉加入8倍质量的水煎煮1.5h后,过滤,沉淀物再经5倍质量水煎煮1h,得水提液。得到的水提液趁热过滤,过滤液继续加热,蒸发掉水分,得到的水提膏经80℃烘干,备用,检测水分<5%。干燥器内保存)。37℃水浴15min,终止反应后离心,取上清,用硫代巴比妥酸法显色并测出吸光度,同时用不同浓度的丙二醛标准品作标准曲线,拟合标准直线方程,由此计算各组的丙二醛浓度。③维生素C/Fe2 激发的肝微粒体脂质过氧化模型:将上述的反应体系改为缓冲液0.8mL,50μmol/LFeSO40.15mL及5mmol/L维生素C0.15mL、微粒体悬液0.1mL和中药提取物0.2mL。④四氯化碳/辅酶Ⅱ激发的肝微粒体脂质过氧化模型:将上述的反应体系改为含贮备液(由0.15mol/LKCl45mL,0.10mol/LTris/HCl(pH7.4)30mL,H2O4.5mL,G-6-P127mg,5g/LG-6-PDeh30μL,辅酶Ⅱ15mg,乙酰胺500mg混合配制)2.20mL,四氯化碳/二甲基亚砜(按体积比1∶4配制)0.50mL,微粒体悬液0.30mL,中药提取物0.50mL。⑤每个模型每种药物设1个阳性对照组(n=3,只造模,未加入中药),5个质量浓度(50,25,12.5,6.25,3.125g/L),每个质量浓度设3个平行样,一个阴性对照管。以每个平行样与相应的阴性对照管吸光度(A值)之差作为该药物浓度下的A值的绝对值。根据A值求得不同剂量药物干预下丙二醛浓度和各药物在各质量浓度下对丙二醛生成量的抑制率。⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果:①过氧基异丙苯激发的脂质过氧化模型中,川芎和瓜蒌仁作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制(P<0.01),而桑叶作用下生成量只在药物高质量浓度(50,25g/L)下受到抑制。抑制率均随药物质量浓度的降低而降低(除了川芎的最低质量浓度)。②维生素C/Fe2 激发的脂质过氧化模型中,川芎、瓜蒌仁、桑叶作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制(P<0.01),抑制率与药物质量浓度关系不明显,且药物在该模型中的抑制率远较同种药物在另外模型中的抑制率高。瓜蒌仁作用下随着药物质量浓度降低,抑制率呈先升后降的趋势,在质量浓度为12.5g/L时抑制率最大。桑叶作用下抑制率不随药物浓度增减而发生显著变化,均维持在较高水平(0.9324±0.014)。③四氯化碳/辅酶Ⅱ激发的脂质过氧化模型中,川芎、瓜蒌仁、桑叶作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制(P<0.01)。川芎和瓜蒌仁作用下随着药物质量浓度的降低,抑制率也显著下降。桑叶各质量浓度下均有较高的抑制率,并且除最高质量浓度外,呈线性相关。结论:川芎、瓜蒌仁、桑叶在实验浓度下大多具有较好的抗氧化作用,仅桑叶在对过氧基异丙苯模型的作用稍弱。其中川芎、瓜蒌仁和桑叶在过氧基异丙苯模型和四氯化碳/辅酶Ⅱ模型中丙二醛生成量均与药物浓度有显著的量效关系,桑叶在较低浓度下又可激发活性氧的生成。在维生素C/Fe2 模型中,3种药物的量效关系不明显。3种药物在3.125～50g/L质量浓度内,对维生素C/Fe2 模型的抗氧化作用强于对另外2个模型。     

当归四逆汤成分组合预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡的影响

目的 观察当归四逆汤成分组合对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌微血管内皮细胞(MMVEC)凋亡的影响.方法 将32只大鼠分为sham组,I/R组,PPC组,PPC+L组,建立大鼠MIRI模型,电镜观察大鼠MMVEC凋亡及血清NO.结果 与sham组比较,I/R组MMVEC凋亡率明显升高(P＜0.05)；与I/R组比较,PPC组MMVEC凋亡率明显下降(P＜0.05)；与PPC组比较,PPC +L组MMVEC凋亡率有所升高(P＜0.05),凋亡率与该组大鼠血清NO含量成反比.结论 当归四逆汤成分组合可有效抑制大鼠MMVEC凋亡,其机制与调节NO的生成有关.     

在3D打印技术辅助下应用神经内镜治疗脑室出血

目的：探究3D打印技术辅助下应用神经内镜治疗脑室出血的临床效果。方法：纳入2020年1月～2022年1月本院收治的脑室出血病例共计60例为观察对象，分组依据随机数字表法，观察组（3D打印技术辅助下神经内镜治疗）与对照组（传统手术治疗）各30例。记录两组手术指标，评估治疗前后格拉斯哥预后评分（GOS）、日常生活能力（ADL）评分，随访术后并发症发生率。结果：观察组手术时间、血肿廓清时间、引流管拔除时间均短于对照组，术中出血量少于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组患者治疗后GOS评分、ADL评分观察组高于对照组，P<0.05，差异显著；并发症总例数比较观察组更少，组间差异显著，P<0.05。结论：脑室出血患者行3D打印技术辅助下的神经内镜治疗，在减轻手术创伤、提升血肿清除效果方面效果突出，可增强患者预后，减少并发症的发生。