左金丸传统汤剂与超微剂对大鼠慢性胃炎的药效学研究

目的:探讨不同剂量的超微左金丸与传统左金丸对大鼠慢性胃炎的药效作用。方法:采用水杨酸钠结合饥饱失常等方法制成大鼠慢性胃炎模型,将造模成功的60只大鼠随机分为6组,即传统高、低剂量组(0.216g/mL、0.108g/m L),超微高、低剂量组(0.108g/mL、0.054g/mL),对照药组(0.00036g/mL奥美拉唑),模型组,并设空白组,每组10只。连续灌胃给药2周,每次每只2mL,每天1次,模型组继续给予水杨酸钠造模,空白组给予同等剂量的0.9%氯化钠注射液。用药后对大鼠胃酸、胃蛋白酶活性、血清SOD活力、MDA值以及病理切片进行比较分析。结果:与空白组比较,模型组胃液p H值和胃蛋白酶活性升高、血清SOD活力降低、MDA含量升高,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,超微和传统左金丸均可降低胃液p H值和胃蛋白酶活性、升高血清SOD活力、降低MDA含量,差异有统计学意义(P0.05),同时从病理切片结果显示其对胃黏膜有修复作用。结论:超微左金丸和传统左金丸对大鼠慢性胃炎有很好的效果,超微左金丸用量少、疗效优、使用方便,值得推广应用。     

血管内皮祖细胞对骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞脂肪化的影响

 目的 探讨血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)对骨质疏松(OP)大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)自主脂肪化的影响。方法 选6周龄雌性 SD 大鼠,建立OP模型。体外分离、培养大鼠EPC、BMSC。分别取第3、6代BMSC及原代EPC,建立EPC/BMSC 间接共培养体系。实验分组:假手术组BMSC(BMSC sham)、OP组BMSC(BMSC ovx)、OP BMSC /EPC共培养组(BMSC ovx/EPC);MTT法检测细胞增殖情况;油红 O染色检测成脂分化情况,real- time PCR检测成脂分化标志物PPARγ2的mRNA表达水平。结果 BMSC ovx/EPC 组BMSC的增殖能力显著高于BMSC ovx组;BMSC ovx/EPC组自主脂肪细胞分化水平明显低于BMSC ovx组。结论 EPC可通过间接接触提高骨质疏松大鼠BMSC的增殖能力,并能有效抑制OP大鼠BMSC的自主脂肪化。     

当归四逆汤有效成分组合对大鼠缺血再灌注模型中iNOSeNOS表达相关性的实验研究

目的 研究当归四逆汤有效成分单体组合对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制.方法 SD大鼠体质量为250～300 g,分为正常组,缺血再灌注(IR,Ischemia-Reperfusion)组,缺血再灌注加药物(IR+药)组,缺血再灌注加药物加阻断剂(IR+药+L-NAME)组,实时荧光定量PCR方法分析各组心肌组织iNOSmRNA,eNOS mRNA表达的变化,各组大鼠血清中CK-MB、NO的水平变化.结果 药物组NO水平增高(P＜0.01),CK-MB量下降(P＜0.05),eNOS表达量升高(P＜0.001),iNOS表达量下降(P＜0.01).结论 当归四逆汤有效成分组合缺血预处理对心肌起到了保护作用,其机制与上调eNOS,下调iNOS表达,从而调节NO产生有关.     

雌激素受体相关受体α与骨代谢

雌激素受体相关受体α(estrogen receptor-related receptorα,ERRα)是最早发现的一种孤儿核受体,是核受体超家族中一员。它与雌激素受体(estrogen receptors,ERs)有着一定的同源性,但尚未发现任何配体。目前研究证明ERRα在骨代谢、能量代谢的调节以及乳腺癌发生中都起到重要作用。本文主要综述ERRα在骨代谢方面的研究进展,特别是在骨组织中对受体介导的雌激素信号途径的参与,以求进一步了解雌激素调控骨改建的机制,以及展望ERRα作为靶点治疗雌激素相关的骨代谢病的前景。     

开心散对大鼠抑郁症模型内源性褪黑素生物合成的调控研究

目的:探寻开心散对大鼠抑郁症模型血浆褪黑素(melatonin,MT)浓度及松果腺MT生物合成限速酶的影响。方法:采用慢性不可预见的中等强度应激21 d建立大鼠抑郁模型,动物分为正常对照组、模型组、开心散低、中、高剂量组(KXS,65,130,260 mg.kg-1.d-1)、曲唑酮组(10 mg.kg-1.d-1),用药各组于每日造模后30 min ig给药。造模第22天2:00采取尾静脉血和迅速断头取脑组织,分别采用液相芯片法检测血浆MT浓度,实时荧光定量PCR检测松果腺AANAT,HIOMT mRNA表达水平,同位素标记酶活性法检测二者的活性。结果:模型组大鼠血浆MT、松果腺AANAT和HIOMT mRNA水平、AANAT活性均低于对照组(P<0.05),而HIOMT活性未见降低。与模型组比较,开心散各剂量组均可提高大鼠血浆MT浓度(P<0.05),而以中剂量组最高;且中剂量组大鼠AANAT,HIOMT mRNA水平、AANAT活性均明显升高(P<0.05),但HIOMT活性未见增高。结论:开心散可提高大鼠抑郁症模型松果腺AANAT的活性,调控MT的生物合成。     

百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠行为活动及海马突触素表达的影响

目的：探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠行为活动、学习记忆及海马CA3 区突触素玉（SYNⅠ）和突触囊泡素（SYNA）表达的影响。方法：SD 大鼠随机分为6 组,即空白对照组、抑郁模型组、氟西汀组、百事乐胶囊（2.88 g·kg-1、1.44 g·kg-1、0.72 g·kg-1）组,采用慢性温和不可预见性应激加孤养的方式建立抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1 次,连续给药21 天,对照组、模型组等量蒸馏水灌胃,观察大鼠Open-field、1%蔗糖偏食度、水迷宫及体质量变化率的影响,免疫组化和原位杂交观察各组大鼠SYNⅠ和SYNA 的表达变化。结果：行为学表明,百事乐高剂量治疗2 周后可显著提升模型大鼠水平及垂直活动次数（P<0.01）,百事乐中剂量治疗3 周后可明显提升模型大鼠水平活动次数（P<0.05）。高剂量治疗第1周后、中剂量治疗3 周后可明显提高模型大鼠的蔗糖偏食度（P<0.01 或P<0.05）。高剂量治疗2 周、中剂量治疗3 周可明显提高模型大鼠的体质量变化率（P<0.01 或P<0.05）。百事乐高、中剂量可以缩短模型大鼠的寻找并爬上平台的持续时间（EL）,并能明显升高模型大鼠穿越目标象限的次数;同时高剂量可明显缩短目标象限潜伏时间（P<0.05）。免疫组化和原位杂交结果显示,与模型组比较,百事乐高剂量能明显促进模型大鼠海马CA3 区SYNⅠ和SYNA 的表达,中剂量可明显提升SYNA 的表达（P<0.05 或P<0.01）。结论：百事乐胶囊能改善抑郁模型大鼠的抑郁行为及海马CA3 区SYNⅠ和SYNA 的表达。     

川芎、瓜蒌仁、桑叶提取物对肝微粒体脂质过氧化模型的影响

目的：观察川芎、瓜蒌仁、桑叶的抗氧化作用，分析其剂量效应关系。 方法：实验于2005—05／06在解放军第四军医大学毒理学教研室完成。①选用二级雄性成年SD大鼠50只。动物禁食24h，处死后取出肝脏，制成匀浆。采用钙盐沉淀法制备鼠肝微粒体。②过氧基异丙苯激发的肝微粒体脂质过氧化模型：反应体系中的缓冲液为Tris／HCl（0．1mol／L,pH=7．4）与0．15mol／L KCl按1：2的体积比配制。将制备的微粒体按照lmL／g肝湿重的比例用预冷的0．15mol／L KCl缓冲液悬浮。在模型反应体系中含缓冲液1．00mL，1mmol／L过氧基异丙苯0．15mL，微粒体悬液0．1mL和中药提取物0．15mL（川芎、瓜蒌仁、桑叶购于西安万寿路中药材市场。采用煎煮法制备3种中药水提物。粗粉加入8倍质量的水煎煮1．5h后，过滤，沉淀物再经5倍质量水煎煮1h，得水提液。得到的水提液趁热过滤，过滤液继续加热，蒸发掉水分，得到的水提膏经80℃烘干，备用，检测水分〈5％。干燥器内保存）。37℃水浴15min，终止反应后离心，取上清，用硫代巴比妥酸法显色并测出吸光度，同时用不同浓度的丙二醛标准品作标准曲线，拟合标准直线方程，由此计算各组的丙二醛浓度。③维生素C／Fe^2＋激发的肝微粒体脂质过氧化模型：将上述的反应体系改为缓冲液0．8mL，50μmol／LFeSO4 0．15mL及5mmol／L维生素C0．15mL、微粒体悬液0．1mL和中药提取物0．2mL。④四氯化碳／辅酶Ⅱ激发的肝微粒体脂质过氧化模型：将上述的反应体系改为含贮备液（由0．15mol／LKCl 45mL，0．10mol／L Tris／HCl（pH7．4）30mL，H204．5mL，G-6-P127mg，5g／LG-6-P Deh30μL，辅酶Ⅱ15mg，乙酰胺500mg混合配制）2．20mL，四氯化碳／二甲基亚砜（按体积比l：4配制）0．50mL，微粒体悬液0．30mL，中药提取物0．50mL。⑤每个模型每种药物设1个阳性对照组（n=3，只造模，未加入中药），5个质量浓度（50，25，12．5，6．25，3．125g／L），每个质量浓度设3个平行样，一个阴性对照管。以每个平行样与相应的阴性对照管吸光度（A值）之差作为该药物浓度下的A值的绝对值。根据A值求得不同剂量药物干预下丙二醛浓度和各药物在各质量浓度下对丙二醛生成量的抑制率。⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析。 结果：①过氧基异丙苯激发的脂质过氧化模型中，川芎和瓜蒌仁作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制（P〈0．01），而桑叶作用下生成量只在药物高质量浓度（50，25g／L）下受到抑制。抑制率均随药物质量浓度的降低而降低（除了川芎的最低质量浓度）。②维生素C／Fe^2＋激发的脂质过氧化模型中，川芎、瓜蒌仁、桑叶作用下．丙二醛生成量得到了明显的抑制（P〈0．01），抑制率与药物质量浓度关系不明显，且药物在该模型中的抑制率远较同种药物在另外模型中的抑制率高。瓜蒌仁作用下随着药物质量浓度降低，抑制率呈先升后降的趋势，在质量浓度为12．5g/L时抑制率最大。桑叶作用下抑制率不随药物浓度增减而发生显著变化，均维持在较高水平（0．9324&;#177;0．014）。③四氯化碳／辅酶Ⅱ激发的脂质过氧化模型中，川芎、瓜蒌仁、桑叶作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制（P〈0．01）。川芎和瓜蒌仁作用下随着药物质量浓度的降低，抑制率也显著下降。桑叶各质量浓度下均有较高的抑制率，并且除最高质量浓度外，呈线性相关。 结论：川芎、瓜蒌仁、桑叶在实验浓度下大多具有较好的抗氧化作用，仅桑叶在对过氧基异丙苯模型的作用稍弱。其中川芎、瓜蒌仁和桑叶在过氧基异丙苯模型和四氯化碳／辅酶Ⅱ模型中丙二醛生成量均与药物浓度有显著的量效关系，桑叶在较低浓度下又可激发活性氧的生成。在维生素C／Fe^2＋模型中，3种药物的量效关系不明显。3种药物在3．125-50g／L质量浓度内，对维生素C／Fe^2＋模型的抗氧化作用强于对另外2个模型。     

TNF-α对人脱落乳牙牙髓干细胞促破骨细胞形成能力的影响

目的: 探讨肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor -α,TNF-α）对人脱落乳牙牙髓干细胞（stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED）促破骨细胞形成能力的影响。方法: 通过酶消化法体外分离、培养处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞;建立SHED与破骨前体细胞外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）的间接共培养模型,在破骨诱导培养液中加入0、5、10、50、100 ng/mL不同浓度的TNF-α,通过实时定量RT-PCR和Western 免疫印迹检测破骨相关基因及核转录因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）信号通路相关基因的表达。采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 在10 ng/mL的TNF-α刺激下,PBMCs中破骨相关蛋白CTSK和 TRAP 的表达水平均显著增高。Western免疫印迹和实时定量RT-PCR检测结果显示,SHED胞质内 p-IκBα 和胞核内 p65 蛋白、基因的表达水平在10 ng/mL的TNF-α刺激下显著高于无TNF-α刺激组。结论: 炎症细胞因子TNF-α通过NF-κB信号通路对SHED促破骨细胞形成能力具有调控作用。     

褪黑素对乙醇致小鼠慢性肝损伤的保护作用

目的:探讨褪黑素(MT)对实验性慢性乙醇肝损伤小鼠脂质过氧化、肝功能和肝脏病理组织的影响.方法:将48只小鼠随机分为4组:对照组(A组),模型组(B组),造模 高浓度MT给药组(C组),造模 低浓度MT给药组(D组).用60 mL/L乙醇制成小鼠慢性肝损伤模型,测定肝组织中丙二醛(MDA)含量、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的活性,切片观察肝脏病理损害程度并评分.结果:MT使慢性乙醇慢性肝损伤小鼠的MDA含量明显下降,有效降低AST和ALT活性,并与剂量呈正相关.MDA:造模 高浓度MT给药组和造模 低浓度MT给药组值均明显较模型组减低(P均＜0.05).ALT:造模 低浓度MT给药组活性值明显低于模型组(P＜0.01);造模 高浓度MT给药组活性值明显较造模 低浓度MT给药组减低(P＜0.01).AST:造模 低浓度MT给药组活性值明显低于模型组(P＜0.01);造模 高浓度MT给药组活性值明显较造模 低浓度MT给药组减低(P＜0.01).病理学形态观察显示,MT能减轻肝脏病理损害程度,与剂量成正相关.病理损害程度评分:造模 低浓度MT给药组值明显低于模型组(P＜0.01);造模 高浓度MT给药组值明显较造模 低浓度MT给药组低(P＜0.01).结论:MT对慢性乙醇肝损伤具有一定的保护作用,且与药物剂量呈正相关.