雄激素相关基因CYP17多态性与囊肿型痤疮的相关性研究

目的探讨雄激素相关基因CYP17多态性与湖南汉族囊肿型痤疮的相关性。方法提取寻常型和囊肿型痤疮患者及正常人的血DNA标本。设计引物通过PCR技术扩增出包括CYP17基因多态位点的片段,用限制性内切酶MspA1Ⅰ进行酶切,产物在2%琼脂糖凝胶上电泳,确定出CYP17基因的3种基因型,即A1A1、A1A2、A2A2,并经测序证实。结果寻常型组基因型A1A2频率分别与囊肿型组以及正常人组比较无显著性差异（χ^2=2.965,P=0.085,OR=0.590,95%CI0.323～1.078;χ^2=0.11,P=0.74,OR=0.904,95%CI0.498～1.641）,囊肿型组基因型A1A2频率与正常人组比较有显著性差异（掊2=3.893,P=0.048,OR=1.875,95%CI1.001～3.510）;寻常型组基因型A2A2频率和正常人组比较无显著性差异（χ^2=0.015,P=0.901,OR=0.958,95%CI0.490～1.875）,囊肿型组基因型A2A2频率分别与寻常型组和正常人组比较有显著性差异（χ^2=6.383,P=0.012,OR=2.293,95%CI1.197～4.393;χ^2=6.42,P=0.011,OR=2.198,95%CI1.189～4.061）。结论 CYP17基因-34bp处T→C碱基置换的存在将增大患囊肿型痤疮的风险。     

β联蛋白对体外过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

目的 观察高表达的β联蛋白对体外过氧化氢（H2O2）所致正常人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老表型的影响。方法 NHSF分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/L H2O2处理2 h。实验分为转染H2O2处理组（NHSF + β联蛋白 + H2O2）、转空载体H2O2处理组（NHSF + 空载体 + H2O2）以及转空载体组（NHSF + 空载体）。用RT-PCR和Western印迹分析β联蛋白的表达,显微镜观察细胞形态,试剂盒检测衰老相关的β半乳糖苷酶（SA-β-gal）、细胞活性氧（ROS）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。所有数据均用SPSS 13.0软件进行统计分析,多组间比较采用ANOVA检验。结果 pcDNA3.1-β联蛋白明显上调了NHSF中β联蛋白的表达。NHSF + 空载体 + H2O2组β联蛋白mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.2900 ± 0.0195和0.3130 ± 0.0171）明显低于NHSF + 空载体组（分别为0.5963 ± 0.0400和0.6190 ± 0.0090）,两组比较,均P ＜ 0.05;NHSF + β联蛋白 + H2O2组β联蛋白表达水平（0.7953 ± 0.0074）高于NHSF + 空载体 + H2O2组（P ＜ 0.05）。SA-β-gal染色率在NHSF + 空载体组、NHSF + 空载体 + H2O2组、NHSF + β联蛋白 + H2O2组分别为（2.9667 ± 0.2517）%、（37.70 ± 0.9539）%、（29.330 ± 0.6359）%,各组比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。NHSF + 空载体、NHSF + 空载体 + H2O2、NHSF + β联蛋白 + H2O2组ROS活性分别为（50.9963 ± 9.2688）%、（109.9190 ± 11.5215）%、（75.1063 ± 3.0138）%,SOD水平分别为（88.0856 ± 3.9181）、（35.5585 ± 3.4438）、（61.7029 ± 3.1716） U/mg,各组比较,差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论 高表达的β联蛋白能够抑制细胞衰老相关β-半乳糖甘酶（SA-β-gal）和细胞活性氧（ROS）的表达,同时上调了SOD的活性。 【关键词】 β连环素; 过氧化氢; 成纤维细胞; 氧化性应激; 细胞衰老     

β联蛋白对过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞增殖活性及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响

目的 观察高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）诱导衰老人皮肤成纤维细胞（HSF）增殖活性以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。 方法 实验分3组。HSF细胞分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/L H2O2处理2 h。噻唑蓝检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,RT-PCR和Western印迹分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。 结果 HSF + 空载体组、HSF + 空载体 + H2O2组、HSF + β联蛋白 + H2O2组细胞增殖活性分别为0.792 ± 0.012、0.462 ± 0.012、0.521 ± 0.015,细胞凋亡率分别为（3.407 ± 0.217）%、（24.555 ± 1.793）%、（15.360 ± 0.755）%,各组比较,差异有统计学意义（均P ＜ 0.01）。HSF + 空载体 + H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.333 ± 0.003和0.336 ± 0.004）明显低于HSF + 空载体组（分别为0.507 ± 0.013和0.514 ± 0.021）,两组比较,均P ＜ 0.01。HSF + β联蛋白 + H2O2组Bcl-2 mRNA和蛋白水平分别为0.404 ± 0.006和0.411 ± 0.005明显高于HSF + 空载体 + H2O2组,两组比较,均P ＜ 0.01。HSF + 空载体 + H2O2组Bax mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.451 ± 0.002和0.460 ± 0.008）明显高于HSF + 空载体组,两组比较,均P ＜ 0.01。HSF + β联蛋白 + H2O2组Bax mRNA和蛋白水平（分别为0.339 ± 0.012和0.346 ± 0.013）明显低于HSF + 空载体 + H2O2组,两组比较,均P ＜ 0.01。 结论 高表达的β联蛋白能够提高衰老人皮肤成纤维细胞增殖活性。     

氧化应激所致的人皮肤成纤维细胞衰老中β-连环蛋白的表达研究

目的 观察β-连环蛋白在氧化应激所致的人皮肤成纤维细胞衰老中的变化,探讨其在应激诱导的皮肤衰老中可能的作用.方法 从儿童包皮分离培养原代成纤维细胞,H2O2:处理第2～4代人皮肤成纤维细胞,显微镜观察其形态学改变,β-半乳糖苷酶细胞衰老试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性,RT-PCR、Western印迹检测β连环蛋白mRNA和蛋白表达水平.结果 150 μmol/L H2O2:处理2 h后可以诱导人皮肤成纤维细胞衰老.在应激诱导的衰老(SIPS)细胞中β-半乳糖苷酶阳性率达到(37.67±1.53)%.而对照细胞中只有(2.97±0.25)%,两组差异有统计学意义(P<0.01).RT-PCR 结果显示,在对照细胞组β连环蛋白/GAPDH mRNA比值为0.59±0.04,SIPS细胞组为0.29±0.30,对照细胞组明显高于SIPS细胞组,两组差异有统计学意义(t=10.06,P<0.01).Western印迹结果显示,对照细胞组β连环蛋白/GAPDH蛋白比值为0.62±0.03,SIPS细胞组为0.31±0.01,对照细胞组明显高于SIPS细胞组,两组差异有统计学意义(t=14.97,P<0.0).结论 150 μmol/L H2O2:处理2 h可以诱导人皮肤成纤维细胞发生衰老改变,SIPS细胞中β连环蛋白表达水平明显降低,初步推测β连环蛋白可能是调控皮肤衰老的重要靶基因.

Abstract：

Objective To observe the changes of β-catenin expression in human skin fibroblasts (HSFs) after induced by oxidative stress, and to explore its possible roles in oxidative stress-induced premature senescence (SIPS) of HSFs. Methods Fibroblasts were isolated from the foreskin of a child and subjected to a primary culture. The fibroblasts of second to fourth passage were treated with various concentrations of H2O2 for 2 hours to establish an optimized model of stress-induced premature senescence, β-galactosidase assay kit was used to detect the activity of β-galactosidase in H2O2rinduced HSFs, RT-PCR and Western blot to measure the mRNA and protein expressions of β-catenin in control and senescent HSFs. Results Premature senescence of HSFs could be induced by the treatment with H2O2 of 150 μmol/L for 2 hours. The proportion of β-galactosidase-positive cells was (2.97 ± 0.25)% in control HSFs and (37.67 ± 1.53)% in senescent HSFs (P< 0.01). A significant increase was observed in the β-catenin/GAPDH protein ratio and β-catenin/GAPDH mRNA ratio in control HSFs compared with the senescent HSFs (0.62 ± 0.03 vs. 0.31 ± 0.01, t = 14.97, P < 0.01; 0.59 ± 0.04 vs. 0.29 ± 0.30, t = 10.06, P < 0.01). Conclusions The two-hour treatment with H2O2 of 150 μmol/L could induce the premature senescence of HSFs, and there is a notable decrease in the expression of β-catenin in prematurely senescent HSFs induced by oxidative stress, implying that β-catenin is an important target gene for the regulation of skin aging.     

血小板聚集试验的临床意义

血小板聚集是指血小板与血小板之间相互粘着的能力,是止血和血栓形成的基本条件之一。血小板聚集功能的增强或降低在某些伴有血液凝固性异常或出血性疾病的发生发展中的作用已引起普遍重视。我院应用TYXN-91智能血液凝集仪对一些伴有血液凝固性异常的疾病和出血性疾病进行了血小板聚集功能的测定,以便了解血小板聚集反应在各种疾病中变化的规律,为某些疾病的诊治提供了有价值的资料。     

急性淋巴细胞性白血病合并周围神经损伤一例

急性淋巴细胞性白血病(简称急淋)合并周围神经损伤临床少见,我院见到1例,现报道如下。患者女性,20岁,学生。因头晕、乏力、心悸、气短、发热1个月于1990年12月12日入院。查体:中度贫血外貌,皮肤枯膜无出血点,双颌下可触及黄豆大淋巴结,胸骨压痛(+),心肺(-),肝     

骨髓活检在急性非淋巴细胞白血病化疗前、后的应用

应用骨髓活检对15例初治ANLL化疗前、后骨髓病理变化进行定量分析。结果表明:骨髓活检标本对确定骨髓内细胞分布、间质变化、骨髓细胞增生程度和判断化疗效果均较骨髓穿刺涂片优越,二者相互配合可以比较全面地反映骨髓的病理变化。     

皮肤病住院患者568例M蛋白检测结果分析

目的:探讨M蛋白血症在皮肤病患者中的分布。方法:对2011年1月—2016年12月在武汉市第一医院住院的568名皮肤病患者M蛋白检测结果及临床资料进行分析。结果:568例患者中,男性319例,女性249例,年龄1~92岁。送检M蛋白的皮肤病包括结缔组织病、大疱性皮肤病、皮肤血管炎、脂膜炎、红斑及红斑鳞屑性皮肤病、变态反应性皮肤病、感染性皮肤病、代谢性皮肤病及皮肤肿瘤等。共检出M蛋白阳性患者23例,阳性率为4.05%,其中男性13例,女性10例,年龄47~84岁。阳性患者主要分布于坏疽性脓皮病、变应性皮肤血管炎、嗜酸性粒细胞增多性皮病、红皮病及角层下脓疱病中。M蛋白类型包括IgA、IgG、IgM及双克隆型,其中以IgA-λ型最常见。7例患者进一步行骨髓穿刺检查,其中2例M蛋白阳性患者并发恶性血液病(1例嗜酸性粒细胞增多性皮炎并发B细胞淋巴瘤,1例带状疱疹并发急性粒细胞白血病),另5例患者均符合意义未明的单克隆免疫球蛋白血症。结论:对于坏疽性脓皮病、角层下脓疱病等嗜中性皮病、变应性皮肤血管炎、伴明显嗜酸性粒细胞增高的皮炎湿疹类疾病可以检测M蛋白,以探讨其与这些疾病的相关性。     

台湾医改：区域化、集团化办医为全民健康护航——云南省红河州赴台湾卫生考察报告

在内地既有的医疗体制下，公立医院存在着很多待解的难题，而其中一些主要问题正是台湾医疗界20多年前所经历的。那么，从他们已经历过的医改阵痛中去总结经验，这对内陆地区现有的改革是很有借鉴意义的。     

SIRT1、Ku70在急性白血病中的表达及意义

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)及DNA修复蛋白(Ku70)在成人急性白血病(AL)骨髓中的表达及其临床意义。方法:应用半定量RT-PCR检测SIRT1及Ku70在50例成人AL骨髓中的表达情况。结果:SIRT1、Ku70在AL中的表达明显增高(P<0.05),复发组高于初治组(P<0.05),急性非淋巴细胞白血病(ANLL)与急性淋巴细胞白血病(ALL)组的差别无统计学意义(P>0.05),SIRT1、Ku70的表达与患者性别、年龄、初诊时白细胞计数及髓外浸润情况无关(P>0.05),SIRT1、Ku70高表达组的完全缓解(CR)率低于低表达组(P<0.05)。结论:SIRT1及Ku70在成人AL骨髓中高表达,两者呈正相关,可能共同参与白血病的发生发展。