Ⅰ期细支气管肺泡癌和肺腺癌增殖凋亡和转移特性的研究

目的探讨新定义后的细支气管肺泡癌与肺腺癌生长和转移性的差异。方法采用流式细胞术检测15例工期细支气管肺泡癌和19例普通肺腺癌的DNA指数、增殖指数（PI）、总s期细胞比率（SPF）和凋亡细胞比率（PA），免疫组织化学检测E—Cadherin、Collagen Ⅳ和VEGFR2的表达。结果细支气管肺泡癌的PA大于普通肺腺癌，PI和SPF值在普通肺腺癌与细支气管肺泡癌中差异无统计学意义；细支气管肺泡癌的E-Cadherin、Collagen Ⅳ指标表达水平高于普通肺腺癌，VEGFR2在普通肺腺癌、细支气管肺泡癌中的表达差异无统计学意义。结论早期细支气管肺癌与普通肺腺癌相比，具有相同增殖水平，较高的凋亡水平和更低的转移倾向。     

CLINICAL OBSERVATION ON TREATMENT OF CHILD CEREBRAL PALSY WITH PENETRATION NEEDLING FROM SISHENCONG TO BAIHUI POINT

Childcerebralpalsy(CCP)isanon-pro-gressivecerebralinjury-inducedsyndromeoccur-ringwithinamonthfrompre-birthtopoSt-birth,manifestedmainlybycentralneurogenicdyskinesiaandabnormalPosture,disturbanceofvision,audition,speechandintelligence,andepilepticattack.Itseriouslyendangerschildren'smentalandphysicalhealthandoftenresultsinpermanentdisability.Uptonow,therehavenoyetbeenanyspecialtherapeuticapproaches.Inrecentyears,theauthorsadoptedpenetrationneedlingandmoxibustiontotreatCCPandachievedsatisfac…     

As2O3对人骨肉瘤细胞的体外效应

 目的研究三氧化二砷(As₂O₃)对人骨肉瘤细胞U20S的生物学效应及其机制。方法利用MTT法观察As₂O₃对U20S 细胞的生长抑制作用;Annexin V-FTTC+PI双参数检测细胞凋亡;流式细胞仪测定经不同浓度As₂O₃处理后U20S细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关蛋白Fas和Bcl-2阳性细胞百分率及细胞内钙离子(IECa²⁺)含量变化。结果As₂O₃可显著抑制U20S细胞生长,且剂量-效应和时间-效应关系显著(P<0.05),其24,钙和72 h的IC₅₀值分别为10.66,2.43和0.46 μmol·L^-1。U20S细胞经As₂O₃处理后可发生凋亡。As₂O₃能显著增加Fas蛋白表达和IECa²⁺含量(P<0.01),下调PCNA蛋白表达(P<0.01),对Bcl-2表达无影响(P>0.05)。结论As₂O₃在体外可显著抑制人骨肉瘤细胞U20S生长并引起凋亡,其机制可能与上调Fas表达和IECa²⁺含量及降低PCNA蛋白表达有关。     

骨软组织肉瘤中耐药相关蛋白表达及与化疗耐药的相关性

目的： 探讨4种耐药相关蛋白－P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽S-转移酶-π（GST-π）、肺耐药蛋白 (LRP)和多药耐药相关蛋白（MRP）在骨肉瘤细胞株Saos2和U2OS以及34例骨软组织肉瘤的表达及与化疗耐药的关系。 方法： 应用流式细胞术（FCM）检测蛋白表达；MTT法评估化疗耐药。 结果： Saos2细胞耐药相关蛋白的表达低于U2OS，阿霉素（ADM）、顺铂（DDP）、5-氟脲嘧啶（5-Fu）、丝裂霉素（MMC）、氮烯咪胺(DTIC) 和长春新碱（VCR）的敏感性高于U2OS。两细胞株经1/5半数抑制浓度（IC50）的ADM和 DDP分别处理 24 h 后，GST-π增幅达33％-43％。34例患者对ADM、DDP、5-Fu、MMC、DTIC、VCR和MTX的不敏感率分别为41.18％、17.65％、47.06％、50.00％、76.47％、61.76％和52.94％。肿瘤组织P-gp、GST-π、LRP和MRP表达分别为1.54、2.58、1.91和1.86。相关分析显示，P-gp表达与ADM耐药呈正相关(r=0.485，P<0.01)，GST-π表达与ADM、DDP、5-Fu、MMC耐药呈正相关(r分别为0.402、0.458 、0.364和0.500，P值分别为<0.05、<0.01、<0.05和<0.01)。耐药相关蛋白在不同性别、不同年龄、不同病理类型、不同肿瘤大小患者间的表达差异均无显著（P＞0.05）。经术前化疗的患者GST-π表达显著升高，且随访复发患者术前GST-π表达显著高于无复发患者(P<0.05)。 结论： 骨软组织肉瘤患者耐药相关蛋白表达及化疗敏感性存在显著个体差异。化疗可引起GST-π表达上调。原发GST-π高表达是骨软组织肉瘤耐药的主要机制并与预后有关。     

质粒载体系统介导的人肿瘤细胞RNA干扰作用

目的 研究质粒载体介导的肿瘤细胞RNA干扰效果。方法 构建以H1 RNA为启动子的针对GFP基因不同序列片段的RNAi质粒pLasRiGFP1／2／3。将其与pcdna3．1EGFP共转染HEK293、Hela和SPCA1细胞或单独转染SPCA1-GFP，用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪分析GFP表达。结果 pLasPdGFP1、pLasRiGFP2和pLasRiGFP3在HEK293中对GFP表达的抑制率分别为97．5％、97％和89％，Hela细胞中为83％、90％和90％，SPCA1细胞中为65％、55％和40％。pLasRiGFP1与plasRiGFP2在SPCA1-GFP细胞对GFP的抑制率分别为53％和58％。RNAi作用在48，96h最强，并随RNAi质粒增加抑制效果呈增强趋势，但到达一定量后作用趋势平缓。结论 H1 RNA为启动子的RNAi质粒能有效介导肿瘤细胞RNAi，其作用存在剂量和时间效应，受靶序列、细胞类型等因素的影响。     

可控回肠膀胱术治疗膀胱移行细胞癌5例

目的寻求解决膀胱肿瘤有效方法.方法采用膀胱全切除可控回肠膀胱术治疗膀胱移行细胞癌5例.结果回肠膀胱自控功能良好,电解质紊乱不明显.随访3年5个月～10年2个月,1例术后3年脑溢血死亡,1例女性因转移死亡,余3例均健在.结论可控回肠膀胱术并发症少,是治疗膀胱癌的有效方法.     

乳酸脱氢酶及其同工酶谱检测对肺癌诊断意义

目的 探讨血清中乳酸脱氢酶（LDH）总活力及其同工酶谱的变化对肺癌诊断的意义。方法 血清乳酸脱氢酶总活力用崔福生介绍的方法，乳酸脱氢酶同工酶谱的测定利用琼脂糖凝胶电泳法。结果 肺癌组血清乳酸脱氢酶总活力明显升高，与正常对照组比较有显著性差异（P＜0．05）；肺癌组血清LDH同工酶谱显示LDH3明显升高，与对照组比较有显著性差异（P＜0．05）。结论 检测血清中LDH总活力及其同工酶谱的变化对肺癌的辅助诊断，预后判断有一定的参考价值。     

SKI-2053R对胃癌细胞作用的体外研究

目的 :研究SKI 2 0 5 3R对胃癌细胞株SGC 790 1的作用及其机制。方法 :MTT法检测SKI 2 0 5 3R对SGC 790 1的增殖抑制作用 ,流式细胞术检测药物作用前后细胞周期的变化及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达改变。结果 :SKI 2 0 5 3R可明显抑制SGC 790 1的增殖活性 ,改变SGC 790 1的细胞周期分布 ,降低PCNA的表达。结论 :SKI 2 0 5 3R对SGC 790 1有明显的杀伤和抑制增殖的作用 ,其机制可能与下调PCNA的表达有关。     

电化学对提高PBS和人血浆氧分压的研究

采用电化学处理的方法，对人血浆及ＰＢＳ（磷酸盐缓冲盐水）进行了提高氧分压的基础实验研究。结果显示：电化学处理对人血浆和ＰＢＳ的氧分压有明显的增强作用。统计学处理结果具有非常显著性差异（Ｐ＜０．００１），对进一步研究放射治疗增敏具有实际意义。     

endostatin基因重组腺病毒的构建及在人肺腺癌细胞的表达

目的 利用AdEasy系统构建鼠内皮抑素(ES)基因重组腺病毒Ad.ES,并观察其在人肺腺癌细胞SPCA-1的表达.方法 采用酶切、连接和转化等方法,将质粒pcDNA3.ES中的ES片段插入腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack.CMV,构建重组腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack.CMV.ES,经Pme Ⅰ酶切线性化后与含腺病毒基因骨架的质粒载体pAdEasy-1在细菌BJ5183内进行同源重组得到腺病毒质粒pAd.ES,重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切后,转染人胚肾293细胞包装成腺病毒颗粒Ad.ES,将病毒上清反复感染293细胞获得高滴度病毒,应用氯化铯(CsCl)梯度离心的方法纯化病毒,利用AdEasy系统上的绿色荧光蛋白(GFP)标签测定重组腺病毒的功能滴度.用2 MOI重组腺病毒Ad.ES体外转导SPCA-1细胞48h,流式细胞仪检测GFP表达阳性率,ELISA法测定细胞培养上清液中ES的含量.结果 双酶切证实重组腺病毒穿梭载体pAdTrack.CMV.ES质粒构建正确,卡那霉素抗性筛选和Pac Ⅰ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒构建成功.Pac Ⅰ酶切线性化的重组质粒导入293细胞3d,约20%的细胞表达GEP,回收病毒重复感染293细胞,CsCl梯度离心纯化最终获得约5.6×1010TU/mL滴度的重组病毒.Ad.ES体外转导SPCA-1细胞48h后,细胞GFP阳性率为93%,细胞培养上清液中ES的含量较Ad.GFP感染组和阴性对照组明显增加(P＜0.05).结论 应用新型腺病毒载体AdEasy系统可在短期内制备同时表达GFP和ES的重组腺病毒,Ad.ES体外感染人肺腺癌细胞SPCA-1可显著提高ES表达,为进一步研究抗血管生成治疗肺癌奠定了基础.