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本研究目的构建携带人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的慢病毒载体,并研究其对不同细胞系的淋巴瘤细胞的感染效率。采用分子克隆技术,将针对TRAIL基因mRNA的cDNA片段插入到克隆载体pGM-T,构建pGM-T-TRAIL,然后将测序正确的TRAIL基因克隆至慢病毒表达载体pWPI,构建慢病毒表达载体pWPI-TRAIL。最后利用pWPI/VSV-G/Δ8.2慢病毒包装系统,通过转染293T细胞,制备重组慢病毒plenti-TRAIL,并进行浓缩和滴度测定。将重组慢病毒载体感染不同来源的淋巴瘤细胞系,测定荧光表达评价感染效率,利用RT-PCR和Western blot法评价TRAIL基因的表达情况。结果表明,酶切鉴定及测序结果表明pGM-T-TRAIL和pWPI-TRAIL载体构建成功,滴度测定结果显示浓缩的重组慢病毒plenti-TRAIL浓度可达109IU/ml。感染效率结果显示YTS细胞较DOHH2和Jurkat细胞更易被慢病毒感染(P<0.05)。RT-PCR和Western blot实验表明淋巴瘤细胞后plenti-TRAIL感染后可有效地表达TRAIL基因。结论:成功构建了慢病毒表达载体pWPI-TRAIL,并制备出重组慢病毒plenti-TRAIL。plenti-TRAIL可以有效感染不同细胞来源的淋巴瘤细胞系,同时感染后的淋巴瘤细胞可以有效表达TRAIL基因。 相似文献
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目的研究长春新碱(VCR)联合小剂量环磷酰胺(CTX)治疗系统性红斑狼疮(SLE)的安全性和对B细胞活化因子(BAFF)mRNA表达水平的影响。方法进行12周随机、对照研究,将纳入的SLE患者分为大剂量CTX组、VCR联合小剂量CTX、VCR联合大剂量三组,观察用药期间发生的不良事件,实时荧光定量RT-PCR检测BAFF mRNA表达水平。结果⑴VCR联合小剂量CTX组不良事件发生率与大剂量CTX组、VCR联合大剂量CTX组差异无统计学意义;⑵在基线时、12周时,VCR联合小剂量CTX组BAFF mRNA表达水平与大剂量CTX组、VCR联合大剂量CTX比较差异无统计学意义;⑶三组治疗前后BAFF mRNA表达水平明显下降,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 VCR联合小剂量CTX治疗SLE疗效确切,副作用无明显增加。 相似文献
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目的 为药学服务概念混乱导致的法律责任适用问题提供解决方案.方法 采取文献研究方法以及比较法,通过厘清药学服务的法律概念,分析目前不同形式的药学服务产生的民事和行政责任,规范药学服务中的药师新职责.结果与结论 药学服务的法律概念具有判断标准的作用.只有基于双方约定,通过运用药物治疗相关的药学专业知识,达到保障公众用药安... 相似文献
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目的构建成人心脏移植受者术后机械通气时间延长的风险预测模型。方法运用结构化语言查询医院电子病历系统, 采用便利抽样法, 选取2004年1月—2021年12月在中国医学科学院阜外医院接受心脏移植手术的957例成人受者为研究对象, 收集基本资料、既往史、术前血肌酐、术前总胆红素、术前是否呼吸机辅助、术中供体心脏冷缺血时间等信息。按照3∶1的比例将入选患者分成训练组(n=717)和验证组(n=240), 基于训练组数据使用双向逐步Logistic回归法构建风险预测模型, 基于验证组数据使用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积、灵敏度和特异度评价模型的预测效果。结果本研究纳入的957例成人心脏移植受者中, 18.39%(176/957)的受者术后发生机械通气时间延长(>24 h)。基于训练组建立的模型中, 纳入了年龄≥60岁(OR=1.820)、输血史(OR=5.237)、接受过其他心脏手术(OR=2.826)、术前总胆红素≥34.2 μmol/L(OR=1.861)、术前呼吸机辅助(OR=9.421)、术前主动脉内球囊反搏辅助(OR=1.826)、术中供心冷缺血时间≥360 min... 相似文献
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背景:内侧开放楔形胫骨高位截骨是治疗膝关节内侧间室骨关节炎的有效保膝手段,相关研究证明相对于传统评价工具,遗忘关节评分应用于评价内侧开放楔形胫骨高位截骨具有更低的天花板效应和一致性。目的:探讨内侧开放楔形胫骨高位截骨后遗忘关节的预测因素。方法:选择在广州中医药大学第一附属医院进行内侧开放楔形胫骨高位截骨手术治疗的患者117例,男35例,女82例,平均年龄61岁,术后获得了至少2年的随访。通过评价患者术后是否达到遗忘关节分为遗忘关节组(n=28)和非遗忘关节组(n=89),以术前患者特征和手术相关因素为潜在预测因素,进行单变量和多变量逻辑回归分析。结果与结论:(1)两组患者术前的胫骨近端内侧角比较差异有显著性意义(P <0.05),术后遗忘关节评分(FJS)、膝关节损伤和骨关节炎评分(KOOS)、膝关节协会功能评分和关节感知问题(PJP)比较差异均有显著性意义(P <0.05),术后髋膝踝角和胫骨近端内侧角比较差异有显著性意义(P <0.05);(2)单因素Logistic回归分析显示,术前胫骨近端内侧角对遗忘关节存在显著影响[OR=0.755,95%CI(0.635-... 相似文献
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目的 探索人源脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, HUMSCs)静脉注射对CCl4诱导的大鼠急性肝肾损伤的保护作用和肠道微生态改变。方法 健康SPF级SD大鼠24只,随机分为健康组(8只,经腹腔注射橄榄油溶液3 ml/kg)、CCl4组(8只,经腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液,3 ml/kg)和HUMSCs治疗组(8只,在CCl4基础上经尾静脉注射1×106 HUMSCs/ml,每周干预2次,连续干预3周)。3周后处死大鼠,称重肝肾组织,检测肝肾生化指标,并进行肝肾组织的病理学评估和Illumina高通量肠道微生态分析。结果 造模后3周,CCl4组肝肾功能异常升高,HUMSCs治疗后可以显著改善肝肾功能,病理染色提示CCl4组肝脏出现脂肪空泡化结构,肾脏出现肾小球萎缩和肾小管扩张,二者均呈现一定的纤维化改变,HUMSCs治疗组可以显著减轻上述的病理改变。肠道微生... 相似文献