单克隆永生化人骨髓基质干细胞分化能力和VEGF分泌量的相关性

目的 观测单克隆人永牛化骨髓基质干细胞(hMSC-TERT)体内外分化潜能和自分泌血管内皮细胞牛长因子(VEGF)的相关性.方法 梯度稀释法建立单克隆hMSC-TERT,ELISA方法测定细胞培养液中VEGF含量.将各单克隆细胞进行脂肪、骨和神经样细胞体外诱导,检测多向分化能力.接种联合免疫缺陷性鼠(SCID),免疫组化法检测细胞体内分化率.将各单克隆细胞上清液中VEGF的含量变化值与其上皮细胞分化率进行单变量方差分析.结果 各hMSC-TERT细胞的体内、外分化能力存在筹异.细胞上清液中,第5天VEGF浓度较第3天明显减少.各细胞上清液中VEGF浓度的减少幅度差异有统计学意义(hMSC-TERT2,22 ±0.33;hMSC-TERT20,7.68±0.25;hMSC-TERT-C2,103±35.67;hMSC-TERT-C3,140±34.17;hMSC-TERT-C6,115±28.75;hMSC-TERT-C13,-21±11;hMSC-TERT-C19,181±52.92;hMSC-TERT-C20,101±27.08;hMSC-TERT-C21,-29±10.5;hMSC-TERT-C29,46±25.42),减少幅度与细胞体内分化时角蛋白的阳性率呈正相关.结论 单克隆hMSC-TERT上清液中VEGF变化幅度与细胞体上皮分化能力呈正相关.为选用特定的单克隆hMSC-TERT细胞进行临床和实验研究做了有益的探讨.

Abstract：

Objective To investigate the multi-differentiation potential and VEGF secretory volume of monoclonal immortalized human mesenchymal stem cells(hMSC-TERT)and to determine the relationship between them.Methods Monoelonal hMSC-TERT were isolated using limiting dilution.The growth curves of them were detected by method of MTT.ELISA was used to detect the concentration of VEGF in the supernatant of those mnoclonal hMSC-TERT.Their adipocytic,osteogenic,neuronal differentiation potential in vitro were determined by Oil Red O staining,Van Kossa staining and immuocytochemistry for Tubulin-βⅢ antibody.Those Monoclonal hMSC-TERT were transplanted into the subcutaneously of severe combined immunodeficiency(SCID) mices.The grafts of those cells were removed and analyzed by immunohistochemistry for pathologic tissue markers to discover the multi-differentiation potential of those mnoclonal hMSC-TERT in vivo.Results There was statistically significant difieFence between different mnoelonal hMSC-TERT in multidifferentiation potential and the decreased concentration of VEGF in the supernatant of those mnoconal hMSC-TERT from the 3 rd day to the 5th day.The positive rates of CK in grafts formed by those monoelonal hMSC-TERT in SCID mices were direct correlation with the decreased concentration of VEGF in the supernatant of those cells.Conclusion The secretory capability of VEGF of those monoclonal hMSC-TERT may direct correlation with the epithelial differentiation potential of those cells.     

鞍区肿瘤的术前定性诊断及手术方法选择

累及鞍区的肿瘤种类较多．且位置深。且与下丘脑、视交叉、颈内动脉等重要结构比邻．解剖结构复杂。2001年4月至2004年6月，我院收治了320例鞍区肿瘤。现作回顾性分析，以探讨此区肿瘤的术前定性诊断与手术方法选择。     

三维适形放射治疗中晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的:观察三维适形放射治疗中晚期非小细胞肺癌的效果.方法:对200例中晚期非小细胞肺癌实施三维适形放射治疗,5～8Gy/次,隔日1次,肿瘤灶总剂量48～72Gy,随访6～42个月,平均24个月.结果:1、2、3年生存率分别为69.0%、48.0%和36.5%.治疗3个月后复查CT,肿块完全消失98例,缩小50%以上91例,不足50% 11例.完全缓解98例,占49.0%;部分缓解102例,占51.0%;有效率100%.结论:三维适形放射治疗中晚期肺癌是一种有效的治疗方法,远期疗效仍待进一步随访证实.     

基因转染3T3细胞的hTGFβ1表达

目的鉴定重组pcDNA3.1-TGFβ1载体在真核细胞中的表达,为其在软骨组织工程中的基因转染创造条件.方法利用脂质体Fugene 6将TGFβ1真核表达载体转染至NIH3T3细胞,RT-PCR、ELISA检测hTGFβ1基因的表达,并利用CCL/64细胞株鉴定重组hTGFβ1的生物学活性. 结果质粒转染3T3细胞后,hTGFβ1mRNA及其蛋白的表达均显著增强,且分泌表达的hTGFβ1能明显抑制CCL/64细胞的生长结论重组载体在3T3细胞中能表达具有一定生物学活性的hTGFβ1。     

反义Smad3抑制3T3细胞增殖和TGF-β1基因表达

目的研究反义Smad3对转化生长因子-β1(TGF-β1)基因表达的调控和对3T3细胞增殖的影响.方法构建反义Smad3质粒,以脂质体介导转染NIH3T3细胞,进行细胞计数,并用RT-PCR方法观察TGF-β1 mRNA的表达.结果反义Smad3能下调TGF-β1 mRNA的表达,并抑制3T3细胞增殖.结论可以通过阻断TGF-β1细胞内信号传导调控TGF-β1基因的表达并抑制细胞增殖.     

神经导航下猴苍白球区电生理特性的实验研究

目的探讨猴苍白球区（Gp）电生理的特性.方法运用Brainlab神经导航系统通过微电极技术记录猴Gp不同部位的电活动.结果微电极可在Gp的不同部位记录到不同特征的电活动.苍白球外侧部（Gpe）背侧可测到低频的电活动,Gpe腹侧可测到高频的电活动;苍白球内侧部（Gpi）可测到高频、高幅的电活动.结论猴Gp不同部位电活动的频率、幅度、放电方式均有统计学意义,利用Gp不同部位的电生理特性可以帮助立体定向手术中的精确定位.     

扩张皮肤增量规律的研究

目的 通过对扩张过程中皮肤Ⅰ型胶原含量的动态检测，探讨扩张皮肤“增量”的变化规律。方法 应用免疫组化技术和多功能真彩色病理图像分析系统，检测在不同扩张时间扩张皮肤Ⅰ型胶原含量的动态变化。结果 ①扩张皮肤Ⅰ型胶原含量增高，随扩张时间的延长呈上升趋势，在扩张囊注水加压后的第7天增量达峰值，完成一个增量周期。②除第一天扩张皮肤外，以后每天扩张皮肤Ⅰ型胶原含量与对照组比较差异均有显著性（P＜0．05）。③不同扩张时间扩张皮肤Ⅰ型胶原含量也具有显著性差异（P＜0．05）。结论 扩张囊每次注水加压后，皮肤增量逐渐加速，第7天达峰值完成一个增量周期。     

一种可编程植入式神经刺激系统

目的 研究用于神经系统疾病的功能电刺激疗法的可编程植入式神经刺激系统.方法 系统由植入体内的脉冲发生器、导线、电极,用于体外遥测/程控的控制器,个人数字助理(personal digtal assistant,PDA)和磁铁组成.对靶点神经提供脉宽、频率、幅度、工作时间、关断时间可调的电脉冲刺激.结果植入式脉冲发生器的重量为34 g,尺寸小于47 mm ×49 mm×10 mm,在典型的神经刺激条件下的平均功耗为54μW,预计使用寿命在10年以上.已完成20只家兔的迷走神经刺激试验,验证了系统在长期植入中的安全性和功能性.结论 研制的系统可作为植入式神经刺激动物试验研究的仪器平台,满足临床应用的基本要求.     

软骨组织工程与基因治疗的研究进展

本文概述了目前细胞因子在软骨组织工程中的作用,以及基因工程在软骨组织工程中的应用现状和前景。软骨组织工程与基因工程的有机结合,必将推动软骨组织工程的进一步发展。