两种培养基诱导人和大鼠脂肪干细胞向脂肪细胞分化的比较

目的比较两种培养基诱导人和大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cell,ADSC)的成脂分化能力,探寻更为适宜的ADSC成脂诱导方案。方法提取3例临床患者的脂肪干细胞(h ADSCs)及出生6周大鼠的脂肪干细胞(r ADSCs),将h ADSCs、r ADSCs分别接种于六孔板,分为未诱导组、成脂诱导I组和II组,分别使用普通培养基、成脂诱导培养基I和II,培养10 d后以油红O染色,镜下观察及检测490 nm吸光度值(A490),比较脂滴形成情况。结果未诱导的h ADSCs和r ADSCs均呈成纤维细胞样生长,成脂诱导培养3 d后出现脂滴;油红O染色显示,成脂诱导组脂滴呈橘红色,h ADSCs和r ADSCs的成脂诱导II组形成的脂滴均明显大于诱导I组,统计学分析显示h ADSCs的成脂诱导II组测得的A490明显高于诱导I组(P<0.01);而两组的r ADSCs的A490无明显差异(P>0.05)。结论 h ADSCs和r ADSCs在两种诱导培养基中均可成脂分化,但成脂诱导II组优于成脂诱导I组。     

瘦素对血管内皮细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响及阿托伐他汀对其的干预简

目的 探讨瘦素对血管内皮细胞（vascular endothelial cells,VECs）肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达的影响及阿托伐他汀对其的干预作用.方法 采用原代细胞培养方法建立大鼠VECs细胞模型;100 ng/mL瘦素刺激内皮细胞0、1、3、6、12 h;10 μmol/L阿托伐他汀干预细胞0、1、3、6、12、24 h,再用100 ng/mL瘦素干预细胞6h.运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定各组细胞上清液TNF-α表达浓度.结果 瘦素刺激组TNF-α表达高于对照组,且随着瘦素作用时间延长,TNF-α表达也随之增加.阿托伐他汀组TNF-α的表达低于对照组,且随着阿托伐他汀作用时间的延长,TNF-α表达也随之降低,24 h抑制作用最明显.结论 瘦素时间依赖性诱导血管内皮细胞TNF-α的表达,阿托伐他汀可以减弱瘦素诱导的TNF-α的表达.     

血必净通过高迁移率族蛋白1对热应激神经干细胞的保护作用研究

【目的】探讨血必净通过高迁移率族蛋白1（HMGB1）对热应激神经干细胞的保护作用机制。【方法】以43 ℃热刺激60 min建立热应激大鼠脑神经干细胞模型。实验分为7组,即阴性对照组、热应激组、非热应激+血必净（浓度25%）组、热应激+血必净低剂量（浓度5%）组,热应激+血必净中剂量（浓度15%）组、热应激+血必净高剂量（浓度25%）组、热应激+HMGB1抑制剂组。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞增殖能力;采用Ac-DEVD-pNA底物法检测细胞 Caspase-3活性;采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白轻链3（LC3）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及凋亡相关蛋白、Caspase-3 表达水平;使用核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提取细胞胞核、胞浆蛋白,Western Blot 检测胞内及胞浆内HMGB1表达水平。【结果】 选择热应激复温9 h 时间点与血必净高剂量用于后续实验。与阴性对照组比较,热应激组细胞 p62、LC3-up 表达量降低,p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1（胞浆）表达量增高（P＜0.01）;与热应激组比较,血必净处理组（热应激+高剂量血必净）p62、LC3-up、Caspase-3表达量进一步下降（P＜0.01）,p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1（胞浆）的表达量进一步升高（P＜0.01）;与血必净处理组比较,HMGB1抑制剂处理组（热应激+HMGB1抑制剂）p62、p-mTOR、LC3、Caspase-3及HMGB1（胞浆）的表达量无显著性差异（P＞0.05）。【结论】 血必净可通过促进HMGB1胞浆转位诱导自噬抑制热应激脑神经干细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。     

中医药循证临床实践指南多源证据体的构建

临床实践指南制订中会纳入不同的证据来源和证据类型,国内外对于多种来源证据体的研究和探索较少,本文倡导构建兼顾中医药特色的多源证据体,通过梳理70部指南指导手册,分析多源证据体构建的必要性及优势,并进一步从多源证据体的证据来源和证据逻辑角度进行理论阐释和应用介绍,以期为中医药循证临床实践指南的制订提供方法学参考。     

腰椎管狭窄症全脊柱内镜减压围手术期精准康复临床疗效

目的 探讨围手术期精准康复对腰椎管狭窄症（lumbar spinal stenosis, LSS）全脊柱内镜减压（endoscopic LOVE decompression, Endo-LOVE）术后临床疗效的影响。方法 对2020年1月至2022年4月收治的52例Endo-LOVE术后患者进行回顾性研究，根据患者接受康复治疗的不同形式分为观察组（精准康复）和对照组（传统康复），两组各26例。分别于术前、术后第7天、术后3个月对患者的疼痛视觉模拟评分（VAS）、Oswestry功能障碍指数（ODI）、JOA评分以及步态参数里的左右支撑相的比值进行评估。结果 所有手术患者均无严重手术并发症。术后第7天、术后3个月两组VAS和ODI评分较术前显著降低（P <0.01）,JOA评分和左右支撑相的比值较术前显著增高（P <0.01）；其中术后第7天、术后3个月观察组的各项指标跟对照组相比差异有统计学意义（P <0.05）。结论 腰椎管狭窄症Endo-LOVE手术围手术期精准康复可以缓解术后残余疼痛，改善步行功能，降低腰椎功能障碍程度和提高日常生活能力，缩短康复周期，具有临床应...     

多源证据体在中医药循证临床实践指南中的整合运用

临床实践指南在指南整体、临床问题、推荐意见影响因素及干预方案操作细节不同层面有不同的证据体概况。针对目前证据不足的困境，本文提出中医药临床实践指南多源证据体的构建。多源证据包括研究证据、古籍证据、专家经验性证据、专家意见和研究建议。多源证据体在应用时需要充分考虑证据来源多样性、推荐意见影响因素及干预方案操作细节多维性、证据组合辩证性及证据运用多阶段性。多源证据体的理念和方法可以在指南制订主要阶段如临床问题构建、推荐意见形成等进行整合运用。