临床分离菌对19种常用抗菌药物的耐药性监测

考察本院1994年5月至1995年4月从临床标本中分离的854株病原菌．前5位排列依次为铜绿假单胞菌、凝固酶阴性葡萄球菌、大肠杆菌、克雷伯氏菌属、金葡球菌、检测它们对19种常用抗菌药物的耐药性及是否含β-内酰胺酶，结果显示多数细菌对亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星、阿米卡星的耐药性在10％以下，耐甲氧西林葡萄球菌对绝大多数抗菌药物耐药性在50％以上。定期系统的耐药性监测对监床用药有重要指导意义。     

产质粒介导Ⅰ型头孢菌素酶细菌的耐药性及基因型研究

目的 了解华南地区产β内酰胺酶中质粒介导的Ⅰ型头孢菌素(AmpC)酶细菌的耐药性及其基因型特征。方法 收集革兰阴性菌临床分离无重复菌株共1187株，采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶，Kirby-Bauer琼脂扩散法检测耐药性；质粒结合试验，聚合酶链反应(PCR)通用引物扩增各组基因及测序以确定AmpC酶基因型。结果 革兰阴性菌头孢西丁三维试验阳性率为5．9％(70／1187)，其中质粒介导的AmpC β内酰胺酶的检出率为大肠杆菌4．2％(19／451)，克雷伯菌属4．7％(16／339)，肠杆菌属2．1％(4／190)，产碱杆菌属5．3％(1／19)，不动杆菌属2．2％(1／45)，总检出率为3．5％(41／1187)。药敏显示结合子对头霉素和氨苄西林耐药，对头孢吡肟和亚胺培南敏感。PCR扩增和测序结果证实为blaDHA-1基因和blaACT-1。基因，主要分布于克雷伯菌属和大肠杆菌属。结论 华南地区质粒介导AmpC酶的基因型以DHA-1和ACT-1为主。第四代头孢菌素和碳青霉烯类药物可作为治疗产质粒介导的AmpC酶细菌感染的有效药物。     

主动外排系统在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多重耐药中的作用

目的分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）主动外排基因（qacB、qacJ、smr），探讨其在MRSA多重耐药中的作用。方法采用计算机引物设计软件（Primer Premier 5．0）设计外排泵基因（qacB、qacJ、smr）引物，用PCR和电泳分析方法检测124株MRSA主动外排基因；用利血平进行MRSA协同抑制试验，观察其对利福平和左旋氧氟沙星药敏性的变化。结果124株MRSA中检出外排泵qacB基因86株，检出率为69．4％；qacJ基因45株，检出率为36．3％；smr基因32株，检出率为25．8％。利血平抑制实验结果显示MRSA对左旋氧氟沙星和利福平的最低抑菌浓度值下降2～32倍，表明其耐药性降低。结论MESA存在qacB、qacJ、smr等多种主动外排系统，在其多重耐药中起重要作用。     

质粒介导的克雷伯菌耐喹诺酮类药物机制研究

目的了解华南地区qnr基因介导的克雷伯菌耐喹诺酮类药物的情况并研究其耐药机制。方法收集临床分离的克雷伯菌株共200株，其中产酸克雷伯菌6株。PCR方法筛查基因，琼脂稀释法测MIC，质粒结合试验，聚合酶链反应（PCR）通用引物扩增各组基因及测序。结果200株细菌中筛查到带qnr基因的菌株共2株（其中产酸克雷伯菌1株），均对环丙沙星敏感。进一步确证实验中证实2菌株都含qnr基因。2菌株经结合实验后在选择平板上都有菌生长，而且对环丙沙星的MIC值均有30倍以上的的提高。2株菌均有gyrA Ser83→Tyr突变，产酸克雷伯菌株有parC Ser80→Ile突变。2株菌质粒PCR扩增的qnr产物测序结果与NCBI中qnr基因比对吻合率达100％。结论华南地区已有质粒介导的耐喹诺酮类菌株存在，它们能够跨种属转移，值得临床医生重视。     

抗菌药物诱导大肠杆菌内毒素释放的研究

目的：探讨不同类型的抗菌药物释放细菌内毒素潜能和速率的不同。方法：选择５ 种不同类型抗菌药物单独或联合作用于大肠杆菌，比较４ ｈ 期间游离内毒素，同时作菌落计数和细菌形态学检查。结果：亚胺培南西司他丁杀菌作用和释放内毒素最快，但释放内毒素量较少；头孢他啶释放内毒素较快，量较多；环丙沙星释放缓慢，量中等；阿米卡星释放缓慢，量最小；头孢曲松致细菌丝状体形成，杀菌并释放内毒素最慢但量最大；阿米卡星和头孢曲松联合用药有协同抗菌作用，且明显减少头孢曲松释放内毒素的量，与单独使用阿米卡星释放内毒素的量近似。结论：不同类型抗菌药物诱导细菌内毒素释放的量和速率不同。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞表现HLA-DR的表达

目的 了解肺癌患者肺泡巨噬细胞表面人白细胞抗原-DR(HLA-DR)的表达。方法 经支气管肺泡灌洗获肺泡巨噬细胞，贴壁分离及培养，免疫组化方法检测HLA-DR表达的阳性细胞百分率。结果 ① 肺癌及良性肺病患者，其肺泡巨噬细胞未经刺激，均已有部分表达HLA-DR，但前者明显高于后者；② 干扰素-α(IFN-α)或脂多糖(LPS)刺激后，HLA-DR的表达均增加，且两者联合刺激优于单独刺激；③ 无论刺激与否，肺癌组荷瘤侧肺与非荷瘤侧肺比较，肺泡巨噬细胞表达HLA-DR的阳性细胞率明显增高。结论 肺癌患者，尤其是肿瘤局部，肺泡巨噬细胞可能通过表达HLA-DR提高抗原递呈功能。IFN-α、LPS均能明显增强肺癌患者肺泡巨噬细胞的抗原提呈功能，且两者有协同作用。     

超广谱β—内酰胺酶分子生物学基础的研究进展

革兰氏阴性杆菌产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)是导致临床致病菌对新型广谱抗生素产生耐药性的重要机制之一。采用系统进化树的分析方法，对ESBLs的氨基酸残基进行排序比较可进一步细分为5个以上的亚群，同一亚群ESBLs的功能特征具有较大的相似性。ESBLs的产生机制可能涉及两个方面：其一为基因转移，ESBLs的编码基因主要位于质粒DNA序列中，由耐药基因和调控序列共同组成，此抗性基因盒可以通过转座子（Tn)或整合子（Int)及某些未知的转移机制在质粒间、质粒与染色体间乃至同种或不同种属的革兰氏阴性菌间迁移扩散；其二为基因变异，某些窄谱β－内酰胺酶可以通过侧翼调控序列或耐药结构基因的突变，使其产酶效能得到大幅提高或使底物轮廓范围扩大，从而衍化为对多种氧亚胺基β－内酰胺类抗生素具有催化水解效能的超广谱β-内酰胺酶。     

头孢菌素类抗生素的合理应用研讨会会议纪要

2000年11月10日由《当代医学》杂志社邀请广东地区30多位医学专家在广州市白天鹅宾馆,由锺南山院士主持进行了头孢菌素类抗生素合理应用的研讨会,会上5位专家从不     

rhG-CSF 和氟康唑联合应用对粒细胞减少小鼠念珠菌肺感染的疗效

为了研究人类重组粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对中性粒细胞减少小鼠白色念珠菌肺感染的预防和治疗作用，腹腔注射环磷酰胺的小鼠被分成４组：①对照组，气管内注射白色念珠菌；②感染前皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ；③感染后１２ｈ腹腔注射氟康唑；④ｒｈＧ－ＣＳＦ和氟康唑联合应用。结果显示注射白色念珠菌前４ｄ，皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ１００μｇｋｇ－１ｄ－１对中性粒细胞减少合并白色念珠菌肺感染小鼠有明显的保护作用；白色念珠菌感染后２４ｈ，肺内中性粒细胞数较对照组明显增多；ｒｈＧ－ＣＳＦ和氟康唑联合应用较单独应用疗效好。