儿茶酚胺类神经递质检测技术及其研究进展

儿茶酚胺 (ｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｓ ,ＣＡｓ)包括肾上腺素 (ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎａ ｄｒｅｎａｌｉｎ ,Ｅ)、去甲肾上腺素 (ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｎｏｒａｄｒｅｎａｌｉｎ ,ＮＥ)和多巴胺 (ｄｏｐａｍｉｎ ,ＤＡ) ,在人体内由肾上腺髓质和一些交感神经元嗜铬细胞     

嗜铬细胞瘤误诊为慢性肾炎1例

患者女,12岁。以头晕、胸闷、心悸、气促、浮肿5天为主诉,入院。体检:P180次/分,R40次/分,BP20/16kPa。呼吸急促,鼻翼扇动。心尖搏动位于胸骨左缘第五肋间锁骨中线外1cm,搏动弥散有抬举感,心律齐。HR180次/分。双下肢轻度凹陷性水肿。尿常规:蛋白++++,红细胞++。血尿素氮、肌酐正常。胸片示左室肥大。心电图示左室肥大加劳损。按慢生肾炎伴高血压心衰予强心、利尿、降压治疗,无明显好转。进一步行酚妥拉明试验阳性,B型超声波左肾上腺区探及5.3×3.7cm肿物。诊断:嗜铬细胞瘤(左肾上腺)。经疏甲丙脯酸控制血压至正常,复查尿     

一艘外籍轮船发现艾滋病和梅毒患者的处理报告

1疫情发现2006年8月28日,烟台出入境检验检疫局(以下简称烟台局)检疫人员在对来自马来西亚的外籍货轮进行入境检疫查验时,发现1名印度尼西亚籍船员出现高热、呕吐,颈部淋巴结肿大,右上腹有压痛。该船员自述2个月来反复发热,药物治疗效果不明显。初步怀疑其为HIV感染,由烟台国际旅行卫生保健中心艾滋病初筛实验室对其进行艾滋病初筛为阳性,并经山东国际旅行卫生保健中心艾滋病确认实验室确认HIV抗体阳性,随后烟台局组织对同船其他21名船员进行艾滋病性病监测,发现1名船员梅毒阳性。     

嗜肺军团菌lvgA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

本实验采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增得到军团菌毒力基因(L eg ionellav iru lence gene,lvg A gene),并将其定向连接入克隆载体pUC 18,构建重组质粒pU lvgA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,再将lvgA基因亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pG lvgA,转化宿主菌JM 109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印记分析鉴定。实验结果表明,成功扩增出627 bp的lvgA基因,构建了重组质粒pU lvgA及原核表达重组质粒pG lvgA,并使53.7 KD a的G ST-lvgA融合蛋白质在原核系统中得到了有效的表达。     

香草醛-磷酸体系荧光分光光度法测定黄芪甲甙

建立香草醛 磷酸体系荧光分光光度法测定黄芪甲甙的方法。方法 :利用在磷酸条件下香草醛与黄芪甲甙的荧光反应测定黄芪甲甙。结果 :黄芪甲甙与香草醛的反应产物的最大激发波长Ex =36 5nm ,最大发射波长Em =430nm。黄芪甲甙在 0 .0～ 2 0 .0mg·L-1范围呈良好的线性关系 ,最低检测限为 0 .10 6mg·L-1,测定样品的回收率为 95 .97%～ 10 2 .1%。结论 :本方法具有灵敏度高、检测限低、直接测定无干扰等优点。测定黄芪口服液、中药复方补阳还五汤及含药猪血清等多种类型样品中的黄芪甲甙含量 ,结果满意。     

PCR介导嗜肺军团菌疫苗候选基因lvgA和Hsp60的融合及其在大肠杆菌中表达的初步研究

目的采用PCR法进行嗜肺军团菌lvgA和Hsp60二基因的拼接融合，克隆并检测该融合基因在原核系统中表达情况．为进一步研究其免疫性能作必要的准备。方法采用重组聚合酶链反应，设计引物首先分别从嗜肺军团菌基因组DNA中扩得待融合端互补的军团菌毒力基因（lvgA）和热休克蛋白60基因（Hsp60），经琼脂糖电泳纯化回收，再以适量lvgA和Hsp60为模板变性、退火、重叠延伸，实现二基因的PCR水平融合，随后采用外引物进行新一轮扩增，扩得足量lvgA／Hsp60融合基因的PCR产物，继而将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，构建原核表达重组质粒，转化宿主菌BL21，经PCR、酶切及测序鉴定后，IPTG诱导表达，产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析等鉴定。结果扩增出了约2292bp的lvgA／Hsp60融合基因，构建了原核表达重组质粒pGlvgA／Hsp60，并检测到M约117000的GST-lvgA-Hsp60融合蛋白表达条带。结论采用PCR法实现了嗜肺军团菌lvgA和Hsp60二基因的融合，构建了其原核表达重组质粒．并使该融合蛋白在原核系统中得到了有效的表达，为进一步研究该融合基因的免疫学特性奠定了基础．     

嗜肺军团菌热休克蛋白60基因在大肠杆菌中的表达

目的 探讨大肠杆菌中表达嗜肺军团菌的热休克蛋白60（HSP60）的表达。方法 利用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增嗜肺军团菌HSP60基因，将其定向插入载体pUC18构建重组原核表达质粒，重组质粒转化到大肠杆菌JM109后IPTG诱导表达。并对其表达产物进行SDS-PAGE和Westem-blotting分析。结果 重组质粒在大肠杆菌中成功表达，可被抗军团菌抗血清识别。结论 HSP60基因可在大肠杆菌中表达。并有免疫原性。     

诺沃克病毒流行现状及预防措施

诺沃克病毒是一种分布很广泛的,可导致成人和儿童的急性腹泻的病毒,是除轮状病毒外引起腹泻的最主要的病毒病原,与食物、水源等的污染造成的急性胃肠炎爆发密切相关.为此,就诺沃克病毒的病原学、流行病学、临床表现、诊断治疗和预防等方面做一综述.     

中药补益类方药治疗肌萎缩侧索硬化症的Meta分析

目的:系统评价中药补益类方药用于治疗肌萎缩侧索硬化(ALS)的疗效及安全性。方法:以"肌萎缩侧索硬化,运动神经元病(MND),中药,中草药,中医,Drugs,Chinese Herbal"为检索词在多个外文网站包括Pubmed,EMBASE医药数据库,Cochrane图书馆,CBM等,以及中文数据库例如CNKI,维普中文科技期刊数据库,万方医学数据平台中进行全面检索,主要检索关于中药治疗ALS的相关随机对照研究,检索时间从建库到2014年12月31日,语言不限。应用Revman Manager 5.2软件进行Meta分析。结果:共筛选出符合纳入条件的随机对照研究7项,涉及病例411例,其中治疗组257例,对照组154例。Meta分析结果显示:治疗组给予补益类方药(不限剂型)进行治疗,在症状改善方面优于对照组[RR=1.42,95%CI(1.11,3.38)];治疗组Norris评分降低的幅度小于对照组,应用补益类方药控制ALS疾病较西药组好,使疾病进展更缓慢[MD=2.1,95%CI(0.65,3.54)];补益类方药在改善ALS患者中医痿证证候方面效果明显优于西药组[MD=3.29,95%CI(1.57,5.01)];差异均有统计学意义。本文所纳入研究有3项研究从胃肠道症状及肝肾功能角度对用药安全性进行评价,结果均未出现严重不良反应。结论:目前有限的证据表明补益类中药具有延缓ALS疾病发展的作用,在延缓疾病进程方面优于西药利鲁唑,但不能显著改善症状及根治肌萎缩侧索硬化。中药相比西药具有价格低廉,保存方便的优点,可以减轻患者的经济负担。但由于本研究所纳入的文献质量总体不高,影响了本研究的可靠性,还有待于进一步大规模高质量的临床研究。     

引入CpG基序的嗜肺军团菌lvgA基因真核表达质粒的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

目的构建了引入CpG基序的lvgA基因的真核表达质粒pclvgA/CpG,并在NIH3T3细胞中表达。方法采用PCR方法将特定CpG基序作为核酸佐剂构建于嗜肺军团菌lvgA基因侧翼,定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(+),构建重组质粒pclvgA/CpG,体外阳离子脂质体转染法转染NIH3T3细胞。结果通过测序证实真核表达质粒pclvgA/CpG中lvgA/CpG克隆片段长为657bp,推测lvgA基因编码蛋白大小约为27.7Ku,lvgA基因及两侧翼原设计CpG基序完整扩出,测序序列与设计序列完全符合。用免疫荧光检测重组质粒在NIH3T3细胞中瞬时表达。结论本实验成功构建了嗜肺军团菌pclvgA/CpG真核表达质粒,并在NIH3T3细胞检测到其瞬时表达信号。