乙型肝炎病毒C区G87变异对HBeAg分泌的影响

研究ＨＢＶ/Ｃ区Ｇ87变异 (Ｃ区第 87位丝氨酸ＡＧＣ 甘氨酸ＧＧＣ)对ＨＢｅＡｇ分泌的影响。构建ＨＢＶ前Ｃ/Ｃ基因ＥＢ病毒表达载体 ,利用酶切位点消除法构建ＨＢＶ/Ｃ区Ｇ87突变体 ,并转染ＨｅｐＧ2细胞 ;采用ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法探讨变异株和野生株宿主细胞上清ＨＢｅＡｇ分泌情况。最后构建了重组野生株和变异株真核细胞表达载体 ,并在ＨｅｐＧ2细胞表达ＨＢｅＡｇ。ＥＬＩＳＡ结果显示 ,变异株宿主细胞上清ＨＢｅＡｇＡ值在接种 2 4、4 8、72、96和 12 0ｈ明显低于野生株 (Ｐ <0 .0 0 1) ;ＳＤＳ ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒ…     

慢性乙型肝炎患者PBMC的IFN-γ和IL-10生成量及其与若干临床指标的关系

本文通过检测慢性乙型肝炎 (CHB )患者外周血单个核细胞 (PBMC )培养上清中IFN γ、IL 10含量 ,以探讨病毒定量、肝脏炎症病变程度及是否存在HBeAg等因素与细胞因子生成量之间的关系。取CHB患者和健康对照者PBMC ,分别加入特异性刺激剂rHBcAg和非特异刺激剂PHA ,培养 72h后收集上清 ,采用双抗体夹心法检测IL 10和IFN γ。结果表明rHBcAg刺激CHB患者生成的IFN γ与正常对照组无明显差异 ,IL 10较正常对照组高 (P <0 0 1)。病毒量明显影响IFN γ和IL 10的产生 ,IL 10的生成在高病毒量组较高 ,而IFN γ与此相反。按肝脏炎症活动程度分组发现 ,G4、G3组IL 10明显低于G1、G2组 ,但rHBcAg刺激产生的IFN γ在各组间无明显差异。HBeAg ( + )组较HBeAg ( )组生成的IL 10高 ,而IFN γ低。高病毒量、HBeAg抑制CHB患者IFN γ生成 ,而IL 10的生成相对增加 ,肝功能损害程度与IL 10明显负相关。     

1023例病毒性肝炎临床与病理诊断分析

探讨病毒性肝炎临床与病理诊断的符合率。将1023例病毒性肝炎临床与病理资料输入计算机,用SPSS8.0统计软件进行相关分析。各型肝炎临宋与病理诊断总符合率76．9％,诊断符合率依次为慢性肝炎重度组(CHs)81．9％,慢性肝炎轻中度组(CHL～m)81．4％,活动性肝硬变(ALC)52％,静止性肝硬变(LC)50％,急性重型肝炎(ASH)50％,急性肝炎(AH)38．6％,慢性重症肝炎(CSH)35．7％,亚急性重症肝炎(SSH)0％。临床与病理结合,有助于提高病毒性肝炎的诊断准确率。     

慢性乙型肝炎干扰素治疗后长期随访中复发与相关因素的研究

目的 观察和分析慢性乙型病毒性肝炎(CHB)经重组α干扰素(rIFN-α)治疗取得完全应答后,在长期随访过程中的复发情况,及其影响复发的相关因素.方法 523例经肝穿刺活检证实的CHB患者,给予rIFN-α 1 b治疗,疗程6～25个月,治疗中每1～3个月检测肝功能、HBVDNA、乙肝病毒e抗原(HBeAg).治疗后随访至少12个月,随访时每3～6个月检查肝功能、HBVDNA、HBsAg及HBeAg.结果 523例患者经rIFN-α治疗后,近期应答302例(57.7%).近期应答者经随访39.2±21.5个月,持续应答183例(35.0%),复发119例(39.4%).患者年龄、治疗前HBeAg状态、以及随访时间是影响复发的相关因素:复发组平均年龄(34.27±8.69岁)显著高于持续应答组的平均年龄(25.28±8.65)岁(P＜0.001);HBeAg( )组复发率76/225例(33.8%)显著低于HBeAg(-)组43/77例(55.8%)(P＜0.001);按随访每12个月为一时间段,分1～12个月、13～24个月、25～36个月、37～48个月、49～60个月和≥61个月6个时间段,各时间段复发的发生率有显著性差异(P＜0.001),累计复发率亦有显著性差异(P＜0.001),但25个月以后的4个时间段累计复发率差异无显著性(P=0.670).患者性别、治疗前ALT水平和HBVDNA水平、肝组织炎症活动度(G)、肝纤维化程度(S)及治疗疗程与复发无明显相关性,但在HBeAg( )组中,复发组的平均基线HBV DNA水平6.98±1.14 Log拷贝/ml高于持续应答组6.21±1.04 Log拷贝/ml(P=0.017).结论 CHB患者经rIFN-α治疗后,患者年龄、治疗前HBeAg状态以及随访时间是影响其在随访过程中复发的相关因素.在HBeAg( )CHB中,治疗前HBV DNA水平亦是影响复发的相关因素.     

定点诱变HBcAg质粒在人永生化B淋巴母细胞系中的稳定表达

目的:构建携带V60, G87, L97突变位点的HBV全基因组真核细胞表达载体,转染慢性HBV感染者永生化B淋巴母细胞系(LCL),建立相同HLA背景下的慢性HBV感染CTL应答的刺激细胞和靶细胞.方法:用定点突变技术在HBVp3.8Ⅱ质粒C基因区3个氨基酸V60, G87, L97位置进行突变(p3.8Ⅱ- V60, G87, L97),转化E. coli XL1-Blue感受态细胞扩增筛选,用限制性内切酶SacⅠ和KpnⅠ分别将野生型和突变型p3.8Ⅱ质粒进行双酶切, 插入EBO-plpp真核细胞表达载体,转染LCL,潮霉素稳定筛选后,鉴定目的基因在转染细胞是能够稳定表达.结果:DNA序列分析表明,野型HBV DNA核心区第60, 87, 97位氨基酸发生了预期的突变,Western Blot和微粒子免疫荧光法证明,转染的LCL能稳定表达HBV 抗原.结论:定点诱变HBcAg质粒在人永生化B淋巴母细胞系中可稳定表达.     

原发性肝癌患者血清HBV一DNA及前C／C区变异的检测

对３１例原发性肝癌患者血清进行巢式聚合酶链反应扩增ＨＢＶ一ＤＮＡ，并对限阳性者之Ｃ基因前Ｃ区终２８、Ｃ区Ｌ９７位点进行限制性酶切片段长度多态性分析，同时与无症状ＨＢＶ携带者９例、慢性活动性乙型肝炎１４例对照。结果显示：３１例肝癌患者中１１例ＨＢＶ一ＤＮＡ阳性，其中终２８变异２例，Ｌ９７变异５例。研究认为一部分肝癌患者不仅存在病毒复制，且与对照组一样有变异毒株存在。     

在慢性无症状乙肝病毒感染者中检测各类核心抗体的意义

总抗-HBc均阳性的慢性无症状乙肝病毒感染者108例,在肝活检的同时,作了血清学检测。结果表明:在血清HBV DNA阴性和肝内HBcAg阴性病例中,与阳性病例相比IgA与IgM抗-HBc检出率较高,但相差不显著;总抗-HBc滴度在肝HBcAg阴性病例中显著增高.总抗-HBc滴度与肝组织炎症活动程度平行,但相差不显著;IgA与IgM抗-HBc检出率则与之密切相关,在IgA与IgM抗-HBc阳性的病例中,肝组织常有肝炎病变。     

慢性乙型肝炎病毒感染者血清前S_2蛋白和聚合人血清白蛋白结合活性的对比研究

以合成的前S2肽免疫兔获得抗血清。分别以抗前S2抗体和聚合人血清白蛋白作试剂,用固相放免法检测前S2和聚合人血清白蛋白结合活性。在甲型肝炎和HBsAg(-)的各类慢性肝病病人中均未检出。在经肝活检诊断的慢性乙型活动性肝炎,两者的检出率在病情增重期显著高于缓解期,并高于肝组织正常的无症状HBV携带者。在HBeAg(+)组中两者的检出率均显著高于抗HBe(+)组。在上述检测中,聚合人血清白蛋白结合活性与前S2并不相同,后者的检出率仅为前者的56.7％。     

前S抗体与乙型肝炎病毒清除及临床预后的关系

为了探讨前S1和前S2抗体的临床意义,我们应用前S1和前S2合成肽建立的一种酶免疫技术检测104例急慢性HBV感染者的血清。前S1和前S2抗体的检出率在18例急性乙型肝炎中为100.0％和66.7％,在50例无症状HBV携带者中为30.0％和24.0％,在36例慢性活动型肝炎中为47.2％和19.4％,在无症状HBV携带者和慢性活动型肝炎中前S抗体检出率在无病毒复制时高于病毒活跃复制期。结果提示:在急性HBV感染者中前S抗体较抗HBs更早出现,可能是疾病早期预后状况和感染恢复的标志,慢性HBV感染者中前S抗体不仅存在,且可反映病毒清除。     

Investigation of sporadic hepatitis E in Guangzhou City

To identify the etiology of non-A,non-B,non-C hepatitis,23 such patients succes-sively admitted in our hospital during 1988～1992 were investigated using an enzyme immunoas-say kit with two recombinant hepatitis E virus(HEV)antigens from Genelabs(Redwood City,CA.USA).Anti-HEV-IgG was detected in 18 cases of them.The disease was diagnosed as hep-atitis E.All 18 patients were Guangzhou residents.This is one of the first reports on the pres-ence of sporadic hepatitis E in a metropolis beyond the endemic areas.The present observationshowed that sporadic hepatitis E occurred out of season and was unlike the epidemic form in Xin-jiang.Fifteen of 18 patients aged from 20 to 50 years,suggesting that it usually prevailed amongthe young-to-middle-aged adults.The ratio of male to female was 14 to 4.The ratio of icterictype to anicteric type was 16 to 2.The jaundice of 16 icteric patients disappeared in 24.6 days(range,14～60 days).The average alanine aminotransferase level was 806 IU/L(range,74～1676 IU/L),which declined to normal in 30.4 days(range,19～77 days).All patients recov-ered completely in 4.7 weeks.This report also indicated that the course of sporadic hepatitis E,as of epidemic form,is self-limiting and has no chronic sequelae.