自在昆明召开的全国小儿血液研究学术会议(第七次、1995)──一、特发性血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的初步研究

自在昆明召开的全国小儿血液研究学术会议（第七次、１９９５）──一、特发性血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的初步研究张广民，王明丽，俞发舟，史百芬，李京培安徽医科大学附属医院特发性血小板减少此紫癜（ＩＴＰ）是儿科常见的出血疾病之一，而受人巨细胞病毒（...     

庚型肝炎病毒感染与肝损伤的相关性

目的 探讨ＨＧＶ感染与肝损伤的关系。方法 检测４４２例各类肝病患者的甲￣戊和庚型肝炎病毒血清学标志,其中１５４例为ＨＧＶ和ＨＢＶ感染者,对单独ＨＧＶ感染、ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感主单独 者的临床资料进行对比分析。结果 ２１单独ＨＧＶ感染者中有９例（４２．８６％）肝功能轻度异常。单独ＨＧＶ感染与ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染比较,肝功能异常程度无显著性差异;而重叠感民单独ＨＢＶ感染比较,肝功能异常率和重型肝炎发     

药学研究：施普善体外对HSV-1感染新生乳鼠脑神经细胞保护作用研究

单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染人体后可侵犯中枢神经系统，危及生命；幸存多数会留下严重的中枢神经系统后遗症。施普善是动物脑蛋白质经人工控制的酶解而产生的器官特异性氨基酸、肽类复合物。由于其85％为氨基酸，且其氨基酸比例与正常脑组织中含量相近，故仍保持其器官特异的“氨基酸型”。已有许多献报道，施普善具有对中毒、缺O2、迷走刺激的保护作用、低血糖昏迷时的唤醒作用和对脑细胞成熟的促进作用。     

先天性人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质钙调素基因mRNA的研究

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抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及其鉴定

目的制备抗呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的单克隆抗体，并对其特性进行系统地鉴定。方法以活的ＲＳＶＬｏｎｇ株滴鼻（ＴＣＩＤ５０为１×１０－６，取１００ＴＣＩＤ５００１２５ｍｌ进行）加ＲＳＶ感染Ｈｅｐ２细胞（ＣＰＥ达～）腹腔注射免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，用细胞融合技术制备能稳定分泌抗ＲＳＶ的单克隆抗体细胞株。结果细胞融合一次成功，融合率为９６％，抗ＲＳＶ抗体阳性孔率为６５％。鉴定１株杂交瘤细胞Ｆ３株，染色体数为９８条，抗体亚类属ＩｇＧ１，对ＲＳＶ抗原特异；在无补体存在的情况下其腹水抗体中和效价为１∶１２８，且具融合抑制活性，腹水融合抑制效价为１∶６４。结论Ｆ３株单克隆抗体为抗ＲＳＶＦ蛋白的ＭｃＡｂ。     

胶原海绵与兔软骨细胞体外三维培养的实验研究

目的 观察用人胎盘Ⅰ型胶原海绵作为兔软骨细胞体外三维培养支架时，软骨细胞形态学特征和功能及该支架的吸附性和组织相容性。方法 将新生兔原代和传代软骨细胞接种于人胎盘Ⅰ型胶原海绵进行体外培养，用光镜和扫描电镜观察细胞形态和结构及支架的吸附性和组织相容性，用免疫组化观察细胞Ⅱ型胶原合成。结果 以胶原海绵作为支架的传代软骨细胞能维持其形态学特征及细胞功能，该支架有较好的吸附性和组织相容性。结论 人胎盘Ⅰ型胶原海绵可作为软骨细胞体外三维培养较好的支架材料。     

泼尼松、苯那普利对阿霉素肾病大鼠podocin mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察阿霉素肾病大鼠肾小球上皮细胞足突蛋白podocinmRNA和蛋白的表达及泼尼松、苯那普利对此表达的影响,探讨podocin分子在蛋白尿发生中的可能作用。方法:SD雄性大鼠,随机分4组进行观察:正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组。肾病泼尼松治疗组与肾病苯那普利治疗组每日分别予泼尼松10mg/kg、苯那普利3mg/kg灌胃,共4周;实验4周时留24h尿蛋白定量及血生化,取肾脏皮质抽提总RNA和总蛋白,分别应用半定量RT-PCR和Westernblot测定podocinmRNA和蛋白质的表达。结果:正常对照组大鼠podocin蛋白表达的相对量是5.26±1.19,而肾病对照组大鼠podocin蛋白基本不表达,泼尼松、苯那普利可增加podocin蛋白的表达;正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组podocin分子mRNA的相对值分别为0.99±0.21、1.96±0.98、1.31±0.24、2.46±1.49,肾病对照组大鼠podocinmRNA的表达与正常对照组相比显著上调(P<0.05)。结论:podocin蛋白表达的减少可能是阿霉素肾病大鼠蛋白尿产生的...     

成纤维细胞分泌胶原蛋白与5-氟尿嘧啶的时间抑制效应

目的:观察5-氟尿嘧啶干预体外培养病理性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的作用及其时效关系。方法:实验于2005-05/2006-06在安徽医科大学微生物教研室完成。①原代细胞培养成纤维细胞:手术取4例增生性瘢痕、4例瘢痕疙瘩、4例正常皮肤组织,按文献方法进行成纤维细胞原代培养,待细胞融合后传代。②取4～6代传代细胞接种于96孔板,利用四唑盐比色法测定25g/L浓度5-氟尿嘧啶干预不同时间(1,2,5,10,15,30min)后3种体外培养成纤维细胞的增殖能力,统计得出最佳时效。③利用3H-脯氨酸掺入法检测经5-氟尿嘧啶干预不同时间后成纤维细胞的胶原蛋白分泌能力。结果:①原代培养成纤维细胞全部成活,形态良好,经5-氟尿嘧啶干预后细胞形态未发生明显变化。②四甲基偶氮唑盐法测3种不同来源成纤维细胞未干预时增殖能力,瘢痕疙瘩成纤维细胞>正常皮肤成纤维细胞(t=3.542,P<0.01),增生性瘢痕成纤维细胞>正常皮肤成纤维细胞(t=3.257,P<0.01);5-氟尿嘧啶干预成纤维细胞10min与5min比较,其对成纤维细胞的抑制效果增高(正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩3种成纤维细胞10minA值依次为0.389±0.027,0.418±0.051,0.554±0.021;5minA值依次为0.537±0.033,0.589±0.074,0.783±0.015,q=3.80～4.18,P<0.05),与30min比较,差异无显著性。③干预10min3H-脯氨酸掺入量与空白对照组比较明显下降,差异有显著性(q=3.82～3.96,P<0.05),与5min干预组比较,差异均有显著性(q=3.96～4.14,P<0.05),与30min比较,差异无统计学意义。结论:5-氟尿嘧啶可有效抑制病理性瘢痕及正常皮肤来源的成纤维细胞体外增殖和胶原合成,干预10min时效应最佳。     

剖宫产娩头困难46例处理体会

剖宫产术中，因胎头深嵌于骨盆或高浮于子宫切口以上造成娩头困难时，如处理不当，可引起子宫切口撕裂、血管损伤、输尿管损伤、新生儿窒息及死亡等情况，对母婴的危害很大。我院2003年1月～2008年1月发生胎头娩出困难46例，处理较好，现总结如下。     

胚胎和新生大鼠神经干细胞培养与分化的特性比较

目的:比较胚胎和新生大鼠神经干细胞的体外培养与诱导分化特性,为脊髓损伤、神经再生等疾病的治疗提供参考依据。方法:实验于2004-11/2005-05在安徽医科大学微生物学实验室完成。选取清洁级孕12d的SD大鼠和新生1d的SD大鼠各1只。①分别将胚胎鼠和新生鼠的大脑皮质体外分离培养,每3天换液1/2,每7d传代1次。②选取第3代神经干细胞克隆球吹打成单细胞悬液接种于预先涂有多聚赖氨酸的盖玻片的12孔培养板中,补足神经干细胞分化培养基,继续培养7d,进行神经干细胞的诱导分化。③通过形态学观察和Nestin免疫细胞化学鉴定,以及5-溴脱氧尿核苷法检测神经干细胞的增殖能力,并检测分化成熟的神经细胞标志抗原MAP2、胶质纤维酸性蛋白抗原的阳性细胞数及细胞总数。结果:①胚胎鼠与新生鼠原代、传代、分化培养的细胞形态学观察结果:胚胎鼠形成的神经球数量和每个神经球所含细胞数均多于新生鼠。胚胎鼠与新生鼠培养的球形克隆均可连续传代获得大量亚克隆细胞,并诱导分化成3种主要形态的神经细胞。②神经干细胞的鉴定结果:原代和传代的细胞均呈神经干细胞标志性蛋白-Nestin阳性反应,结合悬浮培养有神经球形成的现象,证明所观察细胞为神经干细胞。③胚胎鼠与新生鼠不同时间段单位面积Nestin与5-溴脱氧尿核苷阳性细胞数、细胞总数、阳性率的比较:两组培养1,3,7,11,14,28d后单位面积Nestin与5-溴脱氧尿核苷阳性细胞数、细胞总数及阳性率均有显著差异(t=2.41～92.71,P<0.01或0.05)。④胚胎鼠与新生鼠神经干细胞分化指标的测定:胚胎鼠及新生鼠的MAP2阳性细胞分别为(32.6±5.6)%,(30.7±6.7)%,抗原胶质纤维酸性蛋白阳性细胞分别为(47.5±9.4)%,(50.3±8.9)%,P均>0.05。结论:从胚胎鼠和新生鼠的大脑皮质均能够成功分离培养出神经干细胞,表达神经干细胞特异性标志蛋白Nestin,并具有自我更新及体外扩增传代能力。胚胎鼠神经干细胞数量多且增殖能力强,更适合用于神经再生与修复的临床治疗。