电磁辐射致海马损伤的比较蛋白质组学研究

目的研究三种不同频率电磁波辐照后海马组织蛋白质表达谱的差异。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)—质谱鉴定—生物信息学分析的比较蛋白质组学方法研究辐照后6 h海马组织总蛋白的差异,通过W estern blot和RT-PCR技术分别在蛋白和基因水平对差异蛋白质进一步检测验证。结果三种电磁辐射致海马蛋白质表达谱的变化基本相似。经图像分析共筛选到45个差异蛋白点,其中26个差异蛋白点得到了初步鉴定。对于信号转导相关差异蛋白raf激酶抑制蛋白(RKIP),W estern blot和RT-PCR进一步验证了2-DE结果。辐照后6 h RKIP蛋白及其mRNA表达均明显下调,各照射组未见明显差异。结论三种电磁辐射对海马的致伤机制具有相似性,其损伤程度呈频率依赖性。RKIP可能在辐射致海马损伤中发挥重要作用。     

微波辐射对大鼠睾丸闭锁蛋白和连接黏附分子-1表达的影响

目的:探讨微波辐射后大鼠血睾屏障紧密连接闭锁蛋白(occludin)及连接黏附分子-1(JAM-1)表达的改变及意义。方法:80只雄性Wistar大鼠经平均功率密度为0、10、30、100mW/cm2微波辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用Western印迹和图像分析技术检测闭锁蛋白和JAM-1蛋白表达的动态变化。结果:10、30和100mW/cm2微波辐射后分别在3～7d、6h～7d和6h～14d闭锁蛋白表达明显下调(P<0.05),而JAM-1蛋白分别于辐射后3～7d、1～7d和1～14d表达亦明显下调(P<0.05)。结论:闭锁蛋白及JAM-1蛋白表达减少可能在微波辐射致血睾屏障损伤中发挥重要作用。     

安多霖对微波辐射致大鼠脑损伤的预防作用研究

Objective To study the prevention effects of AduoLa Fuzhenglin(ADL)Oll the brain injury induced by microwave radiation in rats.Methods A total of 140 male Wismr rats were divided randomly into 5 groups,including control group,microwave exposed group,low dosage(0.75 g·kg-1·d-1)group.middle dosage(1.5 g·kg-1·d-1)group and high dosage(3 g·kg-1·d-1)group.Rats in three ADL groups were lavaged with ADL per day for 2 weeks before radiation.After administration,rats were exposed to microwave at 30 mW/cm2 for 15 min.The abilities of learning and memory were detected by Morris water maze,and the contents of amino acids neurotransmitter of hippocampus were detected by HPLC, then the histology and uhrastrncture of hippocampus were observed with light and electron microscope at 6 h,7 and 14 d after exposure.Results The abilities of learning and memory were declined(F=0.000-0.043,P<0.05)from 6 h to 7 d after exposure,and the contents of four kinds of amino acid neurotransmitter in hippocampus were decreased,of which GLU,GLY and GABA were decreased significantly(F=0.000-0.007,P<0.01)at 6h after exposure,then tissue edema,neuronal degeneration,neuron mitoehondria swelling and cavitation,endocytoplasmie rotieulum broaden,synaptic cleft blurred,and perivascular space widen were found in the hippocampus at 6 h and 7 d after exposure.The changes in low dosage group were similar to those of the radiation group.However,in middle and high dosage groups,the abilities of learning and memory were normal to some extent with the significant differences compared to the radiation group from 6 h to 7 d after exposure(F=0.015-0.028.P<0.05).The contents of four kinds of amino acid neurotransmitter were not decreased,especially GLU contents close tO normal level.There were significant differences between middle and high dosage groups and radiation group at 6 h after exposure(F=0.000-0.042,P<0.05).Moreover,no obvious injury in the hippocampus was observed in middle and high dosage groups at 6 h and 7 d after exposure.Conclusions Exposure to 30 mW/cm2 microwave radiation could decrease the abilities of learning and memory,induce amino acid neurotransmitter turbulence,and injure the histology and uhrastructure of hippocampus.ADL at the dosages of 1.5 and 3 g·kg-1·d-1 would have preventive effects on the injury induced by microwave exposure.The concentration of 1.5 g·kg-1 ·d-1 of ADL might be the effective dosage to prevent the brain damage after microwave exposure.     

失血复合缺氧缺水缺食诱导心肌细胞凋亡及相关机制研究

目的定量研究失血复合缺氧缺水缺食情况下心肌细胞的凋亡及其机制。方法二级WISTAR大鼠160只,随机分为正常对照、单纯失血、缺氧缺水缺食、失血复合缺氧缺水缺食4组,每组40只,其中失血模型为剪尾法制备,失血量30%;缺氧组为将动物置于常压低氧舱内,氧浓度10%。所有动物于造模后1 d、3 d、5 d、7 d活杀取材,各时间点每组均为10只,雌雄各半;采用TUNEL(原位末端标记法)法检测心肌细胞凋亡,免疫组化SP法检查心肌组织中凋亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3及核转录因子CREB的表达并进行积分光密度(IOD)和平均光密度(MOD)定量检测。结果单纯失血组、缺氧缺水缺食(三缺)组和失血并三缺组心肌细胞凋亡指数于入低氧舱1 d、3 d、5 d、7 d均显著高于正常对照组(P<0.01),其中失血并三缺组于早期较其他两组尤为明显(P<0.01);各时间点Bax和caspase-3表达均呈增强、MOD值增高趋势,其中早期失血并三缺组较失血组和三缺组更为明显(P<0.05);Bcl-2均呈表达减弱、MOD值降低趋势,尤其5 d～7 d时较明显(P<0.01);CREB于3 d、7 d呈现不同程度的表达增强(P<0.05),上述凋亡相关因子表达变化呈现失血并三缺组依次较三缺组、单纯失血组加重趋势。结论失血或三缺均导致大鼠心肌细胞凋亡指数增加,失血复合三缺可明显加重其上述变化;凋亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3和CREB均参与其损伤过程。     

失血复合缺氧缺水缺食对大鼠心脏功能和心肌结构的影响

目的 研究模拟掩埋条件下,失血复合缺氧缺水缺食大鼠心脏功能和结构的改变及其损伤特点,为深埋人员的及时救治及生命探测技术的研究提供依据.方法 二级 Wistar 大鼠160只;随机分为正常对照组、单纯失血组、缺氧缺水缺食组(三缺组)、失血复合缺氧缺水缺食组(失血并三缺组).其中失血模型为剪尾法制备,失血量30％;缺氧组为...     

微波辐射致大鼠PC12细胞损伤作用

目的 观察微波辐射后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系(PC12)细胞形态、超微结构、周期和凋亡等变化.以探讨微波辐射对其影响.方法 PC12细胞传代培养,6～7d细胞处于对数生长期后,神经生长因子(NGF)诱导7～10d,分别采用0,10,30和50mW.cm2微波辐射,于辐射后6h和1d收集细胞,利用原子力显微镜、透射电镜、流式细胞仪和激光共聚焦扫描显微镜等技术,研究PC12细胞膜、超微结构、细胞周期及细胞坏死和凋亡的变化.结果 辐射后G0-G1期细胞数增加,以30和50mW.cm2为明显,10mW.cm2组未见明显改变.30mW.cm2组PC12细胞凋亡率升高(P＜0.01),坏死率无明显改变;细胞核膜间隙增宽,染色质浓缩边集,核型不整,线粒体肿胀空化.内质网扩张;细胞膜表面粗糙.见圆形或不规则形穿孔.结论 30mW.cm2微波辐射可使PC12细胞损伤,表现为细胞周期阻滞、凋亡增加、超微结构改变及膜穿孔.     

不同波段电磁辐射对大鼠学习记忆的影响

目的对比研究三种不同波段电磁辐射对大鼠空间参考学习记忆影响。方法48只大鼠分别在人为照射X波段微波100mW/cm2、S波段微波100mW/cm2、电磁脉冲(EMP)6×104V/m照射后6h、1d、3d、5d、6d、7d、10d、14d、21d、28d、6月、12月,应用Morris水迷宫定位航行实验,采集平均逃避潜伏期(AEL)数据,检测空间学习记忆能力变化规律。结果1.各组动物均经历学习阶段(6h~3d)、短时记忆阶段(5~28d)和长时记忆阶段(6~12月);2.三种波段辐照组照后6hAEL[EMP:(50.81±11.46)s;HPM-S:(56.06±9.47)s;HPM-X:(50.94±10.03)s]较对照组[(58.00±5.78)s]明显缩短(P<0.05),1~3d呈延长趋势;3.辐照组照后4~28dAEL较对照组延长,其中5~10d最为显著(P<0.05及P<0.01);4.辐照后6月AEL[EMP:(5.19±1.51)s;HPM-S:(5.69±1.69)s;HPM-X:(5.34±1.82)s]仍较对照组[(3.97±1.09)s]显著延长(P<0.05及P<0.01);5.辐照后12月AEL[EMP(6.44±2.19)s、HPM-S(15.06±6.33)s;HPM-X(12.25±11.33)s]仍较对照组[(5.06±1.18)s]明显延长,其中两微波组较对照组差异具有非常显著性(P<0.01),同时也较EMP组显著延长(P<0.05,P<0.01)。结论三种波段辐照后空间参考学习能力、短时记忆能力和长时记忆能力均明显减弱,具有抑制和延迟效应,晚期尤为显著,微波组重于EMP组。     

重组人胸腺素β4对急性放射损伤小鼠多组织中炎症小体和凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨重组人胸腺素β4(rh-Tβ4)对急性放射损伤小鼠小肠、肺和脑组织中炎症小体和凋亡相关基因表达的影响。方法 C57BL/6N小鼠随机分为正常对照组、放射损伤模型组和模型+rh-Tβ4组。8 Gy⁶⁰Co γ射线单次全身照射小鼠制备急性放射损伤模型,模型+rh-Tβ4组于照射后24 h立即ip给予rh-Tβ4 5μg·kg^-1,每天1次,连续3 d。用放射免疫法检测小鼠小肠、肺和脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)、IL-4、IL-13和转化生长因子β(TGF-β)等炎症细胞因子含量,用炎症小体和凋亡PCR芯片分别检测各组织中炎症小体和凋亡相关差异基因,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证部分差异基因。结果 与正常对照组相比,模型组小鼠小肠、肺及脑组织中TNF-α,TGF-β和IL-18含量显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,模型+rh-Tβ4组小肠、肺及脑组织中TNF-α含量显著降低(P<0.05),小肠和脑组织中TGF-β和IL-18含量显著降低(P<0....     

2 650 MHz射频辐射对小鼠行为学和海马神经递质释放的影响

目的 探讨2 650 MHz射频暴露对小鼠行为学和神经递质释放的影响。方法 采用随机数表法将成年雄性C57BL/6N小鼠分为健康对照组(CON)和射频辐射组(RFR);采用2 650 MHz射频电磁场对小鼠进行全身均匀暴露,时间为单次3 h。采用电磁辐射分析仪检测射频辐射平台有效工作区的场强分布;光纤测温仪监测射频暴露过程中小鼠肛温的变化;采用新物体识别、社交偏好和旷场实验检测小鼠认知、社交和情绪的改变;微透析采样和质谱法检测小鼠海马神经递质释放水平的变化;显微镜观察海马组织结构和超微结构的变化。结果 本实验条件下射频辐射引起小鼠肛温升高最大为0.61℃,在热安全的范围之内。在新物体识别实验中,射频辐射组小鼠探索新物体的次数占比和时间占比(t=4.50、2.53,P＜0.05)均显著下降;社交实验射频辐射组小鼠探索同类的次数(t=0.08,P＜0.01)和时间(t=0.03,P＜0.05)显著下降;旷场实验射频辐射组小鼠探索中央区域的次数、时间未见明显改变(P＞0.05)。与健康对照组相比,射频辐射组小鼠海马5-羟色胺释放增加(t=-2.56,P＜0.05),乙酰胆碱释放减少(t=2.21,P＜0.05),谷氨酸和γ-氨基丁酸的释放差异无统计学意义(P＞0.05)。与健康对照组相比,射频辐射组小鼠海马组织结构和突触超微结构未见明显损伤。结论 2 650 MHz射频辐射引起小鼠认知功能损伤和社交偏好异常,上述变化与射频暴露导致的神经元功能异常和递质释放紊乱相关。     

体外培养毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞形态结构和bFGF、EGFR表达差异

Gharzi等[1]初步证实毛囊真皮鞘细胞参与皮肤损伤修复,但相关作用机制研究报道不多.成纤维细胞是皮肤创伤愈合主要效应细胞,毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞一样均属于间充质细胞.本研究旨在通过两种细胞形态结构及部分愈合相关蛋白表达差异研究,初步探讨毛囊真皮细胞在创伤愈合中的作用.