急性髓系白血病中乳腺癌多药耐药蛋白基因的研究进展

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是新近发现的一种肿瘤耐药相关蛋白,与P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)同属ABC转运蛋白超家族。本文对BCRP的发现、组织表达、结构特点、急性髓系白血病中多药耐药BCRP基因的表达及应用等方面的研究进展进行综述。     

IN VITRO STUDY ON THE CLONING AND TRANSDUCTION OF HUMAN O~6-METHYLGUANINE-DNA-METHYLTRANS cDNA INTO HUMAN UMBILICAL CORD BLOOD CD34~ CELLS

Myelosuppressionisoftenadose-limitingsideeffectofchemotheropeaticdrugsinthetreatmentofcancer.Transducingresistancegenesintohematopoieticprecursorsthatconferprotectionagainstthehematotoxicityofanticanceragentshasbeenprovedtoreducemyelosuppression.Inthisregard,effortshavebeenmadetopotentiatetheresistanceconferredbythismethod.Chemotheraopeaticdrugssuchasalkylatingagents(temozolomide,BCNU,mitozolomide,chlorozotocinandrocarbazine)arecytotoxicasaconsequenceofformingO'-alkylguanineDNAadducts.O6me…     

人类cyclophilin A基因cDNA的克隆和序列测定

目的:克隆人类环孢霉素A受体亚型cyclophilinA(CypA)基因,对该基因进行序列测定。方法:利用EST重叠序列拼排技术,设计特异性CypA引物,以人外周血白细胞总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,纯化PCR产物,装pGEM-T载体,进行DNA序列测定。结果:成功克隆了人类Cyp A基因cDNA序列的开放阅读框,经DNA序列测定证实序列正确。结论:通过克隆人CypA基因,并克隆人pGEM-T载体,为下一步的基因表达和功能研究奠定了实验基础。     

恶性疟疾重组质粒pPF14DNA探针的制备

采用基因克隆技术，将恶性疟原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）ｐＰＦ１４质粒转化大肠杆菌ＨＢ１０１，经扩增后碱裂解法提取质粒ＤＮＡ，核酸内切酶酶切图谱分析鉴定后，低熔点胶法回收而获得高纯度和高回收率的插入片段（ｐＰＦ１４ＤＮＡ），经３２Ｐ标记后具较高敏感性与特异性，该探针制备方法具简便、稳定、省时的优点。本文对各制备程序进行了探讨。     

自体造血干细胞移植联合利妥昔单抗治疗非霍奇金淋巴瘤6例☆

背景：利妥昔单抗单用或联合CHOP方案化疗治疗CD20阳性非霍奇金淋巴瘤已取得较好疗效,非霍奇金淋巴瘤经自体造血干细胞移植治疗同样可以提高患者的疗效和生存率,而将两种方法联合的效果尚存在争论。 目的：探讨自体造血干细胞移植联合利妥昔单抗对CD20阳性非霍奇金淋巴瘤的有效性。 方法：对6例CD20阳性非霍奇金淋巴瘤Ⅳ期患者进行自体造血干细胞移植的同时,联合使用利妥昔单抗,分别于移植前给予2~4次,动员和预处理前后各2次,移植后每3个月维持治疗1次,利妥昔单抗用量为 375 mg/m2静滴。 结果与结论：平均采集单个核细胞数为5.13× 10-8/kg,CD34+细胞数为4.75×10-6/kg。6例患者自体造血干细胞移植后,造血功能均恢复顺利,中性粒细胞计数大于0.5×10-9L-1为移植后9~15 d,血小板计数大于20×10-9L-1为移植后12~19 d。6例患者在移植过程中均未发生出血性膀胱炎、间质性肺炎、巨细胞病毒感染和肝静脉阻塞等并发症。利妥昔单抗使用过程中,无发热、寒战、皮疹等不良反应发生。移植后6~32个月,患者均处于完全缓解状态。提示自体造血干细胞移植并利妥昔单抗治疗CD20阳性非霍奇金淋巴瘤是一种较好的方法,可维持治疗效果,有利于防止复发。     

含MGMT及增强荧光蛋白真核表达载体的构建

目的 克隆O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因,测序鉴定正确后构建含增强荧光蛋白（EGFP）的真核表达载体.方法 利用RT-PCR从人正常肝细胞中克隆MGMT并与克隆载体pGEM-T载体相连接.经PCR、酶切及测序鉴定证明克隆成功后用限制性内切酶切下MG-MT片段,同时酶切载体pIRES2-EGFP.凝胶纯化回收后重组构建真核表达载体并鉴定.结果 测序结果显示所克隆的编码序列与GeneBank公布MGMT cDNA序列一致.真核表达载体的PCR及酶切鉴定结果与预期结果一致.结论 成功克隆了耐药基因MGMT并构建了含EGFP编码序列的真核表达载体pIRES2-MGMT-EGFP,为MGMT的进一步相关研究奠定了坚实基础.     

再生障碍性贫血及慢性粒细胞性白血病患者骨髓单个核细胞Notch1表达研究

目的了解再生障碍性贫血(AA)患者及慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)Notch1表达情况,探讨Notch1与骨髓增生能力的相关性.方法应用半定量RT-PCR检测15例AA患者、8名正常对照者和10例CML患者BMMNC的Notch1的表达,并比较了8例AA患者化疗前后BMMNC的Notch1的表达,及10例CML患者化疗前后BMMNC的Notch1的表达.结果AA患者BMMNC的Notch1表达低于正常对照组(P<0.05);CML患者BMMNC的Notch1表达高于正常对照组(P<0.05);AA患者化疗后Notchl表达上调(P<0.05);CML患者化疗后Notch1表达下调(P<0.05).结论Notch1在AA患者BMMNC和正常人BMMNC中表达有差异,可能是AA患者骨髓增生能力低下的原因之一;AA患者化疗后BMMNC的Notch1表达水平上调,提示皮质激素和睾丸酮联合应用提高AA患者造血能力可能与Notch1上调有关.CML患者BMMNC的Notch1表达高于正常人,化疗缓解后Notch1表达下调,提示Notch1过度表达可能与CML的发生相关.     

Notch及其配体在血液系统中的作用

Notch是一组普遍存在于造血干／祖细胞、胚胎肝细胞、外周血淋巴细胞等多种细胞表面的跨膜蛋白。Notch在其配体的作用下可直接作为基因转录调节因子,对造血细胞的增殖、分化与抗凋亡能力起重要调节作用,研究证实Notch及其配体的正常表达是机体维持正常造血功能的重要条件,并在部分血液系统恶性疾病包括白血病及淋巴瘤的发生和发展中起重要作用。     

老年急性白血病41例临床分析

目的探讨老年急性白血病的临床特点。方法分析41例老年急性白血病患者的临床资料，包括临床特征、骨髓象，基础疾病及化疗的疗效。结果老年急性白血病治疗效果欠佳，完全缓解率低。结论老年急性白血病治疗比较困难，应选择个体化方案。     

非清髓异基因外周血造血干细胞移植治疗一例慢性粒细胞白血病

异基因造血干细胞移植仍是目前唯一公认能够治愈慢性粒细胞白血病(CML)的方法,在慢性期移植效果最佳,50%～60%患者可获得长期存活和长期缓解。我们采用非清髓性HLA相合同胞供者外周血造血干细胞移植成功治疗CML 1例,现报告如下。