汉滩病毒核衣壳蛋白与宿主相互作用蛋白的分离与纯化

目的构建带有亲和素标签的汉滩病毒(HTNV)核衣壳蛋白(NP)表达质粒,转染HEK293T细胞并表达后,鉴定与其相互作用的宿主蛋白。方法合成亲和素标签基因(SF)与HTNV NP基因,先后克隆入哺乳动物真核表达载体pCAGGS,构建带有亲和标签SF的HTNV NP表达质粒,酶切鉴定重组质粒,获得的重组质粒命名为pCAGGS-SF-NP。将重组表达质粒瞬时转染到HEK293T细胞中, Western blot法检测重组质粒的表达;瞬时转染并收获蛋白样品,与StrepTrap~(TM) HP琼脂珠混匀后, 4℃过夜孵育;转移到层析柱中,经缓冲液洗涤、脱硫生物素洗脱完成亲和层析,获得洗脱样本;洗脱样品进行SDS-PAGE,分离得到与NP相互作用的宿主蛋白。结果酶切鉴定结果表明成功构建pCAGGS-SF和pCAGGS-SF-NP,重组质粒成功表达串联SF与NP的融合蛋白;在亲和层析过程中,成功特异富集融合蛋白SF-NP;洗脱样品成功分离出与NP相互作用的宿主蛋白。结论构建的重组表达质粒可以在真核细胞中成功表达融合蛋白SF-NP并获得了与NP相互作用的宿主蛋白。     

HPLC法测定黄柏片中盐酸黄柏碱和木兰花碱含量

目的 建立黄柏片中盐酸黄柏碱和木兰花碱的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法(HPLC)测定,色谱柱为HYPERSIL ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈-0.3%磷酸0.3%三乙胺溶液为流动相进行梯度洗脱;流速：0.8 ml/min,检测波长：230 nm,柱温：25℃,进样量：10μl。结果 盐酸黄柏碱和木兰花碱分别在0.053～1.327μg、0.048～1.204μg浓度范围内呈良好线性关系(r≥0.9900),加标回收率范围为93.33%～109.81%。样品中盐酸黄柏碱的含量范围为2.025～2.700 mg/g,木兰花碱的含量范围为0.848～1.380 mg/g。结论 所建方法可有效测定黄柏片中盐酸黄柏碱和木兰花碱的含量,有助于提高黄柏片的质量控制。     

中西医结合疗法改善低位直肠癌完全经肛门括约肌间切除术后患者肛门功能的临床研究

目的:探讨中西医结合疗法在加速低位直肠癌完全经肛门括约肌间切除术(ISR)切除术后肛门功能恢复中的作用。方法:回顾性分析2016年1月—2019年1月大连大学附属中山医院胃肠外科收治的43例低位直肠癌接受完全ISR切除手术患者的临床资料,对照组21例,治疗组22例。所有患者严格遵守直肠全系膜切除术(TME)原则行完全ISR手术。对照组术后予生活方式干预(戒烟、运动)、饮食因素调整、提肛运动,口服洛哌丁胺治疗;治疗组在对照组的基础上,增加针刺治疗、口服中药汤剂及中药坐浴治疗。采用Williams标准及Wexner评分系统评估术后肛门功能恢复情况。动态跟踪观察随访两组患者肛门功能至术后12个月。结果:Williams肛门功能评估:治疗组患者术后3个月的肛门功能良好率均优于对照组,差异有统计学意义(P=0.044),术后1、6、12个月时差异无统计学意义(P>0.05)。肛门失禁Wexner评分:治疗组患者术后1、3、6个月肛门失禁Wexner评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),术后12个月,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中西医结合疗法能够加速低位直肠癌完全ISR切除患者术后肛门功能的恢复,降低术后肛门失禁发生率,在前期(术后3~6个月)时效果显著。     

早期护理干预对预防股前外侧皮瓣修复足部创面术后DVT的效果研究

目的探讨早期护理干预对预防股前外侧皮瓣修复足部创面术后深静脉血栓形成(deep vein thrombosis, DVT)的临床效果。方法选取2018年1月-2019年12月入住足踝外科病区的100例患者为研究对象,随机分为两组。观察组50例按照综合性早期护理干预模式即术前心理疏导、术前功能训练指导及术前监测、术后的体位护理、麻醉后按摩、早期功能训练、疼痛护理等进行围手术期护理,同时结合物理及药物治疗。对照组50例按照传统常规护理模式即术前饮食及术后注意事项宣教,术后麻醉期护理、指导并协助患者肢体活动、饮食药物宣教等进行围手术期护理,辅以物理及药物治疗。比较两组间干预前后股静脉血流速度及DVT发生率的差异。结果经过早期护理干预后,观察组及对照组在血流平均速度及血流峰值速度上差异均有统计学意义(P <0.05);观察组DVT的发生率明显低于对照组。结论通过早期护理干预,提高了股前外侧皮瓣修复足部创面术后患者下肢静脉血流速度,能较好地预防股前外侧皮瓣修复足部创面术后DVT的发生,提高了患者生活质量及满意度,值得临床推广应用。     

2型糖尿病患者血清免疫球蛋白及IgG亚类的观察

目的 探讨２型糖尿病患者并发血管病变和感染后的体液免疫状态。方法 采用速率散射免疫比浊法及高亲和力的ＩｇＧ亚类多克降抗体,测定血清免疫球蛋白和补体。结果 血清ＩｇＧ水平单纯糖尿病组和血管病变组较对照组显著下降（分别Ｐ〈０．０５和〈０．０１）,并以ＩｇＧ１下降为主;血清ＩｇＧ、ＩｇＡ水平感染组比对照组和单纯糖尿病组和血管病变组较对照组显著升高（Ｐ〈０．０５）,而ＩｇＧ亚类及ＩｇＭ水平感染组无显著变化     

Enzyme-linked immunosorbent assay of human placenta type glutathione s-transferase and its application in the diagnosis of hepatocarcinoma

GST-π was purified from human placenta and its antiserum was raised in rabbits. The antibody IgC was purified and degraded into Fab' fragment which was conjugated with horseradish peroxidase (HRP) using N-succinimidyl-4-(N-maleimido-methyl) cyclo-hexane-1-carboxylate (SMCC) as crosslinking reagent to produce Fab'-HRP conjugate. A sandwich ELISA was established for the microquantitative determination of GST-π. The sensitivity was 11 pg/tube, which was far more sensitive than the radioimmunoassay so far reported. Using this method, the serum GST-π of 41 cases normal adult was found to be 1.06±0.94 ng/ml. The upper limit of the normal value was 2.6 ng/ml. In 30 cases of primary hepatocarcinoma, the level of serum GST-π was 24.4± 17.4 ng/ml, which was 23 times higher than the normal average value (P<0.01). The positive rate was 90%. In contrast, serum GST-π in 25 cases of chronic hepatitis was determined to be 1.74±1.16 ng/ml, which was not significantly different from the normal value (P>0.05). The     

干姜油β-环糊精包合物的制备研究

干姜为常用中药姜 (ZingiberofficinaleRosc )的干燥根茎 ,始载于《神农本草经》。干姜含挥发油 ,其主要成份为姜酮、姜醇、β -没药烯、α -姜黄烯、β -倍半水芹烯 ,另含d -莰烯、桉油精、枸橼醛、龙脑等萜类化合物 ,干姜性味大辛大热 ,主温中回阳 ,既是食品 ,又是临床广泛应用的传统中药。药理研究表明 :干姜挥发油具有抗肿瘤、抗氧化、抗过敏、降低胆固醇等作用。由于干姜挥发油具有较强的挥发性 ,且化学性质不稳定、易氧化 ,故试验用 β -环糊精对其进行包合 ,以降低其挥发性 ,增加稳定性 ,利于贮存 ,便于制成多种剂型 ,提高药物利用…     

Marimastat对裸鼠原位种植人胃癌生长和转移抑制的实验研究

目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂Marimastat对胃癌生长和转移的抑制作用。方法 采用人胃腺癌细胞株SGC—7901完整组织块棵鼠原位种植，建立胃癌转移模型。移植7天后开始腹腔内注射Marimastat，隔天1次，剂量为0mg/kg(对照组)、10mg/kg、30mg/kg、60mg/kg(治疗组)，共用8周，第9周处死动物，测量原位肿瘤大小、抑瘤率、肿瘤微血管密度(MVD)、MMP—9的高表达率、观察肿瘤转移情况。结果 治疗组原位肿瘤瘤重明显较对照组轻，肿瘤肝脏转移、腹膜转移、肿瘤组织微血管密度和肿瘤组织MMP—9高表达率与对照组比较，均有显著性差异(P＜0．05)，且与Marimastat剂量呈正相关。结论 Marimastat对体内胃癌的生长及转移均有抑制作用。     

多西他赛治疗晚期恶性实体瘤疗效观察

目的：观察以多西他赛为主的联合化疗方案治疗晚期恶性实体瘤的近期疗效和毒性反应。方法：30例晚期实体瘤患者均为复治病例。化疗方案均选用多西他赛加DDP方案，合并脑转移患者再联用司莫司汀。每例化疗持续2个周期以上，共68个周期。结果：30例化疗患者CR1例，PR20例，SD7例，PD2例，总有效率(CR PR)70％。主要剂量限制毒性为骨髓抑制，Ⅲ、Ⅳ度白细胞减少发生率为23.3％。结论：多西他赛是治疗晚期恶性实体瘤安全可靠的抗癌药物之一，毒副反应轻，患者易耐受，疗效满意，可以作为第二线治疗药物。     

小儿血小板增多症359例病因分析

小儿血小板增多症３５９例病因分析浙江省温岭市第一人民医院（３１７５００）李桦林峰１对象与方法１．１对象３５９例均系１９９３年１月～１９９５年１２月收住本科的患儿，并已在临床上排除原发性血小板增多症。除各自疾病外，均伴有血小板增多。１．２方法晨起用７号...