二乙酰二脱水卫矛醇在体内外的抗瘤作用及其机制

目的：观察二乙酰二脱水卫柔醇（ｄｉａｃｅｔｙｌｄｉａｎｈｙｄｒｏｇａｌａｃｔｉｔｏｌ,ＤＡＤＡＧ）在体内外的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡的关系。方法：建立小鼠脑内接种艾氏腹水癌模型,观察ＤＡＤＡＧ体内抗瘤作用;ＭＴＴ法观察ＤＡＤＡＧ对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０和人红白血病细胞株Ｋ５６２的生长抑制作用,ＤＮＡ电泳和流式细胞仪分析ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞凋亡的情况。结果：ＤＡＤＡＧ１０ｍｇ／ｋｇ ｉｐ,每天１次,连续给药７天,可显著延长小鼠中位生存时间;对ＨＬ－６０和Ｋ５６２均有生长抑制作用,药物作用７２ｈ的ＩＣ５０分别为３．７ｍｇ／Ｌ和２５．５ｍｇ／Ｌ;作用ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞后电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带,ＤＮＡ直方图出现亚Ｇ１峰。结论：ＤＡＤＡＧ抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

hR24L基因转染对MCF7细胞周期的影响

目的　通过观察人类DNA损伤修复基因hR2 4L转染对MCF7细胞增殖周期的影响 ,进一步了解其功能及作用机制。方法　分别用正义和反义hR2 4L逆转录病毒表达载体(pDor-neo)重组体转染MCF7细胞 ,观察细胞生长速度 ,用Northern印迹杂交检测hR2 4L基因的表达情况 ,并用流式细胞仪检测细胞周期。结果　与转染空载体的细胞相比 ,转染正义hR2 4L重组体的细胞生长较慢 ,其hR2 4LmRNA的表达增加 ;而转染反义hR2 4L重组体的细胞生长较快 ,其hR2 4LmRNA的表达则降低 ;转染后 6h流式细胞仪检测表明 ,转染正义hR2 4L重组体的细胞G2 +M期的比例 (18% )明显高于其它 3种细胞 (6 % )。结论　hR2 4L基因的表达抑制了细胞生长 ,其机制是引起细胞周期阻滞 ,参与细胞周期调控。     

Bcl-2、Bax在百草枯诱导大鼠视网膜损伤中的表达

目的观察百草枯对SD大鼠视网膜损伤的作用及对Bcl-2、Bax表达的影响,并探讨Bcl-2、Bax在百草枯诱导的视网膜细胞凋亡中的作用及意义。方法将大鼠随机分成对照组和模型组,对照组玻璃体腔注射0.1 mol.L-1 PBS,模型组玻璃体腔注射一定浓度的百草枯,分别在12 h、1 d、2 d、5 d处死动物,HE染色观察视网膜的损伤程度,TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡情况,同时采用Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果①HE染色观察随着时间的增加,外核层逐渐变得稀疏并观察到核固缩,内核层可观察到核固缩,神经节细胞出现空泡样,5 d时内丛状层消失,外核层内核层紊乱。②TUNEL法检测凋亡结果:对照组没有发现凋亡阳性细胞,PQ可以诱导视网膜细胞凋亡,2 d凋亡指数达到高峰③Western blot结果:百草枯诱导的大鼠视网膜损伤可上调Bcl-2的表达,在1 d时达到高峰,与对照组相比差异有显著性(P<0.01),2 d开始下降;同时上调Bax的表达,在2 d时达到高峰,5 d时下降,各组之间差异均具有显著性(P<0.01);下调Bcl-2/Bax的比值,在2 d时达到最低,与对照组相比差异有显著性(P<0.01),到5 d时升高,与对照组比仍较低(P<0.01)。结论百草枯诱导了视网膜细胞的凋亡,可能是通过调节Bcl-2和Bax的表达来诱导视网膜细胞的凋亡,Bcl-2/Bax也与凋亡的发生密切相关。     

二乙酰二脱水卫矛醇诱导人白血病HL-60细胞凋亡与Bcl-2家族的关系

目的　探讨抗肿瘤药物二乙酰二脱水卫矛醇 (di acetyldianhydrogalactitol,DADAG )诱导肿瘤细胞凋亡机制。方法　透射电镜、DNA梯形条带、流式细胞术及Westernblot法分别检测凋亡和凋亡相关基因Bcl 2家族成员表达的动态变化。结果　透射电镜可见细胞异染色质固缩、边集及凋亡小体形成 ;DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的“DNAlad der” ;流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体峰。DADAG4 μmol·L-1处理HL 6 0细胞 6h后 ,Bcl 2蛋白水平开始下降 ,Bad蛋白水平明显上调 ,相反 ,Bcl XL 蛋白水平呈时间依赖性地下降。结论　DADAG诱导白血病HL 6 0细胞凋亡 ,与Bcl 2、Bcl XL 蛋白水平下降 ,Bad蛋白水平明显上调有关     

三七皂苷Rg1对脑缺血后海马CA1和CA3区BDNF蛋白的干预

三七总皂苷及三七皂苷Rg1对脑缺血有肯定的保护作用[1-2]。但对于其作用机制却知之甚少。脑缺血损伤的重要部位位于大脑皮质和海马。许多研究发现,脑缺血时海马区域细胞对缺血缺氧的反应不一,CA1区神经元最为敏感,损伤最重;CA2和CA3区也有较为严重的神经损害。Arai[3]和Kokaia[4]等在一侧大脑中动脉阻塞(MCAO)动物模型上发现,双侧海马BDNF和TrkB mRNA表达均增加,而众多研究表明[5,6],BDNF参与脑缺血的损伤保护过程。那么三七皂苷Rg1对海马缺血缺氧损伤时CA1和CA3区BDNF蛋白有何影响,以及两者有无差异性,这是本实验着重探讨的…     

3-氧-乙酰-11-脱氧甘草次酸铝毒理学研究

目的测定３－氧－乙酰－１１－脱氧甘草次酸铝（Ａｌｕｍｉｎｕｍ３－ｏ－ａｃｅｔｙｌ－１１－ｄｅｏｘｏｇｌｙｃｙｒｈ－ａｔｅ，ＡＤＡ）的半数致死量（ＬＤ５０）及对大鼠血清钠、钾浓度的影响。方法昆明小鼠６０只，体重２０±１ｇ，随机分６组，每组１０只，各组按不同剂量的ＡＤＡ０．２ｍｌ·１０ｇ－１灌胃，给药后按急性毒性实验法连续观察７ｄ。Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，体重２００±１０ｇ，随机分４组，每组１０只。各组分别给０．５％羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）、生胃酮（Ｃａｒｂｅｎｏｘｏｌｏｎｅ，ＣＮ）和两个剂量的ＡＤＡ，早晚灌胃一次，连续１２ｄ后，处死大鼠取血，测血清钠、钾浓度。结果灌胃ＡＤＡ的ＬＤ５０为４４４４±８３１．５ｍｇ·ｋｇ－１。长期用药，ＡＤＡ未引起大鼠血清钠、钾浓度的明显变化，相反ＣＮ却显著降低血清钾浓度。结论ＡＤＡ引起急性致死性中毒的危险性甚小，长期用药未引起大鼠血清钠、钾浓度的变化     

川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲引起大鼠视网膜损伤的拯救效应

目的:观察川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲诱导SD大鼠光感受器细胞凋亡的保护作用。方法:2003-03/09在中山大学中山医学院实验动物中心,于雌性SD大鼠生后47d,分别经腹腔注射小、中及大剂量的川芎嗪注射剂,1次/d,并于生后50d腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲60mg/kg。在N-甲基-N-亚硝脲处理不同时间后处死动物,取眼球。通过dUTP缺口末端标记试剂盒检测光感受器细胞凋亡;视网膜形态学分析测量周边视网膜的总厚度;反转录聚合酶链反应法检测基因c-fos的表达。结果:N-甲基-N-亚硝脲作用24h后,模型组周边视网膜的光感受器细胞凋亡指数为38.0%;川芎嗪注射剂组分别为30.0%,15.6%和8.4%。作用7d后,模型组周边视网膜的总厚度为37μm;川芎嗪注射剂组分别为41,66和85μm。川芎嗪注射剂可抑制N-甲基-N-亚硝脲诱导的即早基因c-fos的表达。结论:川芎嗪注射剂通过下调基因c-fos的表达,抑制光感受器细胞凋亡,从而部分地保护N-甲基-N-亚硝脲引起的视网膜损伤。     

N-甲基-N-亚硝脲对大鼠光感受器细胞毒性作用的形态学改变

目的:观察N-甲基-N-亚硝脲(N—methyl—N—nitrosourea，MNU)对SD大鼠光感受器细胞毒性作用的形态学改变。方法：雌性SD大鼠76只，分12组，正常对照组4只，其余组各6只。于大鼠生后50d，分别一次腹腔注射MNU 40mg／kg、60mg／kg和80mg／kg。在MNU处理后24h、48h、3d和7d，处死大鼠，取眼球，做组织学检查。结果：不同剂量的MNU均引起视网膜损伤，其损伤的程度与MNU剂量呈正比。作用24h后，可见不同程度的视网膜光感受器细胞核固缩和光感受器细胞外节部定向障碍；48h或3d后，可见光感受器细胞丧失；7d后，外颗粒层和光感受层仅剩下少数几层或几乎完全消失。结论：MNU对大鼠视网膜光感受器细胞有选择性的毒性作用，该作用呈剂量和时间依赖性。     

抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白急性毒性实验研究

目的观察拟生产药物抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白（ALG）对小鼠的急性毒性作用。方法 ICR小鼠,体质量18～22g,雌雄各半,分别采用腹腔注射限度试验和尾静脉注射最大受试药量试验法,连续观察14d后处死全部小鼠,并进行尸体解剖、大体肉眼观察,发现异常的组织或器官进行病理切片送检。结果两种试验方法结果均显示：所有试验动物存活,供试品的LD50〉5g/kg,但尾静脉注射最大给药量试验时,发现给药2d内动物的一般情况较差,处死并解剖后发现用药组有少数小鼠出现肝、肾的感染性侵害。结论 ALG的LD50值大于5g/kg,约相当于临床用量的250～333倍,提示该药物比较安全,但在过量静脉注射后短期内对小鼠仍有一定毒性。     

医学影像学专业药理学教学探讨

药理学是医学影像学专业的必修课程,为提高教学效果,从制定切实可行的教学目标、精选教学内容、培养学生对药理学的兴趣、发挥学生的主观能动性、丰富教学方法、开辟第二课堂等方面进行探讨。