心衰时α-MHC基因表达水平与心肌收缩力的相互关系研究

为探讨心力衰竭时心肌收缩力降低的分子基础，采用ＤＯＣＡ硅胶管皮下埋入法建立大鼠心力衰竭模型，用α－ＭＨＣ探针分别与心衰及正常心肌组织总ＲＮＡ进行槽缝印渍（Ｓｌｏｔｂｌｏｔ）杂交，研究心衰时心肌收缩蛋白α－ＭＨＣ基因表达的改变及与心肌收缩力改变的关系。结果显示：（１）心衰组大鼠心肌收缩力指标ＬＶＰ和ｄｐ／ｄｔ与正常对照组大鼠相比，分别下降了１９．８７％（Ｐ＜０．０５）和２７．５０（Ｐ＜０．０１）。（２）心衰组大鼠α－ＭＨＣｍＲＮＡ的含量（０．１１±０．０４）低于正常对照组（０．１４±０．０３，Ｐ＜０．０５）。（３）α－ＭＨＣｍＲＮＡ的含量与心肌收缩力的大小存在线性正相关关系（ｒ＝０．４１４３，ｎ＝４３，Ｐ＜０．０５）。结果提示：α－ＭＨＣ基因表达水平的下降是心衰时心肌收缩力减退的分子基础之一。     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤时三磷酸肌醇激酶信号通路与缺氧诱导因子1α的调节

目的 探讨在体神经元缺氧缺血条件下缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白的表达及三磷酸肌醇激酶(phosphoinositid 3-kinase/Akt,P13K/Akt)信号通路的激活,推测P13K/Akt信号通路与神经元HIF-1α表达调节的关系,以期更确切地阐明P13K/Akt在发育期脑缺氧缺血性损伤(hypoxia ischemia brain damage,HIBD)神经元HIF-1α表达中的作用.方法 10d龄SD大鼠56只,分为正常对照组(n=12)、假手术组(n=12)、实验组(n=24)、wortmannin干预组(n=4)和溶剂干预组(n=4).实验组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气(92%N2、8%O2)缺氧2.5 h,即为HIBD模型;假手术组不结扎颈总动脉,不作缺氧处理;正常对照组不作任何处理.wortmannin干预组和溶剂干预组分别在侧脑室内注射wortmannin和DMSO、PBS 3 μL,30 min后制备HIBD模型.分别于建模后4、8及24 h处死动物取脑组织,应用免疫组织化学法检测HIF-1α、Akt蛋白的分布和表达,Western blot检测HIF-1α、Akt及P-Akt蛋白含量.结果 实验组HIF-1α蛋白表达在术后4h明显升高,8 h达高峰,24 h后下降;p-Akt蛋白于术后4h明显升高,8 h后下降.正常对照组各时间点HIF-1α和p-Akt均有极少量弱阳性表达.实验组各时间点HIF-1α蛋白表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);实验组p-Akt于4 h和8 h明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).Akt蛋白表达随术后时间的延长无明显变化,与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).术后4 h wortmannin干预组的HIF-1α蛋白的表达明显下降,与溶剂干预组及实验组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 发育期HIBD时,可激活P13K/Akt信号通路,并诱导HIF-1α表达增加,可针对P13K/Akt信号通路和HIF-1α寻找新生儿HIBD新的治疗靶点.     

新生儿脑卒中与产时及产后发病因素

新生儿脑卒中是新生儿时期一种严重的神经系统疾病,由于早期诊断困难,常延误治疗,造成严重后果,导致不同程度神经系统后遗症,如脑瘫、认知及运动功能障碍等。因此,了解其发病原因尤为重要,目前研究发现其发生与许多风险因素有关,包括新生儿产前、产时及产后因素,新生儿产前风险因素,本文将对新生儿脑卒中产时及产后发病因素作一综述。     

K562细胞中Aurora A与端粒酶表达相关性

目的探讨人白血病细胞K562中Aurora A与端粒酶表达的相关性，阐明Aurora A在人白血病发生发展中的作用机制。方法用RT—PCR方法克隆得到Aurora A全长基因，采用Fugene 6转染试剂介导将其转染入K562细胞中表达，Western Blot检测细胞Aumm A和人类端粒酶反转录酶（hTERT）表达水平，端粒酶检测试剂盒Telomerase PCR ELISA检测细胞端粒酶活性，监测Aurom A表达升高的阳性细胞hTERT和端粒酶活性变化。将针对Aurora A mRNA的DNA核酶导入Aurora A高表达的K562细胞以抑制Aurom A表达，检测Aurora A表达下调后细胞hTERT和端粒酶活性变化。结果Aurora A全长基因转染K562细胞后，各阳性克隆Aurora A表达均上调，并伴hTERT及端粒酶活性增加。DNA核酶转染Aurora A高表达的K562后，能显著下调细胞Aurora A表达，hTERT和细胞端粒酶活性也同步下降。结论在人白血病中，Aurora A表达增加可引起细胞端粒酶活性的同步增加，可能是Aurora A导致白血病发生发展的重要原因。     

缺氧诱导因子-1α在缺氧缺血皮质神经元中的表达

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白及其mRNA在体外培养大鼠皮质神经元缺氧和（或）缺血过程中的表达情况。方法培养16~18 d胎鼠皮质神经元,建立体外神经元缺氧缺血（HI）、单纯缺氧、单纯缺血模型。在缺氧和（或）缺血再灌注后不同时间点,采取免疫细胞化学、原位杂交技术检测皮质神经元HIF-1α蛋白及其mRNA的表达。结果常氧下神经元HIF-1α蛋白有微弱表达,在缺氧和（或）缺血处理后,其表达明显增高,HI再灌注4~8 h后HIF-1α蛋白表达最高,与其他时间点比较均有显著差异（Pa=0）,12 h后开始下降;且HI组HIF-1α蛋白较单纯缺氧和单纯缺血组表达高,差异有统计学意义（Pa=0）。HIF-1αmRNA表达在HI后即达到高峰,2 h后渐下降,在8 h呈低水平表达。结论HIF-1α在缺氧和（或）缺血后的皮质神经元表达的差异具有一定时间规律性,提示对HI神经元进行HIF-1α基因治疗可能是一种可行的方法。     

KAI1基因对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌CaSki细胞体外增殖和侵袭能力的影响.方法 通过脂质体转染技术,将真核表达质粒pCMV-KAI1导入低表达的宫颈癌CaSki细胞,免疫组化及实时荧光定量RT-PCR法检测转染前后细胞内KAI1蛋白和mRNA的表达,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及Transwell侵袭力小室测定KAI1基因对细胞增殖能力及侵袭能力的影响.结果 转染目的基因的CaSki细胞中KAI1 mRNA水平及蛋白表达明显增强(P<0.05),细胞体外增殖能力明显弱于未转染组和转染空载体组(P<0.05),细胞穿膜数量明显少于未转染组和转染空载体组(P<0.05).结论 肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌细胞体外增殖及侵袭能力有一定抑制作用.     

开放教育的实践与探索

在我国高等教育迅速发展的今天，开放教育也迅速发展起来，作为当前教育体系中的新兴成员，开放教育在我国高等教育体系中扮演着重要角色，对我国高等教育人才培养、高校建设、教学资源开发利用等起着不可替代的作用，为我国的高等教育全面健康发展做出了巨大贡献。     

通过改革教学法提高儿科学教学质量

改革传统的医学教育模式和教学方法，提高儿科学教学质量是国内外医学教育工作者值得探讨的问题。为了培养合格的儿科医生，四川大学华西第二医院儿科教研室实施了一系列教学方法的改革，以提高儿科临床课程的教学质量。     

Aurora A 在人前列腺癌中的表达

目的观察Aurora A在人前列腺癌中的表达情况,探讨Aurora A是否在前列腺癌发生发展中起一定作用。方法采用RT-PCR、免疫组织化学和Western blot,检测在前列腺癌组织及其细胞系中Aurora A mRNA和蛋白表达。同时,在前列腺癌细胞系PC3中导入靶向Aurora A mRNA的DNA核酶,观察抑制Aurora A对前列腺癌细胞生长的影响。结果91%的前列腺癌组织和三种前列腺癌细胞系(PC3、LNCaP和Du145)中Aurora A表达阳性,而且,靶向Aurora A mRNA的DNA核酶导入PC3细胞后抑制了Aurora A表达,使PC3细胞停滞在G2/M期,并促进细胞凋亡。结论Aurora A可能在前列腺癌形成中起一定作用,Aurora A可望成为前列腺癌治疗中有价值的靶点。     

循证医学在儿科教学中的应用体会

目的：探讨循证医学教学模式对儿科教学效果的影响。方法：选取2个基本条件相同的临床医学本科班分别用不同的教学方法进行儿科教学，比较循证医学教学模式（实验组）与传统讲授法（对照组）在儿科教学中的教学效果。结果：实验组学生的理论成绩，临床实习效果综合测试成绩、学习兴趣、对教学的满意度等方面明显优于对照组。结论：循证医学教学模式有利于培养学生的思维能力及自我教育能力，从而提高医学生的综合素质。