人宫颈癌基因表达载体的构建及其在肝癌相关研究中的价值

目的 为人宫颈癌基因(HCCR)在肝癌发生、发展中的生物学效应及机制研究提供理想工具.方法 培养人HepG2细胞,RT-PCR扩增出HCCR基因片段,将其连接到pCR T7 TOPO TA/NT克隆载体中,命名为pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR.运用交叉引物PCR筛选正确连接的克隆.再用EcoR I和BamH I限制性内切酶酶切鉴定和测序验证.将其转化BL21细菌,用IPTG诱导其表达相应的蛋白质,并用Western blotting验证.结果 pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR原核表达载体构建成功.酶切鉴定和测序均与预期一致.用IPTG诱导转化此质粒后的BL21细菌,得到相应大小的蛋白质.结论 pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR 原核表达载体构建成功;其可作为HCCR基因功能研究及其与肝癌相关性研究的理想工具.     

检测急性冠脉综合征患者血小板AnnexinⅤ及CD62p的临床意义

目的: 观察急性冠脉综合征患者血小板膜连蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)及P选择素(CD62p)的变化及其临床意义. 方法: 流式细胞术(FCM)检测78例冠心病患者及26例健康体检者血小板膜AnnexinⅤ和CD62p的阳性百分率.结果: 冠心病组AnnexinⅤ表达率与对照组相比,显著性升高(P＜0.01),不稳定型心绞痛组及心梗组与对照组相比,CD62p表达率显著性升高(P＜0.01).心梗组和不稳定型心绞痛组与稳定型心绞痛组比较,AnnexinⅤ及CD62p表达率均有显著性差异(P＜0.01).结论: 测定血小板AnnexinⅤ和CD62p对急性冠脉综合征患者的诊断有重要意义.     

肿瘤患者血清中刀豆蛋白A结合型IgG检测的临床意义

目的探讨肿瘤患者血清中刀豆蛋白A（concanavalin A,Con A）结合型糖基化IgG的变化。方法选择16例胃癌、10例肝癌和20例健康对照者为研究对象,采用硫酸铵-氯化钠沉淀法粗提血清中免疫球蛋白,再以Con A-Sepharose沉淀法除去其中Con A结合型免疫球蛋白,最后ELISA方法检测经Con A-Sepharose沉淀前后IgG的变化。按计算公式（ODC-ODT）/（ODC-OD空白）×100%得到Con A结合型IgG的百分比。结果对照组、胃癌组和肝癌组血清中Con A结合型IgG的百分比分别为7.25±6.92%、14.58±7.51%和23.06±6.73%,组间差异显著,P〈0.05。结论癌症患者血清中含有高水平的Con A结合型IgG,并且肝癌患者Con A结合型IgG较胃癌患者更高。     

80例患者肌钙蛋白T初次检测结果的分析

肌钙蛋白 Ｔ（ｔｒｏｐｏｎｉｎ Ｔ，ｃＴｎＴ）是肌钙蛋白复合体的Ｔ亚单位，是反映心肌损伤的血清标志物。自１９８９年Ｋａｔｕｓ等首次报道血清ｃＴｎＴ的检测方法以来，市场已陆续开发出多种商品化试剂盒，用于临床患者的ｃＴｎＴ测定。我们通过对因胸痛、胸闷而来我院急诊患者８０例的ｃＴｎＴ进行了检测，并判断其与心肌损伤发生的关系，结果报告如下。１ 材料和方法１．１ 检测对象 突发胸痛、胸闷及伴有其他临床症状的急诊患者，经即查ｃＴｎＴ后，ｃＴｎＴ结果异常，提示有心肌损伤而入院治疗的患者，共８０例。１. ２ 检测方法１…     

白细胞直方图观察嗜酸性粒细胞增多的探讨

白细胞直方图观察嗜酸性粒细胞增多的探讨陈军浩顾可粱①（南京鼓楼医院检验科，南京２１０００８）关键词白细胞直方图嗜酸性粒细胞目前，自动血细胞分析仪的应用已相当广泛。三分类仪器虽不能定量检出嗜酸性粒细胞，但从仪器所提供的白细胞直方图上可以初步判断嗜酸性粒...     

血细胞分析仪法与温氏法测定红细胞压积的比较

血细胞分析仪法与温氏法测定红细胞压积的比较陈军浩，张琪，王以立，顾光煜（南京市鼓楼医院，南京２１０００８）关键词红细胞压积，血细胞分析仪，温氏法红细胞压积（ＨＣＴ）是临床常用指标，对贫血的诊断和分类，脱水病人补液，血液流变学检查等方面均有十分重要的意...     

自身免疫病患者自体造血干细胞移植后CD4+CD45RA+及CD4+CD45RO+T辅助淋巴细胞亚群的改变

目的检测严重自体免疫病(SA ID)患者自身造血干细胞移植(AHSCT)前后外周血中CD 4 CD 45RA (na ive T h细胞)及CD 4 CD 45RO (记忆T h细胞)T辅助淋巴细胞亚群的变化,探讨na ive T h细胞和记忆T h细胞在AHSCT诱导自身免疫病缓解中的作用。方法使用三色流式细胞术检测SA ID患者AHSCT前1 w及移植后1~3 m o外周血中CD 4 CD 45RA 及CD 4 CD 45RO T辅助淋巴细胞亚群的改变,na ive T h细胞表型为CD 4 CD 45RA ,记忆T h细胞表型为CD 4 CD 45RO 。分析各细胞亚群占CD 4 T辅助淋巴细胞的百分比,并比较移植前后na ive T h、记忆T h细胞的变化。结果AHSCT后,患者外周血中记忆T h细胞显著增高,P<0.05;na ive T h细胞和CD 45RO CD 45RA 双阳性细胞均显著下降,P<0.05。结论AHSCT治疗SA ID患者,患者体内na ive T h细胞和CD 45RO CD 45RA 双阳性T h细胞百分率显著减少,这是AHSCT诱导SA ID缓解的机制之一。     

外周血CD34+细胞计数预测造血干细胞收获量

目的了解外周血CD34+细胞计数与造血干细胞收获量的关系.方法用流式细胞仪Pro-COUNT方法检测了16例造血干细胞移植患者单采前外周血和采集物中CD34+细胞百分率、绝对数,用血细胞计数仪计数白细胞数.分析各项检测指标与CD34+细胞收获量(×106/kg体重)的相关性.结果外周血白细胞计数、CD34+百分率、CD34+细胞计数与CD34+细胞收获量的相关系数分别为-0.307,0.738,0.665.经相关系数t检验,单采前外周血白细胞计数与CD34+收获量无相关性(P＞0.05),而外周血CD34+百分率和绝对计数与CD34+收获量密切相关(P＜0.01).结论外周血CD34+计数可准确预测采集效果,确定干细胞采集时机.     

一种用于自动血细胞分析仪的新抗凝剂

一种用于自动血细胞分析仪的新抗凝剂南京鼓楼医院检验科（２１０００８）陈军浩，王以立，顾光煜，陆文杰ＥＤＴＡ钠盐或钾盐是目前血细胞分析仪常用抗凝剂。室温条件下，ＥＤＴＡ能引起血小板聚集，发生假性血小板减少，并且使ＭＰＶ显著增大。我们使用ＣＰＴ抗凝剂能够...     

藤黄酸诱导骨髓瘤U266细胞凋亡及机制研究

目的探讨藤黄酸对人多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的影响及机制。方法不同浓度藤黄酸处理U266细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测对细胞增殖的影响,AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞的凋亡,JC-1染色法检测线粒体跨膜电位水平,流式细胞仪检测荧光素激活的Caspase3、Caspase8、Caspase9阳性细胞水平。结果藤黄酸呈浓度依赖性抑制U266细胞的生长,藤黄酸>0.5μg/ml才出现较明显的诱导凋亡的能力,藤黄酸降低U266细胞线粒体跨膜电位水平。藤黄酸作用U266细胞24h和48h时激活的Caspase3、Caspase8、Caspase9阳性细胞比例分别上升24.9%、31.7%、32.4%和57.0%、64.5%、63.5%。结论藤黄酸可抑制U266细胞的生长,机制与诱导U266细胞凋亡有关,线粒体跨膜电位途径和胞浆激活途径参与了凋亡的发生。