普伐他汀对人肝癌细胞株HepG2增殖及侵袭能力影响的初步研究

目的 观察普伐他汀(Pra)抑制肝癌细胞株HepG2增殖及侵袭、运动的作用及机制.方法 培养HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度Pra对HepG2细胞增殖的抑制效应,并与对照组作比较.以Matrigel侵袭实验和迁移实验检测Pra对HepG2细胞的侵袭、运动能力的影响;p38活性试剂盒测定p38活性;Western印迹法测定磷酸化p38(p-p38)、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1(MKP-1)、RhoC及基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达.结果 MTT比色法及Matrigel侵袭和迁移实验显示,Pra明显抑制HepG2细胞增殖及侵袭、运动能力;Pra可抑制p38活性,并抑制p-p38、RhoC及MMP-2表达,同时上调MKP-1表达.以0.01 g/LPra组为例,其抑制HepG2细胞增殖率为(89.51±9.55)%,对照组为100.00%(F=19.76,P＜0.05);对p38活性的影响:0.01g/L Pra组为p38活性为(87.45±8.22)%,对照组为100.00%(F=22.29,P＜0.05).结论 Pra通过抑制p38活性及p-p38表达、提高MKP-1表达,抑制肝癌HepG2细胞株增殖,并通过下调RhoC及MMP-2表达,抑制其侵袭、运动能力.     

奥扎格雷钠对术后脑血管痉挛疗效的临床观察

目的:研究奥扎格雷钠(晴尔)用于术后脑血管痉挛的防治效果.方法:将86例手术患者随机分为3组,晴尔组29例,尼莫地平组29例,对照组28例.连续经颅多普勒(TCD)监测手术后第1、2、3、5、7和第14 d时3组患者大脑中动脉(MCA)的平均血流速度.结果:晴尔组术后3、5、7 d,尼莫地平组术后3、5 d大脑中动脉血流速度显著低于对照组(P＜0.05),术后发生脑血管痉挛的比例亦显著低于对照组(P＜0.05),但晴尔组与尼莫地平组组间无明显差异.结论:术后早期应用晴尔或尼莫地平均可有效防治脑血管痉挛的发生,而晴尔同时具有溶栓的作用,临床应用范围更广.     

Angiostatin K(1-3)基因的原核表达和活性鉴定

将入ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）基因在原核细胞表达并鉴定其活性。构建和鉴定ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）原核表达载体并在大脾性杆菌ＤＨ５α内表达,诱导表达蛋白用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定,采用人脐带静脉内皮细胞抑制实验和鸡胚绒毛膜尿囊膜试验验证其活性。ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）功能区基因在原核细胞获得成功表达,目的蛋白牛菌全总蛋白１５．７％。该表达蛋白捅抑     

大鼠弥漫性轴索损伤后海马Homer1蛋白各亚型的表达及意义

目的 研究侧向旋转致大鼠脑弥漫性轴索损伤(DAI)后海马Homer1蛋白各哑型的表达规律及其意义.方法 成年雄性SD大鼠95只,随机分为对照组(NC组,n=10)、假手术组(SOC组,n=10)和DAI组(n=70),DAI组又根据致伤后时间分为1、3、6、12、24、48、72h共7个亚组,应用侧向瞬时旋转的方法建立大鼠脑DAI模型,取海马组织分别行Homer1蛋白各哑型(Homer1a、Homer1b/c)的免疫组化染色、Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测.结果 实验过程中5只动物死亡,其余90只进入结果分析.3种检测方法均发现DAI组神经组织中Homer1a蛋白和mRNA水平自伤后1h开始表达,至24h表达量最高(P＜0.01),持续至72h仍维持较高水平(P＜0.05),NC组该蛋白仅有极少量表达;而Homer1b/c在NC组、SOC组和DAI组均可见明确的阳性表达,但3组的表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Homer1a在DAI损伤急性期即于海马组织中表达,Homer1b/c则在损伤前后均有表达.Homer1蛋白的两种亚型可能在DAI中均发挥着要作用,抑制Homer1b/c或促进Homer1a表达可能对DAI损伤后神经元具有保护作用.     

外源性血管抑素K(1-3)基因在人脑胶质瘤中的表达意义

目的 探讨外源性血和抑素Ｋ（１－３）基因「ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ９１－３）,ＡＫ（１－３）」在人脑胶质瘤中的表达及其作用。方法 应用ＰＣＲ法,使人Ｉｇｋａｐｐａ链分泌信号肽序列Ｓ中装在ＡＫ（１－３）基因上－ＳＡＫ（１－３）;构建ＳＡＫ（１－３）基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１－３）。经脂质体法将其转染入ＳＨＧ４４人脑胶质瘤细胞,行Ｇ４１８筛选获得转基因瘤细胞克隆,比较转基因和内皮细胞抑制     

Inhibitory effects and mechanism of rhBMP-2 on the proliferation of SHG44 human glioma cells

Bone morphogenetic protein (BMP) has been denominated by its artivity of inducing bone formation. Re-cently, it was found to be a multifunctional factor andhave a key role in the regulation of elnbmpis andembryo deVelopment, hssue and cell ~ation andPndiferation. BMP could also inhibit many kinds of tumorcell growth and induce their apoptOSisL',']. the of BMPgenes were successop cloned and ~ssed in aam,such as BMP-2, BMP4 and BMP-7. The bone ~C Pmtein-2 is a htllnan P~ exPansed in vi…     

联合应用angiostatinK(1-3)和endostatin裸DNA对人脑胶质瘤生长的抑制作用

目的 :探讨联合应用angiostatinK(1 3) {ASK(1 3) }和endostatin(ES)裸DNA对人脑胶质瘤生长的影响和作用特点 .方法 :在 1 5只裸鼠皮下接种SHG4 4人脑胶质瘤细胞并分A ,B和C组 (n =5 ) ;在接种后第 1 2日 ,A组 :给予瘤体内注射 2 0 μL脂质体包裹的各 5 μg的 pcDNA S ASK (1 3)和pcDNA S ES质粒 ;B组 :瘤体内注射 2 0 μL脂质体包裹的 1 0μgpcDNA 3.1质粒 ;C组 :瘤体内注射 2 0 μL无菌生理盐水 ;3d后重复注射 1次 .每日定时观察肿瘤生长情况 .4 0d后处死裸鼠 ,检测和计算肿瘤体积、坏死率、血管数和抑瘤率 .结果 :A ,B和C组肿瘤的终体积分别是 4 .4 1 6± 1 .88cm3 ,8.0 34± 1 .85cm3 和 8.0 5 6± 1 .91cm3 ,A组抑瘤率为 4 6 .8% ;A ,B和C组肿瘤的平均坏死率分别为 39.1 2± 7.35 % ,9.1 7± 7.89%和 9.2 1± 7.4 8% ,A与B或C组比较差异显著 (P <0 .0 1 ) ,B ,C组比较差异不显著 (P >0 .0 5 ) .3组的血管计数分别为 3.92± 1 .89,1 1 .8± 2 .0 4和 1 2 .0± 2 .2 1 ,A与B或C组比较差异显著 (P <0 .0 1 ) ,B ,C组比较差异不显著 (P >0 .0 5 ) .结论 :联合应用ASK(1 3)和ES裸DNA可抑制胶质瘤的血管生成、导致其坏死增加 ,进而抑制肿瘤生长 .其作用机制有待深入研究 ,该实验为胶质瘤的抗血管生成     

人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究

目的 克隆人内皮抑素基因,检测其表达蛋白的生物学活性,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法 从人肝组织提取mRNA,用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因,将其重组人pUC19,双氰末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融合表达载体pDH-endo,使其在DH5α内经温度诱导表达,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性。经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗人脑胶质瘤。结果 成功获得551bp的人内皮抑素基因,测序正确。该诱导表达蛋白分子量为20000,具有抑制血管生成活性。该蛋白每天5、10或20mg/kg裸鼠皮下注射可抑制荷瘤裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长（抑瘤率分别为34．5％,76．1％和80．2％）。结论 人内皮抑素基因和表达和初步应用,为采用抗血管生成方法治疗脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了实验基础。     

原位杂交检测EGFR和c-erbB-2基因在人脑胶质瘤中的表达

目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）和c-erbB-2基因表达与人脑胶质瘤发生发展的关系。方法：采用原位杂交方法检测52例人脑胶质瘤、2株人脑胶质瘤细胞系及8例正常人脑组织中EGFR和c-erbB-2基因mRNA的表达。结果：EGFRmRNA阳性率在高恶性度（Ⅲ～Ⅳ级）胶质瘤为79．2％,低恶性度（Ⅰ～Ⅱ级）胶质瘤为50．0％,二差异显（P＜0．05）;c-erbB-mRNA阳性率在高恶性胶质瘤为83．3％,低恶性度胶质瘤为71．4％,二无显差别（P＞0．05）;EGFR和c-erbB-2mRNA表达均随胶质瘤恶性程度增高而增强（P＜0．01）。EGFR和c-erbB-2mRNA在2株人脑胶持瘤细胞系中均有表达,在8例正常人脑组织中均无表达。EGFR和c-erbB-mRNA表达结果密切相关（P＜0．05）。结论：EGFR和c-erbB-2基因在人脑胶质中普遍表达,且随胶质瘤恶性程度增高而表达增强,EGFR和c-erbB-2基因共表达在人脑胶质瘤发生发展过程中发挥重要作用。     

汶川大地震颅脑损伤的时空特点及救治策略

目的 分析汶川大地震颅脑外伤的时空特点、临床特点,探讨救治时机、治疗方式选择. 方法 对我科在2008年5月12日四川汶川8级特大地震中92例颅脑外伤伤员诊治进行总结分析. 结果 收治地震颅脑伤伤员92例,全部来源于成都西北部平原地区.其中震后早期12 h内收治76例.开展手术10例,死亡3例. 结论 在汶川大批地震伤员早期颅脑外伤所占比例大,病情变化快.就诊伤员均来源于交通便利的平原地区.入院后早期开展急救手术治疗对提高地震颅脑伤的救治成功率有显著的效果.