沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位及抗原性研究

目的分析沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位并探讨其抗原性。方法利用PCR技术获得衣原体CT841基因,将基因序列克隆到载体pGEX6p,转化大肠杆菌XL1-blue,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT841。融合蛋白经纯化后免疫小鼠制备特异性抗体,间接免疫荧光法分析CT841在感染细胞中的分布特征;ELISA法分析CT841的抗原性。结果CT841原核表达重组体成功构建;CT841在感染细胞的表达模式与主要外膜蛋白MOMP相似,而与衣原体蛋白酶样活性因子CPAF及包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同;CT841与衣原体感染患者、猴、鼠血清均发生强烈的免疫反应。结论沙眼衣原体蛋白酶CT841是定位于衣原体菌体上的免疫优势抗原。     

肺炎嗜衣原体热休克蛋白10经TLR2及TLR4调控THP-1分泌TNF-α

目的 探讨肺炎嗜衣原体(Cpn)热休克蛋白10(HSP10)诱导人单核细胞分泌炎症因子的作用及Toll样受体(TLR)2、TLR4与此作用的相关性.方法 制备Cpn HSP10(CHSP10)纯化蛋白,去内毒素活性后用不同浓度(0.5、1、5、10、20、30μ/ml)刺激THP-1细胞0、6、12、24、36、48、60 h,并比较蛋白不同处理组别中TNF-α的水平差异;以间接免疫荧光及RT-PCR鉴定THP-1细胞上的TLR4及TLR2;分离C3H系野生型和TLR4缺陷型小鼠巨噬细胞,以CHSP10刺激后检测TNF-α水平;用抗TLR2/TLR4单克隆抗体预孵育细胞,ELISA检测CHSP10刺激细胞前后TNF-α的变化.结果 CHSP10刺激THP-1细胞引起上清液炎症因子TNF-α水平显著增加,经加热等处理后蛋白诱生TNF-α的作用明显降低.THP-1细胞可检测到TLR2及TLR4的mRNA及蛋白表达,CHSP10诱生C3H系野生型小鼠细胞分泌的TNF-α明显高于TLR4缺陷型小鼠细胞,TLR2/4经单克隆抗体作用后均可显著降低CHSP10诱导THP-1分泌TNF-α的水平.结论 CHSP10可能作为炎症相关蛋白参与了Cpn对宿主细胞的致炎作用;并且TLR2及TLR4在该炎症刺激信号的传递过程中发挥一定的作用.     

椎体成形术中骨水泥量对椎体机械性能的影响

目的 探讨聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）和自固化磷酸钙骨水泥（CPC）的不同用量对骨质疏松性椎体强度和硬度的影响，明确恢复椎体强度及硬度所需的最小骨水泥用量。方法 取5具老年女性（65-73岁）脊椎标本（T6-L3），分解后压缩并测量其强度和硬度，将3ml,5ml,7ml PMMA和CPC注入压缩后的椎体，再测其强度和硬度，并与原来的强度和硬度进行比较。结果 所有椎体注入骨水泥后强度都得到恢复，注入5ml,7ml骨水泥后强度明显增加；注入PMMA后硬度都得到恢复，而注入CPC 5ml,7ml才能恢复椎体硬度。结论 骨质疏松性椎体骨折后，注入骨水泥可有效恢复椎体的强度和硬度，此结果可有利于指导椎体成形术的临床应用。     

沙眼衣原体ompA基因克隆及其在真核细胞中的表达

目的克隆D型沙眼衣原体(Ct)ompA基因,构建真核表达重组质粒,转染真核细胞,为核酸疫苗的研制作准备.方法用PCR技术从D型Ct基因组DNA中扩增ompA基因片段,重组入pUCm-T克隆载体.将pUCm-T/ompA中的ompA外源基因片段经酶切、连接等反应,亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体,进行序列分析和酶切鉴定后,运用脂质体将重组体pcDNA3.1/ompA转染HeLa细胞,免疫组化法观察目的的基因的表达.结果从D型Ct基因组DNA中扩增出特异的ompA基因片段;序列测定证实与GenBank登陆的D型Ct一致;重组质粒pcDNA3.1/ompA在HeLa中获得表达.结论Ct ompA基因能够在体外真核细胞表达,为进一步研究Ct致病机制及DNA疫苗的研究提供理论依据.     

Steffee固定治疗腰段脊柱骨折脱位24例

1989年以来,我们采用Steffee内固定治疗重度胸腰段脊柱骨折脱位24例,收到良好效果。1 资料及方法 男18例,女6例,年龄22～59岁。交通事故伤16例,高处坠落伤5例,塌方直接砸伤3例。骨折脱位17例,爆裂骨折7例。平均固定节段为3.5(3～6)个椎体。     

自体髂骨膜游离移植股骨头再生软骨的形态学观察

目的 观察大面积自体游离髂骨膜移植于狗股骨头后的形态学变化。方法 １６只成年健康杂种狗随机分为２组，实验组１２只，对照组４只。咬除右侧股骨头关节软骨近端２／３，用纤维蛋白粘合剂将髂骨膜粘附于修整好的股骨头上并固定４－６针；对照组仅咬除软骨。术后２，４，８，１２周分批处死动物，移植部位取材作光镜，电镜观察。     

大鼠骨髓间充质干细胞的优化获取及生物学鉴定

目的 优化骨髓间充质干细胞的体外获取方法并鉴定。方法 取幼年SD大鼠骨髓，分离骨髓间充质干细胞，观察细胞形态特征、生长状况及表面抗原表达。结果 分离培养的细胞有两种不同的形态，一种为小梭形细胞，一种为大扁平细胞。第9代以前生长性状稳定，增殖能力强，细胞倍增时间为48．2h；超微结构显示为早期幼稚细胞形态；免疫细胞化学检测细胞表达CD44、CD54、CD71，但不表达CD34、CD68、层粘连蛋白；在有限的传代数内，抗原表达无改变；与传统方法相比，细胞纯度高。结论 分离培养的细胞成分单一，具有干细胞特性，适用于干细胞生物学和组织工程学的研究。     

Insulin-like Growth Factor-Ⅰ Gene Cloning and Protein Expression in Bovine Trabecular Meshwork Tissue and Cells

Primary open- angle glaucoma(POAG) is aleading cause of blindness,which involves opticneuropathy accompanied by characteristic visualfield defects and is often associated with elevatedintraocular pressure due to disturbance of aqueoushumor outflow through the trabecular meshwork(TM) [1] .The pathophysiology of the TM inPOAG has been characterized by an increase in ex-tracellular matrix components and a decrease in thenumber of TM cells[2 ] .Polypeptide growth factorsare critical modulator…     

住院医师培训在我国医学教育中的传承与融合

住院医师规范化培训是我国临床医学教育中的重要组成部分,加强住院医师规范化培训在我国临床医学教育中的传承与融合是当前医学教育的热点问题之一,也是目前需要完善和发展与我国国情相适应的临床医师培养模式的基本制度。住院医师规范化培训是培养高质量临床医师成长的必由之路,是改善我国目前不同地区医疗水平发展差异的重要举措,也是当前临床医学教育改革与发展的必然趋势,更是保障我国人民健康和实现健康中国的重要环节。文章通过分析住院医师规范化培训在我国临床医学教育中传承、融合与临床医学教育发展的实践方式、重要性及健康中国的关系这一问题作一探讨。