胰岛素对缺血再灌注心肌超微结构和细胞凋亡的影响

目的:探讨极化液(胰岛素)对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:选择健康雄性家兔48只,按随机抽签法分为3组:对照组,胰岛素组,葡萄糖-钾-胰岛素(glucose-insulin-potassium,GIK)组,每组16只。制备兔心肌缺血再灌注损伤模型,分别用GIK、胰岛素、生理盐水干预分组。再灌注结束后检测心肌梗死面积,在电镜下观察心肌细胞的超微结构,原位末端标记(TUNEL)法测定凋亡心肌细胞,免疫组化SP法测定原癌基因蛋白(Bcl-2),Fas的含量。结果:与对照组比较,GIK及胰岛素组家兔心肌细胞超微结构表现为损伤减轻,心肌梗死面积明显减少犤GIK组(38.9±4.33)%,胰岛素组(40.8±5.22)%,对照组(54.42±4.27)%犦(q=4.32,3.95,P<0.05),凋亡指数犤GIK组(1.38±0.82),胰岛素组(1.28±0.54),对照组(2.15±0.19)犦(q=0.65,0.72,P<0.05)和Fas含量显著减少(q=0.07,0.06,P<0.05),Bcl-2含量增加(q=0.14,0.11,P<0.05)。GIK组和胰岛素组心肌细胞凋亡指数及Fas,Bcl-2蛋白含量比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:GIK具有抗缺血再灌注损伤的作用,其机制可能是通过胰岛素调节Bcl-2和Fas介导的心肌缺血再灌注细胞凋亡而实现。     

AngⅡ对人心房肌细胞膜钙通道电流的影响及卡维地洛的拮抗作用

目的:观察AngⅡ对人心房肌细胞膜钙通道电流的影响及卡维地洛的拮抗作用,为应用卡维地洛治疗房性心律失常提供实验基础。方法:急性分离单个人心房肌细胞,采用全细胞膜片钳方法记录L-型钙电流(LCaL)。实验分4组:对照组,AngⅡ(0.1μmol/L)组,卡维地洛(1μmol/L)组,AngⅡ+卡维地洛组。结果:与对照组相比,0.1μmol/LAngⅡ使人心房肌细胞膜LCaL峰值电流密度明显增加(-12.74±1.65vs-5.78±0.82pA/pF,P<0.05)。1μmol/L卡维地洛对人心房肌细胞膜ICa-L无明显影响(-5.72±0.77pA/pF).但可拮抗AngⅡ的作用;AngⅡ+卡维地洛组的ICa-L峰值电流密度(-8.03±0.84pA/pF)与AngⅡ组相比有显著差异(P<0.05)。结论:AngⅡ对人心房肌细胞具有明显的电生理学作用,0.1μmol/LAngⅡ可促进人心房肌细胞膜ICaL.卡维地洛可拮抗AngⅡ对人心房肌细胞膜ICaL的作用。     

与人脐动脉平滑肌细胞共培养的人脐静脉内皮细胞的生物学特性

目的：通过共培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical Venous endothelial tells，HUVEC)与人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical arterial smooth musele cells，HUASMC)，初步探讨观察共培养的HUVEC的形态和增殖特性及经皮冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)后再狭窄的机制。方法：用共培养装置将体外同时培养在一个培养孔中的HUVEC和HLASMC分离。在倒置显微镜下观察单独培养和共培养HUVEC的生长状态和形态；采用免疫荧光法标记细胞，流式细胞仪测定荧光强度和细咆周期结果：共培养的HUVEC逐渐转变为长梭形；单独培养的HUVEC仍保持鹅卵石样。单独培养的和共培养的HUVEC处于细胞周期G0／G1期和G2+S期的百分率为：(70&;#177;3)％和(81&;#177;5)％；(22&;#177;4)％和(14&;#177;4)％。二者均有Cyclin D的表达，但后者的表达显著低于前者。结论：共培养的HUVEC低血清干预48h形态逐渐变为长梭形，更接近于在体形状；而单独培养的HUVEC仍保持原鹅卵石状。此外，前者的增殖活性也显著低于后者。     

提高免疫酶技术检测HFRS病毒抗原敏感性的初步研究

以磷苯二胺为辣根过氧化物酶底物显色剂的ELISA双抗体夹心法检测HFRSV抗原中,用四甲基联苯胺替代邻苯二胺,用生物素-抗生素蛋白的BA-ELISA和高效价抗HFRSV的McAb进行McAb-ELISA,使检测抗原的敏感性分别提高4倍以上。如果四甲基联苯胺与BA-ELISA或与McAb-ELISA联合应用,则比原ELISA敏感16倍以上。     

测定HFRS患者血清中特异性抗体方法初探

作者建立了检测HFRS患者血清特异抗体的捕获ELISA和阻断ELISA,并与间接酶染色和间接免疫荧光抗体技术进行了比较。四种方法的阳性检出率相同。血清的几何平均滴度,捕获ELISA比IFAT高32倍;阻断ELISA、酶染色及IFAT无显著差异。但应用不同抗原,ELISA检测血清滴度亦有不同。     

维生素D3和华法令诱导的大鼠动脉钙化模型特点

目的探讨维生素D3联合华法令对大鼠动脉钙化的作用,为心血管疾病的康复预防措施介入提供基础研究数据.方法实验选用12只4周龄雄性SD大鼠,随机分为钙化组和正常组,每组6只.钙化组给予皮下注射维生素D3 3×105 U/(kg·d),持续3 d,同时华法令15 mg/(100g·12 h),持续4 d,制备大鼠动脉钙化模型.取腹主动脉制成石蜡切片von Kossa染色观察动脉钙化情况,同时取胸主动脉按RT-PCR方法检测骨保护素的表达,另取右侧胫骨测量骨密度.结果钙化组大鼠主动脉yon Kossa染色见中膜有成片或局灶黑色深染区域,为主动脉的钙化部位.正常组主动脉壁骨保护素mRNA相对含量[(45.6±0.6)%]明显高于钙化组[(24.6±0.4)%](P＜0.05).正常组大鼠胫骨骨密度[(0.108±0.032)g/cm2]高于钙化组[(0.082±0.038)g/cm2],但差异无显著性意义(P＞0.05).结论华法令和维生素D3能诱导大鼠主动脉中膜钙化,钙化的主动脉局部骨保护素的表达水平降低.     

不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响

目的:观察不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响。方法:将体外培养3代的大鼠主动脉内皮细胞分为对照组及不同强度(0.5,1.0,5.0,10.0,100.0,500.0Gs)磁场组。磁场作用时间为48h,用四唑盐比色法测定细胞增殖。结果:与对照组相比,0.5,1.0,5.0Gs磁场组细胞增殖显著高于对照组(分别为0.301±0.023,0.308±0.042,0.294±0.025和0.230±0.026;t=11.20,8.65,7.92;P<0.05);10.0Gs磁场组细胞增殖与对照组相比无明显差异(0.228±0.034和0.230±0.026;t=0.26;P>0.05);100.0Gs和500.0Gs磁场组细胞增殖显著低于对照组(分别为0.173±0.022,0.166±0.015和0.230±0.026;t=9.17,11.68;P<0.05)。结论:0.5～5.0Gs的恒磁场可以促进大鼠主动脉内皮细胞的增殖,而100.0Gs以上恒磁场可抑制内皮细胞增殖。     

阿普卡林对低氧—复氧乳鼠心肌细胞保护作用的机制

目的 探讨低氧／复氧(H／R)对心肌细胞内Ca^2+浓度([Ca^2+]i)的影响。以及阿普卡林减轻H／R过程中钙超载的作用。方法 采用SD大鼠乳鼠(n=80)进行心肌细胞培养，用Ca^2+荧光指示剂Fluo-3／AM负载30min。然后分3组：(1)正常对照组；(2)H／R组：细胞低氧30min／复氧30min：(3)阿普卡林组：先加入终浓度为100μmol／L的阿普卡林，再行低氧30min／复氧30min。于两个实验组接受低氧处理前及刚开始复氧时、复氧30min后用激光共聚焦显微镜技术检测3个组心肌细胞[Ca^2+]i的变化。实验重复8次，共观察24个细胞。结果 对照组心肌细胞[Ca^2+]i荧光强度和荧光光密度值较低，分别为645．5U，80．3U及O．5％，O．3％。低氧30min后复氧即刻，[Ca^2+]i荧光光密度值开始增加，复氧30min后[Ca^2+]i荧光强度和荧光光密度值显著增高(与对照组比较，P&;lt;O．01)。而阿普卡林组细胞内荧光光密度值显著低于H／R组(χ^2=20．51，P&;lt;O．01)。结论 心肌细胞H／R导致钙超载；而阿普卡林有明显减轻心肌细胞H／R时Ca^2+超载的作用，从而保护心肌细胞。