两性霉素B治疗免疫功能低下患者侵袭性真菌感染

目的：观察国产两性霉素B对免疫功能低下患者侵袭性真菌感染（IFI）的临床疗效及安全性。方法：81例免疫功能低下合并侵袭性真菌感染患者使用普通两性霉素B，剂量为5～50mg／d，用药7～66d，平均24．5d，每位患者平均累积剂量605mg。结果：两性霉素B临床总有效率为75．7％0，真菌清除率为66．7％，不良反应发生率寒战、发热58．0％，低血钾44．4%，消化道18．5％，肾功能损害14．8％。结论：国产两性霉素B抗真菌谱较广，疗效好，但须合理用药，定期监测肝肾功能、血钾水平。     

茵陈颗粒治疗新生儿高胆红素血症效果分析

目的 探讨茵陈颗粒治疗新生儿高胆红素血症的临床疗效及退黄机理.方法 选择2012年8月至2013年7月我院新生儿科收治的高胆红素血症新生儿,抽签分为观察组和对照组,均给予原发病治疗、光疗及口服微生态制剂,观察组加服茵陈配方颗粒（2g/包）每次1/3包,3次/天,共6天.两组患儿治疗前、治疗第4天、第7天分别检测血清总胆红素水平,收集每日尿液、粪便,测定并比较两组粪便中总胆红素、直接胆红素、尿胆原及尿液中胆红素、尿胆原含量.结果 研究期间共入选67例新生儿高胆红素血症患儿,其中观察组28例,对照组39例.两组患儿治疗前血清总胆红素值差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗后观察组血清总胆红素下降值明显高于对照组[第4天：（107.3＆#177;49.4） μmol/L比（87.6＆#177;43.4） μmol/L,第7天：（178.4＆#177;53.3） μmol/L比（144.5＆#177;48.8） μmol/L,P＜0.05].观察组每日粪便有形成分总量与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;观察组每日粪便中总胆红素及直接胆红素含量均高于对照组[第1天：总胆红素（3.44＆#177;1.17） μmol比（2.26＆#177;1.02） μmol,直接胆红素（2.42＆#177;0.86） μmol比（1.76＆#177;0.92）μmol,第4天：总胆红素（1.96＆#177;1.33） μmol比（1.32＆#177;1.28） μmol,直接胆红素（1.62＆#177;1.13） μmol比（0.98＆#177;0.65）μmol,P＜0.05];两组粪便中尿胆原及尿液中尿胆红素、尿胆原均阴性.结论 中药制剂茵陈颗粒通过减少胆红素肠肝循环,增加粪便中胆红素排出,从而加快黄疸消退,可作为治疗新生儿高胆红素血症的辅助药物.     

RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对ECV304细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨利用RNA干扰技术下调Smad4基因表达对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响，初步了解Smad4在血管生成中的作用。方法：设计并合成靶向人Smad4基因的小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）片段siRNA1和siRNA2，脂质体介导转染入人脐静脉内皮细胞株ECV304。应用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测转染前后Smad4基因表达水平；应用细胞周期分析和羧乙基锗倍半氧化物（6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester，CFSE）－流式细胞仪检测ECV304细胞转染前后细胞增殖能力的变化；通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化。结果：从2条siRNA中成功筛选出1条siRNA，于RNA和蛋白水平可明显下调Smad4基因的表达；ECV304细胞转染Smad4的siRNA后，细胞的增殖和迂移能力明显增强。结论：利用RNA干扰技术能够筛选出高效的特异阻断Smad4基因表达的siRNA；Smad4基因表达下调能够明显促进血管内皮细胞的增殖和迁移。     

大剂量化疗治疗小儿急性淋巴细胞白血病疗效和患儿生存质量观察

大剂量化疗方案是目前治疗小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)的有效手段,基层医院由于受硬件条件和医护人员业务水平限制,不能很好地开展大剂量化疗方案的治疗.现就我院收治的ALL和NHL患儿16例,总结分析如下.     

硼替佐米联用组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导血液肿瘤细胞凋亡的效率

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)抑制剂曲古菌素A (trichostatin A, TSA)、Apicidin与Bortezomib单药及联合应用对恶性血液病肿瘤细胞凋亡的影响.方法 应用200～2 000 nmol/L TSA、 Apicidin, 5～80 μmol/L Bortezomib分别处理恶性血液病肿瘤细胞株K562、 SHI-1、 Jurkat 24 h, 用流式细胞仪检测细胞凋亡.根据流式细胞术结果选取TSA 800 nmol/L,Apicidin 400 nmol/L分别与5～80 μmol/L Bortezomib联合作用于K562细胞,TSA 1 000 nmol/L, Apicidin 400 nmol/L分别与Bortezomib联合作用于SHI-1细胞,TSA 600 nmol/L, Apicidin 600 nmol/L分别与Bortezomib联合作用于Jurkat细胞.以上药物作用24 h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡并绘制浓度-凋亡曲线.分别以Apicidin 200 nmol/L,Bortezomib 20 μmol/L及Apicidin 200 nmol/L 与Bortezomib 5 μmol/L联用作用于K562细胞24 h, 用Western blot检测 Bcl-XL蛋白的表达差异.结果 TSA、Apicidin、Bortezomib均可促进K562、Jurkat、SHI-1细胞凋亡.TSA、Apicidin分别与Bortezomib联用,可导致K562、SHI-1细胞系凋亡率的明显提高,而对 Jurkat 细胞系没有明显影响.Bcl-XL蛋白在Apicidin与Bortezomib联用24 h组较对照组及单一药物处理组表达水平明显下调.结论 小剂量Bortezomib联合TSA或Apicidin应用于K562、SHI-1细胞系,可以明显提高细胞凋亡率,此时,TSA、Apicidin用量较用单药时显著减少.     

RhoC/ROCK-Ⅰ信号通路的过度激活对卵巢癌细胞恶性行为的影响

目的 探讨 RhoC/ROCK-Ⅰ的过度激活对卵巢癌细胞生物学特性的影响.方法 RT-PCR 及 Western blot检测 RhoC 及ROCK-Ⅰ在卵巢癌细胞 SW626、Skov-3、A2780 和 Caov-3 中 mRNA 及蛋白的表达水平;将携带ROCK-Ⅰ组成性激活突变体 p160ROCK-Ⅰ△3的质粒(pCAG-myc-p160ROCK-Ⅰ△3)以脂质体介导,转染上述 4 株人卵巢癌细胞,划痕试验和 Boyden 小室检测转染前后 4 种卵巢癌细胞的体外迁移与侵袭能力的变化,MTT 比色法测定 p160ROCK-Ⅰ△3 对细胞增殖能力的影响.结果 RhoC 和 ROCK-Ⅰ在 4 种卵巢癌细胞中呈不同程度表达,其中 RhoC 的表达水平与癌细胞侵袭力和迁移能力呈正相关(r=0.95,P<0.01),转染 pCAG-myc-p160ROCK-Ⅰ△3后,4 株细胞的侵袭能力与对照组比较分别提高31.1%、33.0%、24.5%和39.4%;迁移能力分别提高33.9%、33.0%、25.0%和40.2%.各株细胞的增殖能力未显示出明显的变化.结论 RhoC/ROCK-Ⅰ信号通路的活性与卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移能力相关,ROCK-Ⅰ活性的提高可显著增强卵巢癌肿瘤细胞的体外侵袭和迁移能力.     

Telmisartan but not Valsartan Inhibits TGF-β-mediated Accumulation of Extracelluar Matrix via Activation of PPARγ

Glomerulosclerosis, defined as phenotype transition of mesangial cell and deposition of extracelluar matrix, remains a chronic disease with excessive morbidity and mortality. The molecular mechanism underlying the suppression of mesangial cell activation is not fully understood. Since activation of peroxisome proliferators-activated receptor γ (PPARγ) has been proposed to decrease the effects of transforming growth factor-β (TGF-β) on glomerulosclerosis, we examined here whether and how telmisartan, an angiotensin Ⅱ type 1 receptor blocker with PPARγ-modulating activity, inhibited TGF-β-induced glomerulosclerosis in rat glomerular mesangial cells. Protein levels of PPARγ were detected by Western blot. Activation of PPARγ response element (PPRE) was analyzed by luciferase assays. Deposition of extracelluar matrix was tested by confocol laser scanning. The results showed that telmisartan, but not valsartan, another angiotensin Ⅱ type 1 receptor blocker, up-regulated PPARγ protein levels in a dose-dependent manner (P<0.05). Activation of PPRE, represented by luciferase activity, was also increased with higher concentration of telmisartan in a dose-dependent manner (P<0.05). Furthermore, telmisartan inhibited TGF-β-induced α-smooth muscle actin expression and collagen IV secretion in mesangial cells. GW9662, an inhibitor of PPAR-γ, blocked the inhibitory effects of telmisartan on TGF-β-induced glomerulosclerosis in mesangial cells. Our study indicates a benefit of telmisartan as a PPARγ agonist against TGF-β-induced mesangial cells activation in renal glomerulus. It may provide possibility that telmisartan works as a potential agent against diabetic nephropathy and hypertensive renal disease.     

ROCK-I蛋白表达或活性的改变对人卵巢癌细胞运动表型的影响

目的:探讨ROCK-I蛋白表达或活性改变对人卵巢癌细胞运动表型的影响。方法:将ROCK-I的反义寡核苷酸(ASODN)或其显性激活突变体p160Δ3用脂质体介导,转染人卵巢癌细胞系CAOV-3细胞,用RT-PCR与W estern blot印迹法检测转染前后ROCK-I和p160Δ3 mRNA和蛋白的表达;rhodam ine-phalloid in染色显示ROCK-I ASODN和p160Δ3对细胞骨架的影响;Transwell小室和划痕实验观察ROCK-I表达降低及其活性提高后卵巢癌细胞系CAOV-3运动能力的改变。结果:转染ROCK-I ASODN后,CAOV-3细胞内ROCK-I蛋白的表达明显减少,最大抑制率可达49%;转染的p160Δ3在细胞内获得有效表达。转染ROCK-I ASODN后CAOV-3细胞伪足消失,肌动蛋白纤维减少且变得无序,而转染p160Δ3后细胞伪足增多变长,肌动蛋白纤维亦明显增多,且沿细胞长轴分布。伤口愈合实验显示,ROCK-I ASODN明显抑制了CAOV-3细胞的迁移,p160Δ3则显著增强了其迁移能力;转染10μmol/L或20μmol/L ROCK-I ASODN后细胞的随机运动能力分别为其对照组的(72.0±1.3)%和(55.9±2.5)%,定向运动能力分别为其对照组的(72.5±3.4)%和(54.5±1.9)%;转染p160Δ3后,与对照组相比细胞的随机运动能力提高(38.7±1.2)%,定向运动能力提高(40.2±2.6)%。结论:ROCK-I蛋白表达或活性改变与人卵巢癌细胞CAOV-3的运动能力密切相关,ROCK-I可能成为治疗卵巢癌肿瘤细胞转移的新靶点。