蛛网膜下腔出血后早期海马MMP-9的表达与海马神经元凋亡的相关性研究

目的 观察大鼠蛛网膜下腔出血后早期海马基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达和海马神经细胞凋亡,及两者之间的关系,探讨MMP-9参与早期脑损伤的机制.方法 成年雄性SD大鼠108只,分为假手术组和蛛网膜下腔出血组.采用经额蛛网膜下腔插管至Willis环方法 建立蛛网膜下腔出血模型,在蛛网膜下腔出血后6、12、24、48、72 h,应用明胶酶谱法检测大鼠海马MMP-9的活性;免疫组化方法 检测细胞外基质层粘连蛋白的表达;同时应用原位末端标记法检测海马神经元凋亡.结果 明胶酶谱法结果 显示:大鼠蛛网膜下腔出血后12 h海马MMP-9活性明显升高,24 h达到高峰,并于48 h开始下降,72 h时仍高于假手术组水平(P<0.01);免疫组化结果 显示:大鼠蛛网膜下腔出血后12 h海马层粘连蛋白表达开始下降,24 h降至最低,并于48 h表达开始升高,蛛网膜下腔出血后72 h海马层粘连蛋白表达仍低于假手术组水平(P<0.01);原位末端标记法检测显示大鼠蛛网膜下腔出血后12 h海马凋亡阳性细胞数开始增加,24 h达到高峰,并于48 h表达开始下降,蛛网膜下腔出血后72 h海马凋亡阳性细胞数仍较高(P<0.01).结论 大鼠蛛网膜下腔出血后MMP-9可能通过降解其底物层粘连蛋白,导致海马神经细胞发生失巢凋亡,参与早期脑损伤的病理过程.     

非糖尿病尿路感染患者在治疗中监测血糖的价值分析

目的 通过动态监测非糖尿病患者尿路感染治疗前后空腹血糖(Glu)和外周血中白细胞(WBC)变化,了解该类患者Glu升高是异常升高还是急性泌尿系感染的应激反应所致.方法 收集153例确诊尿路感染患者的资料,包括89例血糖正常患者以及64例血糖调节受损(IGR)患者,分别统计入院时、采集尿培养时以及好转出院时的Glu和WBC结果,80例健康体检者作为正常对照.结果 89例血糖正常患者中,46例院内感染患者入院时与出院时以及正常体检人群的Glu和WBC差异无统计学意义(P＞0.05),采集尿培养时的Glu和WBC结果均高于入院以及出院和体检人群(P ＜0.05);43例入院时即尿培养阳性的患者Glu和WBC均高于出院及正常体检人群(P＜0.05);89例患者采集尿培养时的Glu和WBC升高比值成一定的正相关,相关系数r=0.801(P ＜0.05).64例IGR患者中,30例院内感染患者入院时与出院时的Glu和WBC差异无统计学意义(P＞0.05),但Glu高于正常对照组(P＜0.05),采集尿培养时的Glu和WBC结果均高于入院以及出院和体检人群(P＜0.05);34例入院时即尿培养阳性的患者Glu和WBC均高于出院及正常体检人群(P＜0.05);64例患者采集尿培养时的Glu和WBC升高比值成一定的正相关,相关系数r=0.658(P ＜0.05).结论 非糖尿病尿路感染患者Glu升高可能是应激反应所致,Glu检测可作为非糖尿病尿路感染患者监测病情,评估预后的一种方法.     

脑脊液清蛋白及免疫球蛋白G在神经系统炎性疾病测定中的意义

目的探讨脑脊液清蛋白(CAlb)及脑脊液免疫球蛋白G(CIgG)对神经系统炎性疾病测定的意义。方法回顾性分析该院相关临床科室2016年4月至2017年3月行脑脊液检查的患者104例,按是否为炎性疾病分为炎性组59例和非炎性组45例。分别行血清清蛋白(SAlb)、CAlb和CIgG的检查,并计算清蛋白指数(QAlb),QAlb=CAlb/SAlb进行对比研究。结果做对数转换后,炎性组ln(CIgG)为4.36±1.00,ln(CAlb)为6.31±0.77,ln(QAlb)为2.57±0.79,与非炎性组[ln(CIgG)3.53±0.59,ln(CAlb)5.52±0.50,ln(QAlb)1.88±0.47]相比,差异均有统计学意义(P0.05)。结论不同神经系统疾病,血脑屏障损害程度不同,鞘内IgG合成不同,CIgG、CAlb、QAlb能作为判断血脑屏障损害的指标,也能用于神经系统炎性和非炎性疾病的辅助诊断。CIgG的升高也可能提示疾病的发生与自身免疫性相关。     

切断后轴突再生方式和速度的初步研究

目的 建立离体中枢神经系统轴突机械切断模型,观察机械切断后轴突的再生方式和速度. 方法 离体培养新生小鼠皮质神经块,免疫荧光特异染色标记轴突和树突.机械切断轴突建立模型.通过追踪黏附在轴突残段表面细胞点的移动来观察轴突再生方式,并测量再生轴突的生长速度. 结果 (1)在机械切断小鼠皮质神经块轴突后,可见再生轴突从断端长出,分布在轴突残段上的细胞点随着轴突的再生而越过切痕散布到远端.(2)切断组再生轴突在第24,48小时的生长速度分别为(118±32)μm/d、(72±41 )μm/d,而对照组未切断轴突生长速度分别为(41±17)μm/d、(32±19)μm/d. 结论 切断后轴突再生方式是轴突残段生长延伸,而非轴突残端出芽生长,并且切断后再生轴突生长速度快于未切断轴突.     

体外神经块轴突机械切断再生模型的建立

目的 建立适用于机械损伤后轴突再生研究的模型.方法 微玻璃管接种神经块法或常规法分别接种神经块至培养皿,免疫荧光和RT-PCR检测胞体和树突在轴突区域的分布情况.显微镜下机械切断轴突后,免疫荧光和RT-PCR检测再生轴突的纯度.结果 相对于常规神经块接种法,在使用微玻璃管接种法的神经块外1/2轴突中,免疫荧光和RT-PCR检测结果显示细胞核和树突为阴性.在使用微玻璃管接种法的神经块切断后再生轴突中,免疫荧光和RT-PCR检查结果显示树突和细胞核未混入再生轴突.结论 微玻璃管接种神经块能获得足够纯净的轴突和再生轴突.机械切断模型的建立为创伤后轴突的分子研究奠定了基础.     

常见自身免疫性疾病中血清25-羟维生素D水平的差异

目的：本研究的目的是调查常见自身免疫性疾病患者血清25-羟维生素 D[25（OH）D]的水平状况,以及不同自身免疫性疾病中是否存在差异。方法本研究的调查对象为2012年1月至2013年4月来该院就诊的自身免疫性疾病患者共137例,其中风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）71例,系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）36例,干燥综合征（Sjogren syndrome,SS）16例和强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）14例。使用罗氏电化学技术检测其血清25（OH）D 的水平,比较不同自身免疫性疾病患者25（OH）D 是否存在差异,同时统计分析不同种类疾病25（OH）D 水平正常、不足和缺乏的比例是否存在差异。结果不同自身免疫性疾病患者血清25（OH）D 水平之间差异有统计学意义（P ＝0.006）,RA 组显著高于其他组;RA、SLE、SS 和 AS 组的25（OH）D 缺乏的比例分别为29.6％、52.8％、62.5％和57.1％,SLE、SS 和 AS 组显著高于 RA 组（P＜0.05）。结论常见自身免疫性疾病患者血清25（OH）D 缺乏比较普遍,需加强维生素 D 补充。     

国产DG3080型自动酶标洗板机的临床评估

洗板机是医院开展酶标检测重要设备之一，其作用是通过清洗实现酶标检测过程中结合相与游离相的分离。洗板机清洗的自动化代替了手工操作，减少了人为因素的影响，使检测结果更加真实可靠。目前，国内大部分医疗单位使用的全自动洗板机均是国外进口产品，价格昂贵，常因维修不及时导致仪器的搁置，使许多医院重新采用了落后的手工操作。南京华东电子集团医疗装备有限公司新生产了DG3080型自动洗板机，我们对其性能进行了测试，并和进口的洗板机以及手工操作进行了比较，现将相关结果报告如下。     

抗C3d单抗制备及免疫金层析法的建立

目的 研制抗C3d单抗,建立免疫金层析法检测血浆补体片段C3d,判断补体活化情况。方法 用菊糖—C3d作抗原,免疫Balb/c小鼠,并制备杂交瘤,以羊抗C3包被酶标反应板并结合C3d为检测板,筛选分泌抗C3d单抗的杂交瘸。利用protein G柱亲和层析提取抗C3d单抗IgG和C3d结合物,进行SDS-PAGE电泳,鉴定单抗的特异性。将抗C3d单抗标以胶体金,制备免疫金层析测试余。通过在免疫金中加未标金的抗C3d单抗(游离单抗)来调整试纸条的灵敏度,并测定C3d。结果 SDS-PAGE电泳图上,出现IgG的重链、轻链、及C3d 3个条带;金标记抗C3d单抗的试条(Ⅰ)测C3d的灵敏度在6—10ng/m1,当加入0．1μg/m1游离抗C3d单抗(Ⅱ)后,灵敏度为10—15ng/m1。利用两种试条灵敏度的不同,对轻、中重型肝炎检测,结果轻型肝炎患者在纸条Ⅰ上阳性率为83．3％(25/30),纸条Ⅱ全为阴性,中重型肝炎者在纸条Ⅰ、Ⅱ的阳性率为100％(30/30)。结论 用本试验建立的免疫金层析法测定肝炎患者血浆C3d水平,可判断补体活化程度,辅助乙型肝炎轻、重分型。     

抗Hp—IgG动态观察幽门螺杆菌感染

通过幽门螺杆菌（ＨＰ）感染患者血清中特异性抗ＨＰ－ＩｇＧ的动态测定同＾１４Ｃ－尿素呼气试验相比较谰估前者在抗Ｈｐ治疗效果判断中的意义。用酶联免疫吸附试验定量检测Ｈｐ感染患者治疗前后患者血清中抗Ｈｐ－ＩｇＧ水平。结果，治疗组病人血清中抗ＨＰ－ＩｇＧ水平明显下降，而未根除组病人血清中抗Ｈｐ－ＩｇＧ水平下降不显著，两组之间存在明显差异。动态观察病人血清中抗Ｈｐ－ＩｇＧ水平可作为判断抗ＨＰ治疗效果的一是     

四法筛查手术前或输血前病人梅毒螺旋体抗体的比较

目的　探讨TP ELISA、RPR、胶体金试纸和TPPA等四种方法在筛查手术前或输血前病人梅毒螺旋体抗体中的实用性和可行性。方法　用TP -ELISA、RPR、胶体金试纸和TPPA分别检测 5 0份阳性标本及 5 0份阴性标本。结果　RPR与TPPA阳性符合率为 82 % ,假阴性率为 18% ,假阳性率为 4% ;胶体金试纸与TPPA阳性符合率为 90 % ,假阴性率为 10 % ,阴性符合率10 0 % ;TP ELISA与TPPA阳性符合率为 10 0 % ,阴性符合率为 10 0 %。结论　TP ELISA是目前较为合适的筛查手术前或输血前病人梅毒螺旋体抗体的方法。