微小核糖核酸与肾细胞癌关系的研究进展

微小核糖核酸 (microRNA,miRNA) 是一类在转录后水平调节基因表达的小的非编码核糖核酸分子,参与生物体内多种生理病理过程,与肿瘤的发生、发展密切相关。研究发现,一些miRNAs在肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）患者样本中异常表达,提示miRNA在RCC的发病机制中发挥重要作用。本文就miRNAs 与RCC关系的研究进展作一综述。     

肾细胞癌患者血清外泌体miR-181a-3p表达水平的临床价值

目的探讨肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者血清外泌体微小核糖核酸-181a-3p(microRNA-181a-3p, miR-181a-3p)的表达变化,及其作为非侵入性辅助诊断RCC标志的临床价值。 方法收集2016年6月至2017年6月期间,南京总医院泌尿外科收治的未经治疗的79例RCC患者和75名年龄、性别匹配的健康体检者血清标本,分离血清外泌体并提取RNA。用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chai reaction,qRT-PCR)检测两组miR-181a-3p水平的2^-△Ct相对定量含量,并采用多种统计方法分析外泌体miR-181a-3p诊断RCC的效能。 结果qRT-PCR检测RCC患者血清外泌体miR-181a-3p的表达水平为0.264(0.095~0.782),较健康对照组[0.068(0.032~0.130)]明显上调(U=1022,P<0.001);同时,血清外泌体miR-181a-3p水平在早期(I/II期)RCC患者[0.202(0.105~0.543)]中也显著升高(U=699,P<0.001)。血清外泌体miR-181a-3p的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)区分RCC与健康对照者的曲线下面积(AUC)为0.828(95%CI：0.765~0.890),敏感度为72.2%,特异度为72.0%;诊断I/II期RCC患者的AUC为0.837(95%CI：0.771~0.902),敏感度和特异度分别为75.4%和72.0%。经逻辑回归分析,血清外泌体miR-181a-3p是RCC的独立危险因素(OR=6.662,95%CI：3.294~13.474,P<0.001)。 结论RCC患者尤其早期患者血清外泌体miR-181a-3p显著升高,其可作为非侵入性辅助诊断RCC的新型分子标志。     

miR-222-3p通过靶向调节Bim蛋白表达参与肾细胞癌的发生发展

目的: 检测miR 222 3p在肾细胞癌组织中的表达,探讨其参与肾细胞癌发生发展的分子机制。方法: 运用qRT PCR检测15对肾细胞癌组织和对应癌旁组织miR 222 3p的表达水平。生物信息学预测miR 222 3p的靶基因,荧光素酶报告实验验证其靶向调控作用。运用免疫组化和蛋白质印迹技术检测癌组织中靶基因蛋白表达水平。进一步通过脂质体瞬时转染技术实现肾细胞癌细胞株769 P中miR 222 3p过表达,采用流式细胞术检测miR 222 3p对细胞凋亡的影响。结果： qRT PCR结果显示,miR 222 3p在肾细胞癌组织的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。生物信息学预测显示,抗凋亡蛋白Bim是miR 222 3p潜在的靶基因。荧光素酶报告实验证实,过表达miR 222 3p可抑制含有Bim 3’ UTR的荧光素酶报告基因的荧光素酶活性,但对Bim 3’ UTR突变体的荧光素酶活性没有影响。免疫组化结果显示,肾细胞癌组织中Bim蛋白免疫组化阳性反应程度明显低于相应的癌旁组织（P<0.01）;蛋白质印迹结果进一步证实Bim蛋白在肾细胞癌组织中的表达较癌旁组织明显下调（P<0.01）。进一步在769 P细胞中瞬时过表达miR 222 3p后,发现Bim蛋白水平明显下调（P<0.01）,但Bim mRNA水平无明显变化。流式细胞术检测结果显示,过表达miR 222 3p可显著抑制769 P细胞的凋亡（P<0.01）。 结论： miR 222 3p可通过靶向作用于抑癌基因Bim表达抑制肾癌细胞的凋亡,在肾癌的发生发展中起重要作用,miR 222 3p/Bim轴为肾细胞癌治疗提供新的途径。     

急性冠状动脉综合征患者血浆氧化脂蛋白(a)水平

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆氧化脂蛋白(a)[ox-Lp(a)]水平的变化及机制。方法分别检测96例ACS、89例非ACS患者和100例健康人血浆ox-Lp(a)水平,冠状动脉造影确认冠状动脉病变程度。结果ACS组和非ACS组ox-Lp(a)水平均高于对照组,且ACS组ox-Lp(a)水平显著高于非ACS组。ACS组ox-Lp(a)/Lp(a)比值高于非ACS组和健康对照组,后两者中该比值无显著差别。ACS患者中ox-Lp(a)水平与冠状动脉病变程度相关(r=0.370,P=0.000),非ACS组中两者不相关(r=0.051,P=0.634)。多因素分析显示,ox-Lp(a)、TG水平及年龄解释ACS患者15.1%的病变程度。结论高ox-Lp(a)水平与ACS的发生、病变程度有关,有益于鉴别ACS。     

SLE患者血清氧化LDL水平检测分析

目的检测、分析SLE患者血清氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。方法采用ELISA检测47例SLE患者和42例健康对照者血清ox-LDL,同时对受检者常规血脂水平进行测定。结果SLE患者ox-LDL水平显著高于对照组[(143.40±65.36)mg/L vs(65.77±26.19)mg/L,P<0.01],总胆固醇、三酰甘油、LDL-胆固醇(LDL-C)和载脂蛋白B(apo B)等常规血脂水平也明显升高。以对照组ox-LDL水平的x-+s值为cut off值,SLE组37例高于此值(敏感性78.7%),健康对照组6例异常(特异性85.7%)。多因素分析显示,患者组ox-LDL水平与LDL-C显著正相关。结论SLE患者血清ox-LDL水平升高,检测ox-LDL水平有助于预测SLE患者As的发生风险。     

金线莲体外抑制LDL氧化的实验研究

目的:探讨金线莲(Anoectoch ilus roxburgh ii)的抗脂质氧化能力。方法:在体外用Cu2+介导低密度脂蛋白(LDL)氧化,加入各种剂量的金线莲乙醇提取液,通过测定LDL氧化过程中产生的共轭双烯含量、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量和电泳迁移率的变化,分析金线莲对LDL氧化易感性和脂质过氧化程度的影响。结果:金线莲浓度为1μl/m l时,将LDL的氧化延滞时间延长了1.5倍,从(8.8±0.4)m in至(13.0±0.8)m in。随着金线莲浓度的增加,LDL的氧化延滞时间逐渐延长。金线莲降低LDL的TBARS值呈剂量依赖性,同时,显著减慢LDL的电泳迁移率。结论:金线莲能有效地减小LDL的氧化易感性,降低LDL的脂质过氧化程度,具有一定的抗脂质氧化功能。     

糖尿病患者血浆氧化、丙二醛修饰低密度脂蛋白及其自身抗体水平

目的探讨血浆氧化及丙二醛（MDA）修饰低密度脂蛋白（LDL）及其自身抗体与糖尿病（DM）及其他血脂项目之间的关系。方法选择DM患者、正常对照组各60例。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定铜离子氧化型LDL（ox-LDL）、MDA修饰型LDL（MDA-LDL）及其自身抗体，同时对受检者血脂水平进行检测。结果DM患者血浆ox-LDL、MDA-LDL及其自身抗体水平均明显高于对照组（P〈0．01），分别与总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）呈高度正相关，而与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）呈负相关；且ox-LDL、MDA-LDL分别同其自身抗体呈高度正相关。结论DM患者ox-LDL、MDA-LDL及其自身抗体水平显著升高，可能参与动脉粥样硬化的发生、发展过程。     

血清脂蛋白(a)特异性循环免疫复合物的检测及临床应用

目的　建立人血清脂蛋白 (a) [Lp(a) ]循环免疫复合物 (CIC)酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测法 ,探讨人体内是否存在Lp(a) CIC及其临床价值。 方法　分别建立抗人IgG为包被抗体 ,酶标抗载脂蛋白 (a)和抗载脂蛋白B为检测抗体的Lp(a) CIC、低密度脂蛋白 (LDL) CICELISA检测法 ,并对16 0例冠心病患者和 2 90名对照人群进行分析。结果　两组相比 ,冠心病患者Lp(a) CIC ( 2 2 4±1 71AUvs 1 6 2± 1 5 0AU)、LDL CIC ( 2 77± 1 2 9AUvs 1 4 0± 0 92AU)水平均显著升高 (P <0 0 0 01)。LDL CIC水平分别与血浆LDL、胆固醇 (r =0 5 4 9)、载脂蛋白B (r =0 4 78)、总胆固醇 (r =0 4 13)、甘油三酯 (r=0 2 4 8)和Lp(a) (r=0 2 39)浓度正相关 (均P <0 0 0 0 1) ,与高密度脂蛋白、胆固醇 (r =- 0 30 8)和载脂蛋白A1(r=- 0 2 0 9)浓度负相关 (P <0 0 0 0 1)。Lp(a) CIC水平分别与血浆Lp(a) (r =0 5 77,P <0 0 0 0 1)、LDL胆固醇 (r =0 2 0 7,P <0 0 0 0 1)、载脂蛋白B (r =0 12 8,P <0 0 1)和总胆固醇 (r=0 14 5 ,P <0 0 1)浓度正相关 ,与高密度脂蛋白、胆固醇 (r=- 0 12 6 ,P <0 0 1)和载脂蛋白A1(r=- 0 0 96 ,P <0 0 5 )浓度负相关。LDL CIC与Lp(a) CIC水平亦相关 (r =0 313,P <0     

2型糖尿病及其微血管并发症患者血清miR-661水平变化及其辅助诊断价值

目的观察2型糖尿病(T2DM)及其微血管并发症(T2DMC)患者血清miR-661水平变化并分析其临床辅助诊断价值。方法用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测60例T2DM患者、60例T2DMC患者及60例健康对照者血清中miR-661水平,同时测定空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和糖化血红蛋白(HbA1c)等指标水平,ROC曲线、相关性分析及Logistic regression分析血清miR-661对T2DM及T2DMC的诊断价值。结果qRT-PCR结果显示,T2DM患者和T2DMC患者血清miR-661相对含量[中位数(四分位数)][M(P25,P75)]分别为230.1(83.6,426.2)fmol/L和441.3(212.9,1 021.0)fmol/L,与健康人对照组的118(63.6,192.4)fmol/L相比,均升高(U值分别为1 207和435,P均0.01);血清miR-661 T2DM的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.665(95%CI=0.565~0.765,P0.01),T2DMC的AUC~(ROC)为0.879(95%CI=0.821~0.938,P0.01),区分T2DM及T2DMC的AUC~(ROC)为0.694(95%CI=0.600~0.788,P0.01);相关性分析结果显示血清miR-661水平与FPG和LDL-C呈正相关(r值分别为0.291和0.149,P均0.05),与HDL-C呈负相关(r为-0.243,P0.01);进一步用单因素和多因素Logistic regression分析结果显示,血清miR-661是T2DM和T2DMC的独立危险因素(P均0.01)。结论血清中表达升高的miR-661是T2DM及T2DMC患者潜在辅助诊断标志物及独立危险因素。     

时间康复护理方案对脑梗死后吞咽障碍患者功能康复的影响

目的探讨时间康复护理方案在促进脑梗死后吞咽障碍功能恢复中的应用。方法将60例脑梗死后吞咽障碍患者分为观察组和对照组,对照组采用常规方案护理,观察组采用时间康复护理方案,比较2组的吞咽功能恢复情况及生活质量。结果观察组与对照组的总疗效分别为93.3%、73.3%,差异有统计学意义(P0.05)。观察组护理后的藤氏吞咽障评分高于对照组,洼田饮水试验评分低于对照组,生活质量高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论时间康复护理方案能够促进脑梗死后吞咽障碍的功能恢复,改善患者的生活质量,方法简便,值得推广。