端粒酶逆转录酶基因修饰人骨髓间质干细胞的实验研究

目的： 观察外源性hTERT基因的异位表达对人骨髓间质干细胞（MSCs）端粒酶活性及细胞生命周期的影响。方法： 将携带有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因和人端粒酶逆转录酶（hTERT）目的基因的质粒pEGFP-hTERT通过脂质体转染法转入人骨髓MSCs中，并用G418筛选法进行抗性克隆的筛选与扩增。通过RT-PCR和PCR-ELISA对转染前后hTERT mRNA的表达情况及其对端粒酶活性的影响进行检测。将转染细胞在EGF和bFGF的联合诱导下向神经元样细胞定向诱导分化，并用RT-PCR进行鉴定。结果： 未转染的人骨髓MSCs hTERT mRNA表达阴性，且端粒酶呈阴性而转染hTERT基因的人骨髓MSCs hTERTmRNA表达阳性，且端粒酶呈阳性。转染hTERT基因的人骨髓MSCs在体外已连续传到第35代，而未转染的人骨髓MSCs传到第20-25代左右已衰老死亡。 转染hTERT基因的人骨髓MSCs经EGF和bFGF的联合诱导后，较多细胞出现了典型的神经元样形态，且经RT-PCR检测表明，神经元特征性蛋白微管相关蛋白（MAP₂）和神经丝亚单位M（NF-M）表达增强。结论： 外源性hTERT基因可以在人骨髓MSCs中获得异位表达，并能诱导人骨髓MSCs的端粒酶活性。外源性hTERT基因的异位表达不仅可以使人骨髓间质干细胞的寿命明显延长而且不影响其维持干细胞的多向分化潜能特性。     

Foxp3 对肺癌细胞增殖及成瘤的影响

目的:研究转录因子Foxp3 在肺癌细胞中的高表达对肺癌细胞增殖及成瘤的影响。方法:利用脂质体转染法建立稳定高表达Foxp3 的NCIH-hFoxp3 肺癌细胞株。MTT 法观测NCIH-hFoxp3 及对照细胞的增殖。ELISA 法检测NCIH-hFoxp3 及对照细胞IL-8、IL-10 的分泌。建立移植瘤小鼠模型,观察成瘤情况。结果:成功建立高表达Foxp3 的NCIH-hFoxp3肺癌细胞株;与阴性对照相比,NCIH-hFoxp3 细胞增殖减慢,但成瘤能力强。NCIH-hFoxp3 细胞培养上清IL-8 表达量减低,IL-10 表达量升高。结论:高表达Foxp3 的肺癌细胞可能通过表达细胞因子改变局部生长的微环境,逃逸免疫监视,而促进肿瘤细胞的成瘤和发展。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与儿童体位性心动过速综合征的相关性

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子-T786C、第7外显子G894T突变与儿童体位性心动过速综合征(POTS)的相关性.方法 选择POTS患儿(POTS组)及健康儿童(健康对照组)各60例,提取静脉血基因组DNA,通过PCR扩增获得目的片段,限制性内切酶消化目的片段,计数基因型及突变基因频率.结果 eNOS基因第7外显子的G894T位点有3种基因型:GG、GT、TT.健康对照组14例发生G894T突变,其中纯合子3例,杂合子11例;POTS组24例发生G894T突变,其中纯合子6例,杂合子18例.POTS组突变基因型频率(纯合子+杂合子)和T等位基因频率高于健康对照组(P＜0.05).eNOS基因启动子T786C位点有3种基因型:TT、CC、TC,健康对照组12例发生T298C突变,其中纯合子3例,杂合子9例;POTS组23例发生T786C突变,其中纯合子6例,杂合子17例.POTS组基因型频率(纯合子+杂合子)和C等位基因频率高于健康对照组(P＜0.05).结论 G894T和T786C突变基因型频率可能为POTS发病的一个危险因子.     

贞芪扶正冲剂对颌面部鳞癌化疗患者生存质量的影响

目的:探讨贞芪扶正冲剂对颌面部鳞癌化疗患者生存质量的影响。方法:将272例颌面部鳞癌患者随机分为治疗组136例(口服贞芪扶正冲剂+化疗)与对照组136例(单纯化疗)。两组均采用平阳霉素+顺铂+甲氨蝶呤化疗方案。至少完成两个疗程的化疗,每疗程化疗前后进行生存质量对比评价。结果:治疗组与对照组比较,KarnofskyPS(KPS)评分改善者分别为80、26例次,第二疗程为87、30例次。两组KPS评分分布上的变化差异有统计学意义。结论:中药贞芪扶正冲剂为纯天然中草药制剂,辅助化疗可以改善患者的KPS评分值,增加患者的体重,稳定患者的白细胞数,减轻患者化疗并发症的发生率,从而提高患者的生存质量。     

糜蛋白酶治疗腹部切口裂开23例

腹部切口裂开是一种术后严重并发症。多年来对此无甚良方。临床上多采用逐日换药或清创缝合方法,给患者精神上及肉体上均带来了很大的痛苦。我们采用糜蛋白酶局部一次用药方法获得满意效果。现总结如下:     

透明质酸关节腔注射联合牙咬合板治疗颞下颌关节不可复性盘前移的疗效及美学效果评价

目的：探讨透明质酸（Hyaluronicacid,HA）关节腔注射联合牙咬合板治疗颞下颌关节不可复性盘前移（Anterior discdisplacementwithoutreduction,ADDWoR）患者的疗效及临床美学效果。方法：选择2015年1月-2021年12月笔者医院口腔科门诊收治的100例ADDWoR患者，采用信封法将患者随机分为HA组和对照组，每组50例，对照组给予牙咬合板治疗，HA组予以HA关节腔注射联合牙咬合板治疗。比较两组患者疼痛视觉模拟评分（Visualanaloguepainscore,VAS）、颞下颌关节紊乱指数（Craniomandibularindex,CMI）评分、下颌运动功能、临床美学指标及临床疗效。结果：治疗后，两组患者VAS、CMI评分均低于治疗前，且HA组显著低于对照组（P<0.05）；两组患者最大主动开口度、左侧偏动距离、右侧偏动距离、下颌前伸距离均优于治疗前，且HA组显著优于对照组（P<0.05）；两组患者髁突高度、关节腔间隙宽度均大于治疗前，且HA组显著大于对照组（P<0.05）；治疗后HA组临床疗效有效率为82.00...     

传统疗法＋乳酸菌素治疗女性下生殖道感染疗效观察

我们采用传统疗法和传统疗法 乳酸菌素对阴道炎进行治疗 ,效果较好 ,现总结如下。1　对象和方法1.1　对象　选择 2 0 0 1- 0 3～ 2 0 0 2 - 10来我院就诊的阴道炎 10 0例。排除糖尿病、HIV感染、免疫抑制剂使用者、妊娠和对甲硝唑、氧氟沙星、米可定过敏者。本组均有不同程度的外阴瘙痒、灼热、白带增多、异味、尿痛等临床表现。经妇科检查 ,阴道分泌物细胞学检查确定诊断。其中细菌性阴道病 6 1例 ,滴虫性感染2 3例 ,白色念珠菌感染 9例 ,滴虫 真菌混合感染 4例 ,杂菌感染 3例。随机分为治疗组和对照组 ,每组各 5 0例。患者年龄最小 18…     

基于GC-MS技术及网络药理学探讨醒脑静注射液入脑成分抗脑缺血损伤的作用机制

目的基于气相色谱-质谱联用技术(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)、网络药理学及分子对接技术识别并探究醒脑静注射液入脑成分及其治疗脑缺血损伤的作用机制,为其药效物质基础研究提供参考依据。方法调研文献获取醒脑静入脑成分并采用GC-MS技术对其入脑成分进行补充,在此基础上,利用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)和Swiss数据库对醒脑静注射液入脑成分进行靶点预测;同时通过CTD、OMIM、Gene Cards等数据库获取脑缺血靶点;进一步利用Omic Share平台对药物与脑缺血共有靶点进行基因本体(gene ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析;采用String数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络图及"入脑成分-脑缺血靶点-通路"网络图,并对入脑成分与核心靶点进行分子对接验证。结果鉴定出龙脑、麝香酮、樟脑、莪术二酮等13种醒脑静注射液入脑成分;通过网络药理学技术得到93个醒脑静注射液治疗脑缺血的作用靶点,包括MPO、PPARG、HMOX1、MMP2等。通路富集分析表明神经营养蛋白信号通路(neurotrophin signaling pathway)、雌激素信号通路(estrogen signaling pathway)及血管内皮生长因子信号通路(vascular endothelial growth factor signaling pathway)等可能是醒脑静注射液发挥抗脑缺血损伤的主要途径。通过分子对接技术验证得出代表性成分(栀子苷、莪术二酮、麝香酮)与治疗脑缺血潜在靶点具有较好的亲和。结论明确了醒脑静注射液的入脑成分,预测了入脑成分治疗脑缺血损伤的作用机制并初步验证了其靶点,为深入阐明醒脑静注射液的药效物质基础及作用机制提供了实验及理论依据。     

不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型的影响

目的 比较不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型的影响.方法 取60只6周龄雌性C57BL/6J小鼠,随机分为正常对照组、单纯荷瘤组、BS1(利血平法)组、BS2(游泳复合高分子右旋糖酐法)组、BS3(寒凝复合肾上腺素法)组和BS4(地塞米松复合肾上腺素法)组,首先根据中医理论用不同造模方法形成血瘀模型,然后经脾接种B16黑色素瘤建立肝转移模型.用激光多普勒观察小鼠耳廓微循环变化,并在接种后第15天小鼠眼眶取血,检测红细胞免疫功能和血清唾液酸酶(SA)含量的变化,并麻醉处死动物,观察肝转移情况.结果 ①单纯荷瘤组和各血瘀荷瘤组小鼠的耳廓微循环血流均明显减少(P＜0.01),以BS2组降低显著.②单纯荷瘤组和各血瘀荷瘤组小鼠的红细胞免疫功能亦明显降低(P＜0.01),血清SA含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01),以BS2和BS3组变化明显.③肝转移发生率:单纯荷瘤组、BS2组和BS3组均为100%,BS1组为80%,BS4组为60%,肝转移抑制率:BS2组、BS3组、BS1组和BS4组分别为-71.76%、3.90%、16.42%、100.6%.④荷瘤鼠肝转移的肝重与其耳廓微循环血流、红细胞免疫功能和唾液酸酶含量具有显著的相关性(P＜0.05,p＜0.01).结论 不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型肝转移发生程度具有明显的影响,应注意血瘀模型的选择,且其与红细胞免疫功能低下有关.