2004年全国计划免疫审评不同免疫覆盖率县的儿童麻疹抗体水平调查

目的 掌握2004年全国计划免疫审评不同免疫覆盖率县的儿童麻疹抗体水平.方法 根据2004年全国计划免疫审评四种疫苗免疫覆盖率不同的县分为3层,每层随机抽取2个县,每个县随机调查10个村,每村随机调查1992～2003年出生儿童42名.酶联免疫吸附试验(ELISA)定量法检测麻疹IgG抗体.结果 ①被调查儿童麻疹抗体平均阳性率为92.9%,最低年龄段为88.7%,最高年龄段为94.4%;抗体几何平均浓度(GMC)为1.23国际单位/毫升(IU/ml),GMC随着年龄的增长总体呈明显的下降趋势.②四种疫苗不同免疫覆盖率县的不同年龄段儿童麻疹抗体阳性率相差较大,最高的为100.0%,最低的仅为78.6%.③2004年全国计划免疫审评调查儿童的麻疹抗体阳性率分别为92.2%、92.4%、88.7%.④麻疹抗体阳性率与此次接种率调查结果 明显的不一致.⑤麻疹减毒活疫苗(MV)初次免疫合格和不合格儿童之间的麻疹抗体阳性率差异无显著的统计学意义.结论 被调查地区儿童麻疹抗体阳性率低于世界卫生组织西太平洋区消除麻疹队列人群免疫力95%的指标,麻疹抗体GMC总体保持在较高水平.儿童MV的接种率不能客观反映儿童麻疹的抗体水平.     

我国西北地区蚊虫标本中广平病毒的检测

目的 对我国西北地区蚊虫携带病毒开展调查,并快速发现重要的蚊媒病毒.方法 通过形态学方法对采集蚊虫进行分类鉴定,深度测序和宏基因组分析方法分析蚊虫携带的病毒,结合Sanger测序法补全病毒基因组全序,应用系统进化分析方法分析病毒分子遗传特征.结果 2019年7月采集自陕西省的中华按蚊标本和宁夏回族自治区的三带喙库蚊标本...     

Koutango病毒TaqMan反转录聚合酶链式反应方法的建立

目的建立Koutango病毒(KOUTV)的实时荧光定量TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法。方法从GenBank中下载KOUTV基因序列,进行多序列比对分析,针对NS5基因中的高保守序列片段设计KOUTV的特异引物与探针,用4科9种病毒进行检测方法特异性验证,通过平行重复实验验证检测方法稳定性,利用体外转录的RNA标准品建立了KOUTV的NS5基因拷贝数的绝对定量分析模型。结果引物与探针工作特异性良好,同一样品重复检测循环阈值(Ct)的变异系数均小于1.5%,定量分析模型灵敏度达到1.0×10^2拷贝/反应。通过本研究建立的快速检测方法对新疆采集的112批,6328只蚊虫进行了测定,结果均为阴性。结论成功建立了KOUTV的高特异性、高敏感性的TaqMan RT-PCR检测方法,可应用于实验室和临床诊断。     

中国2014年麻疹风疹实验室网络运转情况分析

目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2014年麻疹风疹实验室网络(Measles and Rubella Laboratory Network,MRLN)的运转状况。方法分析2014年中国麻疹监测信息报告管理系统中的实验室数据和全国MRLN监测数据,评价中国MRLN运转的各项指标。结果在血清学检测方面,2014年全国共采集散发监测病例血标本103 983例,标本采集率96.11%;实验室确诊麻疹病例为48 344例,占监测病例的37.90%。共证实麻疹暴发276起、风疹暴发7起。在麻疹暴发中,256起(92.75%)经实验室确诊;213起(77.17%)采集了病原学标本。在病毒学监测方面,2014年30个省级麻疹风疹实验室(Measles and Rubella Laboratory,MRL)共送检麻疹病毒4 919株,其中4 872株为中国本土流行的H1a基因亚型,其余为10株B3、3株D8、9株D9、1株G3和24株A基因型(疫苗相关株);15个省级MRL共送检210株阳性风疹病毒,其中74株1E基因型,135株2B基因型和1株2A基因型。在质量控制方面,国家MRL作为世界卫生组织(WHO)西太平洋区麻疹风疹参比实验室,在2014年通过了WHO的职能考核和现场认证;同时陕西、山东、云南、贵州、山西、江西、辽宁和青海8个省级MRL通过了WHO专家组的现场认证;32个省级MRL全部通过了由WHO和国家MRL组织的职能考核。结论中国2014年MRLN运转良好,为监测病例的实验室诊断和鉴别诊断、麻疹和风疹病毒学的监测提供了良好的技术平台,证实本土麻疹基因型H1仍在持续循环流行,同时有4个基因型病毒多次从国外输入,提示加强监测阻断输入病毒传播势在必行。     

弥凝治疗儿童轻型血友病A的临床观察

目的：探讨1-去氨基-8-D-精氨酸加压素（DDAVP,商品名：弥凝)治疗对轻型血友病A患儿血浆凝血因子Ⅷ（FⅧ）、活化部分凝血活酶时间（APTT）的影响。方法：轻型血友病A患儿18例,用DDAVP静脉注射治疗（每日0.3 μg/kg）,每24 h一次,连续用5次。观察患儿临床疗效,并于DDAVP注射前及注射后测定血浆FⅧ水平及APTT。结果：DDAVP治疗后,18例患儿中16例出血症状明显减轻,关节肌肉血肿肿痛减轻或消失。首日用药后60 min 血浆FⅧ 达（27±4）%,APTT时间缩短至（66±10）s;DDAVP治疗的第3~4日FⅧ水平维持在有效止血水平（25%~30%）;与前4日比较,第5日FⅧ浓度明显下降［(21±3)%］,APTT也随之延长。结论：DDAVP可显著提高轻型血友病A患儿血浆FⅧ水平,明显缩短其APTT,临床出血症状得到较好控制,建议DDAVP疗程以3~4日为宜。     

中国2005年流行麻疹野病毒H1a基因亚型血凝素基因和氨基酸特征分析

目的研究2005年引起中国麻疹流行的麻疹野病毒H1a基因亚型血凝素蛋白(HA)核苷酸和氨基酸特征及变异程度。方法从各省疾病预防控制中心麻疹实验室送检的2005年麻疹野病毒中选取4个H1a基因亚型代表株,并选取2004年河北省流行的1个H1a基因亚型代表株做对比分析。提取麻疹病毒核糖核酸(RNA),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出核蛋白(N)羧基末端(450nt)和HA蛋白编码区基因片段(1 854nt),并对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,与GenBank收录的1993~1994年中国优势基因型代表株、中国疫苗株沪191(S191)和长47(C47)HA蛋白和核蛋白羧基末端构建基因亲缘性关系树,分析HA蛋白基因的核苷酸/氨基酸的同源性。结果5株分离株全部为H1基因型的H1a亚型。5株H1a亚型毒株的HA与中国疫苗株S191相比有94~96个核苷酸差异,28~30个氨基酸差异;与C47有94~98个核苷酸差异,28~30个氨基酸差异。5株H1a亚型HA第719位核苷酸由G→A,导致第240位的丝氨酸(S)突变成天门酰胺(N),致使HA蛋白的1个N型糖基化位点丢失。结论该研究表明,麻疹野病毒H1a亚型株的HA蛋白的核苷酸/氨基酸,与1993~1994年流行株相比未发生明显变异。但与S191和C47相比有较大基因变异,丢失了个别中和抗原位点,但大部分中和抗原位点未发生变异。中国使用的疫苗对现流行的麻疹野病毒仍然具有保护作用,但初免成功后是否绝大部分人具有终身保护还有待进一步病毒学和流行病学论证。2005年麻疹流行与病毒本身的基因突变无明显关联,而是由易感人群的积累和人口流动导致广泛的传播所致。     

一起流行性腮腺炎爆发的血清学诊断和基因型别鉴定

目的对一起流行性腮腺炎(腮腺炎)爆发进行血清学证实,鉴定引起病毒性脑膜炎的腮腺炎病毒基因型别。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测临床诊断为腮腺炎患儿的血清和脑膜炎病人脑脊液(CSF)标本中的IgM抗体;从脑膜炎病人CSF标本中提取核糖核酸(RNA),用逆转录-套式聚合酶链反应(RT-Nest-PCR)方法扩增病毒小疏水蛋白(SH)基因255个核苷酸片段;序列测定结果与GenBank的8个基因型代表株做亲缘性关系树分析。结果15份血清中11份腮腺炎IgM阳性,5份CSF中2份IgM阳性。5份CSF标本中2份PCR扩增产物阳性。SH基因序列测定和分析表明该2株病毒为F基因型,与1995~1996年中国流行的腮腺炎野病毒基因型一致。结论此次疫情是由F基因型腮腺炎病毒引起的腮腺炎爆发,部分病例合并有病毒性脑膜炎。     

中国2007年麻疹/风疹实验室网络的运转与监测

目的 评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2007年麻疹/风疹实验审网络的运转情况.方法 分析全国2007年麻疹/风疹实验审网络监测数据库,中国疾病监测信息报告管理系统数据库、中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家麻疹/风疹实验室血清学和病毒学监测数据库的资料,评价中国麻疹/风疹实验室网络运转的各项指标.结果 ①血清学监测:报告麻疹疑似病例102 422例,有实验室诊断的53 986例,占麻疹疑似病例的52.7%.②病毒学监测:从19个省(自治区、直辖市,下同)分离到麻疹病毒266株,除1株为A基因型外,其余均为H1基因型中的H1a基因亚型.从6个省分离到风疹病毒46株,均为1E基因犁.③实验审网络质量控制:国家麻疹/风疹实验室通过了世界卫生组织(WHO)的职能考核和现场认证.30个省CDC麻疹实验室通过了国家麻疹/风疹实验审组织的职能考核和血清复核,11个省CDC麻疹实验室通过了现场认证考核.结论 2007年中国麻疹/风疹实验室网络运转良好,为麻疹疑似病例的实验室诊断和麻疹流行状况监测提供了良好的技术平台,同时也获得了本地麻疹/风疹病毒流行株,积累了麻疹/风疹野病毒基因背景资料,为2012年消除麻疹奠定了实验室基础.     

中国2011～2012年麻疹野病毒血溶素基因特征分析

目的分析中国2011～2012年麻疹野病毒株代表株血溶素（Fusion,F）基因的分子特征。方法从2011～2012年各省（自治区、直辖市）送检的麻疹野病毒中,选取7株代表株,使用逆转录-聚合酶链反应扩增病毒的F基因全长,并进行核苷酸序列测定,同时与我国的疫苗株进行核苷酸、氨基酸同源性分析及序列比对。结果我国2011-2012年7株麻疹野病毒代表株中,核苷酸同源性为97．9％～99．9％,氨基酸同源性为98．7％～100．0％;与中国疫苗株（Shanghai191和Changchun47）相比,核苷酸同源性为95．0％～95．6％,氨基酸同源性为96．3％～97．2％。F基因的三个糖基化位点（第32、64、70位氨基酸）,对病毒融合功能具有重要作用的第112位精氨酸（Arg）、第195位亮氨酸（Leu）未发生改变。但与疫苗株相比,有17个氨基酸位点发生较大改变。结论我国2011～2012年流行的麻疹野病毒F基因无明显变异,F基因上已知的重要功能位点保守。推测近年来中国流行的麻疹野病毒F蛋白结构和功能未发生明显改变,抗原性稳定。然而鉴于F蛋白是麻疹病毒的重要功能蛋白,对F蛋白的变异规律进行常规监测,对于了解麻疹病毒的变异规律和评价疫苗的保护效率具有重要意义。