临床样本DNA自动测序结果的判读

自动测序技术向临床医学方向转化,使测序结果电泳图的正确判读成为临床分子病理学家、肿瘤学家及临床研究者十分重要的技能之一。本文总结了自动测序结果图中单位点杂峰、杂合子、纯合子及长片段杂峰序列,以及缺失与插入所致框移等的特点和正确判读方法,并就其发生原理、注意事项及处理方法等作一探讨。另外,结合临床实践对ＤＮＡ测序的报告内容提出了相应的要求。     

肿瘤热疗用Fe2O3纳米磁性粒子的生物相容性研究

目的研究将要用于肿瘤细胞内热疗的自制纳米级Fe2O3磁性粒子的生物相容性.方法MTT法评价其体外细胞毒性,溶血试验评价其有无溶血作用,小鼠腹腔注射其无菌生理盐水混悬液以测定其LD50,微核试验评价其有无致畸、致突变作用等.结果该材料对L-929细胞毒性为0～1级;无溶血作用;昆明小鼠腹腔注射该材料混悬液1-ml,其LD50为5.45-g·kg-1;微核实验结果表明无致畸、致突变作用.结论就目前所取得的实验结果来看,可认为该材料是一种具有良好生物相容性的材料,对于肿瘤热疗可能具有广阔的应用前景.     

MPN患者JAK2基因V617F点突变的检测及意义

目的探讨JAK2基因V617F点突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生情况及其意义。方法本组受检者共100例。MPN患者82例,其中真性红细胞增多症（PV）20例,有红细胞增多但未能诊断为PV者10例,原发性血小板增多症（ET）14例,有血小板增多但未能诊断为ET者13例,原发性骨髓纤维化（PMF）9例,慢性髓性白血病（CML）2例,其他MPN 6例,其他不明原因白细胞升高患者8例;另有急性白血病（AML）1例,骨髓增生异常综合征（MDS）10例、腔隙性梗死3例,慢性肾炎1例,大B细胞性淋巴瘤1例,异体胎肝移植患者1例,正常体检者1例。提取100例受检者外周血液及骨髓样本中有核细胞DNA,采用直接测序法进行JAK2第12、14外显子突变热点的检测。结果 100例样本中,有52例检测了第12、14两个外显子,48例仅检测第14外显子。未发现第12外显子突变。V617F及其他突变总检出率为38%（38/100）。PV、ET、PMF、CML、其他MPN、其他不明原因白细胞升高患者中均检测到不同比例的JAK2基因V617F点突变;而18例非MPN患者样本中均未发现V617F点突变,两组相比,P〈0.01。结论 JAK2基因突变在MPN的发生率高于其他血液疾病,可作为诊断MPN的一项重要参考指标。     

癌症基因组研究计划概述

当前,生命科学领域已经绘制出蕴涵人类生命奥秘的人类基因组图谱。随后的基因组学、蛋白质组学、药物研发、临床研究及疾病预测等领域针对癌症的研究也由横向向纵深不断拓展。     

直接测序法检测结肠癌K-ras基因的灵敏度确认及评估

目的探讨直接测序法检测K-ras基因的灵敏度及可行性。方法用已知K-ras基因突变型及野生型细胞株DNA按比例混合,用直接测序法检测K-ras基因突变情况,对实验敏感度进行评估。结果正反向测序结果均显示,含突变型K-ras基因DNA 5%的5个复孔中,均未能明确检出突变,而含突变型基因DNA≥10%的所有样本及其复孔都检测出了突变;突变型的基因碱基T峰与野生型的对应碱基G峰的比例,各组间有明显差异（P均〈0.05）,且峰高随突变型DNA的质量浓度增加而增加,二者存在明确相关性（相关系数r=-1.00,相伴概率〈0.05）。结论直接测序法检测突变型DNA,当敏感度为10%时,特异性达到100%,且电泳图上突变峰与野生峰的高低比例可对细胞比例进行半定量评估,可以满足临床检测与研究。     

As2O3磁性纳米微球的制备及其联合磁流体热疗对宫颈癌治疗的体外实验研究

目的：研究As2O3磁性纳米微球的制备及其联合磁流体热疗（MFH）对宫颈癌Siha细胞株的治疗作用。方法：采用改良的乳化冷冻凝聚法制备As2O3磁性纳米微球，能谱仪、原子荧光光谱仪对其进行表征；高频交变磁场中进行体外升温实验。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测As2O3磁性纳米微球联合MFH对宫颈癌Siha细胞株生长的影响，流式细胞仪（FCM）检测凋亡。结果：所制备As2O3磁性纳米微球近似球形，粒径约为120nm，含砷量为0．61％，在输出电流I=300A的高频交变磁场中具有升温能力，且能达到肿瘤治疗的有效温度（41℃～46℃）；As2O3磁性纳米微球联合MFH能抑制宫颈癌Siha细胞株的生长，促进其凋亡，且均较单纯As2O3液及单纯MFH明显。结论：As2O3磁性纳米微球可同时发挥As2O3的细胞毒性作用和磁感应加热的联合定向治疗作用，效果优于单一治疗，为临床治疗宫颈癌提供新的方法。     

肿瘤热疗用F_2O_3纳米磁性粒子的生物相容性研究

目的 :研究将要用于肿瘤细胞内热疗的自制纳米级F2 O3磁性粒子的生物相容性。方法 :MTT法评价其体外细胞毒性 ,溶血试验评价其有无溶血作用 ,小鼠腹腔注射其无菌生理盐水混悬液以测定其LD50 ,微核试验评价其有无致畸、致突变作用等。结果 :该材料对L 92 9细胞毒性为 0～ 1级 ;无溶血作用 ;昆明小鼠腹腔注射该材料混悬液 1ml ,其LD50 为 5 .45g·kg- 1 ;微核实验结果表明无致畸、致突变作用。结论 :就目前所取得的实验结果来看 ,可认为该材料是一种具有良好生物相容性的材料 ,对于肿瘤热疗可能具有广阔的应用前景。     

Fe2O3纳米磁流体热疗治疗肝癌

目的　研究在一定高频交变磁场不同浓度的Fe2 O3 纳米磁流体热疗对SMMC772 1肝癌的治疗作用。方法　光学显微镜、电子显微镜观察细胞形态 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT )比色法检测Fe2 O3 纳米磁流体热疗 (MFH)对SMMC772 1肝癌细胞株生长的影响 ,流式细胞仪 (FCM )检测凋亡细胞 ,荷瘤鼠热疗实验检测MFH对肝癌的肿瘤体积抑制率及质量抑制率。结果　SMMC772 1细胞经Fe2 O3 纳米磁流体热疗作用后 ,细胞增殖受到明显抑制 ,细胞凋亡率明显增加 ,且与磁流体浓度呈依赖关系 ;动物实验显示纳米磁流体热疗对肝癌的体积和质量有明显的抑制作用。结论　Fe2 O3 纳米磁流体热疗能抑制肝癌SMMC772 1细胞增殖 ,促进其凋亡 ,并对肝癌显示明显的体积和质量抑制效应 ,对肝癌的治疗有一定的作用。     

尿路肿瘤细胞多重荧光PCR微卫星不稳定和荧光原位杂交的联合诊断

目的 研究泌尿系统脱落细胞的微卫星、荧光原位杂交联合分子病理诊断.方法 使用ABI试剂和ABI3100仪器应用多重荧光PCR(TGFbRII、IFNA、D9S171、D9S283、D4S243、D9S162、D17S695)和FISH法(CSP3/CSP7 DNA探针,GLP P16/CSP17 DNA探针)分别检测患...     

癌症基因组研究计划概述

当前,生命科学领域已经绘制出蕴涵人类生命奥秘的人类基因组图谱.随后的基因组学、蛋白质组学、药物研发、临床研究及疾病预测等领域针对癌症的研究也由横向向纵深不断拓展.