高糖对缺氧神经元的影响及钙相关机制研究

研究高糖对神经元缺氧的影响,并探讨其钙相关机制.利用SD大鼠大脑皮质神经元体外缺氧模型,通过对细胞活力的检测,观察浓度分别为22.7(对照组),30,40,50,60(高糖组)mmol/L的葡萄糖对神经元缺氧的影响;以Fura-2/Am为荧光指示剂,测定细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i.结果发现当培养基中葡萄糖浓度达到60 mmol/L时,高糖可引起缺氧神经元损伤;与对照组相比,有钙介质与无钙介质中静息[Ca2+]i均升高,P＜0.01;但对照组与高糖组在有钙介质中对氯化钾(KCl)、谷氨酸(Glu)刺激引起的[Ca2+]i升高无明显差异,P＞0.05;在无钙介质中,对氯化钙(CaCl2)引起的[Ca2+]i增高率无明显差别,P＞0.05.本研究表明:高糖对神经元的损伤作用可能与其促进细胞内钙离子释放,诱发细胞内钙超载有关.     

慢性癫癎模型海马神经元内钙稳态和钙动力学的长期变化

目的 探讨海马神经元内长期钙离子([Ca2+]i)和动力学变化在癫疴发生机制中的作用.方法 建立氯化锂-匹罗卡品慢性癫癎模型,于致痫后6 h和1、3、7、14、30 d不同时间点应用激光共聚焦显微镜观察离体海马神经元内[Ca2+]i的变化以及谷氨酸负荷后神经元内[Ca2+]i恢复速度的变化.结果 正常对照组大鼠急性分离海马神经元[Ca2+]i为(95.4±22.1)nmol/L,致癎后急剧升高至(867.6±35.2)nmol/L,第7天降低(292.8±18.3)mnol/L,此后持续在此水平,30 d后降至(220.8±17.6)nmol/L,仍高于对照组(t=12.55,P<0.01);正常对照组大鼠92%的海马神经元内[Ca2+]i处于正常范围内(25～150 nmol/L),致癎后6 h,所有神经元[Ca2+]i均有升高,并且85%的神经元高于500 nmol/L,致癎7、14、30 d后分别有75%、60%、52%的神经元[Ca2+]i高于正常值,但高于500 nmol/L者逐渐减少;经接触5 μmol/L谷氨酸人工脑脊液2 min后,对照组神经元可在(9.5±3.4)min内恢复至基线水平,而急性期、潜伏期、慢性期的癫癎神经元均存在明显延迟(t=5.08、4.56、4.21,P<0.01).结论 氯化锂-匹罗卡品致疴后可造成海马神经元内长期的[Ca2+]i和钙动力学改变,该种长期可塑性改变在慢性癫癎模型的诱发和维持中起着重要作用.     

阿魏酸钠对培养的皮质神经细胞内游离Ca2+的影响

目的 :研究阿魏酸钠对谷氨酸诱导培养的皮质神经细胞损伤的作用。方法 :采用新生大鼠皮质神经细胞原代培养建立谷氨酸神经细胞损伤模型 ,用Ca2 +指示剂Fura 2 /AM检测神经细胞内游离钙浓度 ( [Ca2 +] i)的变化 ,并观察反映神经细胞受损程度的培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)的释放量的变化。结果 :阿魏酸钠 40～ 10 0 μmol·L-1能剂量依赖性抑制谷氨酸钠所引起的 [Ca2 +] i 升高及LDH释放。结论 :阿魏酸钠通过抑制谷氨酸钠所引起的 [Ca2 +] i 升高可能是其抗氧化性神经损伤作用的重要机制     

丁咯地尔抑制NE和Glu引起的单个脑细胞游离钙增高

目的：研究丁咯地尔对去甲肾上腺素(NE)和谷氨酸(Glu)引起大鼠单个脑细胞内游离钙增高的影响。方法：应用AR-CM-MIC阳离子测定系统测量细胞内游离钙([Ca2+]i)。结果：细胞外钙为1．3 mmol·L,丁咯地尔0．1,1．0,1 0．0μmol·L-1对细胞静息[Ca2+]i无明显影响,对NE诱导的[Ca2+]i增高明显抑制,对Glu诱导的[Ca2+]i增高具有一定的抑制作用。结论：丁咯地尔能抑制NE和Glu引起的单个脑细胞游离钙增高。     

尼莫地平对脑创伤后神经元内微管相关蛋白2的影响

目的 :研究脑创伤后大鼠神经元内游离钙 ([Ca2 + ] i)及微管相关蛋白 2 (MAP2 )的变化 ,探讨脑创伤后神经元内 [Ca2 + ] i 与MAP2的关系。方法 :利用激光共聚焦显微镜测定脑创伤后神经元内 [Ca2 + ] i及MAP2的变化。结果 :尼莫地平于伤后 1h内应用可减轻MAP2的丢失 ,而伤后 10h以上应用则无效。尼莫地平于伤后 2 2h内应用均可降低神经元内 [Ca2 + ] i升高。结论 :尼莫地平可降低伤后神经元内 [Ca2 + ] i升高及MAP2丢失 ,但应用的有效时间窗不同 ,提示脑创伤后神经元内 [Ca2 + ] i 升高并不是MAP2丢失的惟一原因     

大鼠星形胶质细胞的内质网钙库特征

用显微荧光测量技术研究了纯化培养的大鼠神经胶质细胞的内质网钙库的组成、特征.用IP3-敏感的和非IP3-敏感的钙库的激活剂乙酰甲胆碱(Acetyl-β-Methylcholine Chloride,MCh)和咖啡因(Caffeine,CAF)及线粒体解偶剂FCCP组成不同的刺激条件作用于细胞,观察胞内钙信号的变化.结果表明MCh和CAF均可使[Ca2+]i出现与刺激浓度依赖性的钙升高.快速重复的刺激可导致钙库的耗竭,而足够长的间隔时间可使钙库的Ca2+储存得到不同程度的恢复;用Thapsigargin耗竭内质网钙库后,MCh和CAF不能引起[Ca2+]i升高;线粒体的解偶剂FCCP可诱发中度的[Ca2+]i升高,并与MCh和CAF敏感的钙库相对独立.研究显示星形胶质细胞内的钙库包括:MCh和CAF敏感的两种内质网钙库,它们或相对独立或密切相关;线粒体钙库参与胞质内Ca2+缓冲系统.     

Mg2+快速抑制谷氨酸诱导大鼠海马神经元内游离钙浓度升高的作用及特征

目的　采用钙离子特异性荧光指示剂Fura 2 /AM ,使用光电联合检测系统检测镁离子 (Mg2 + )对谷氨酸培养的海马神经元内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响和特征。方法　实验设计分三组 (n =2 6 ) ,向细胞吹药各 2 0秒 :①组 1× 10 -5mol/L谷氨酸 ;②组同时 1× 10 -5mol/L谷氨酸和 1× 10 -5mol/LMg2 + ;③组即在②组回到基线后给 1× 10 -5mol/L谷氨酸。结果　①组 [Ca2 + ]i 明显升高 ;②组 [Ca2 + ]I 的变化明显变小 ,其峰值明显下降 ,且Phase 1上升速度减慢 ,Phase 2的时间也有所缩短 ,二相之间的平台期相对延长 ;③组出现与①组中相似的钙震荡表现 ,但Phase 1和Phase 2的时间均缩短 ,△ [Ca2 + ]i 的变化稍低。结论　Mg2 + 可快速抑制谷氨酸诱导大鼠海马神经元内游离钙浓度升高。     

高糖对缺氧神经元的影响及钙相关机制研究

研究高糖对神经元缺氧的影响 ,并探讨其钙相关机制。利用 SD大鼠大脑皮质神经元体外缺氧模型 ,通过对细胞活力的检测 ,观察浓度分别为 2 2 .7(对照组 ) ,30 ,40 ,50 ,60 (高糖组 ) mmol/ L的葡萄糖对神经元缺氧的影响 ;以 Fura- 2 / Am为荧光指示剂 ,测定细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 ]i。结果发现当培养基中葡萄糖浓度达到 60 mmol/ L时 ,高糖可引起缺氧神经元损伤 ;与对照组相比 ,有钙介质与无钙介质中静息[Ca2 ]i 均升高 ,P<0 .0 1 ;但对照组与高糖组在有钙介质中对氯化钾 (KCl)、谷氨酸 (Glu)刺激引起的[Ca2 ]i 升高无明显差异 ,P>0 .0 5;在无钙介质中 ,对氯化钙 (Ca Cl2 )引起的 [Ca2 ]i 增高率无明显差别 ,P>0 .0 5。本研究表明 :高糖对神经元的损伤作用可能与其促进细胞内钙离子释放 ,诱发细胞内钙超载有关     

亚低温对缺血性神经元凋亡后凋亡诱导因子表达的影响

目的研究亚低温对凋亡诱导因子(AIF)介导的缺血性神经元凋亡通路的影响。方法建立离体大鼠皮质神经元凋亡模型。皮质神经元原代培养,分为常温组(37℃)和亚低温组(33℃),在剥夺血清后的8h、16h和24h,测定神经元生存率;应用免疫细胞化学的方法检测微管相关蛋白-2(MAP-2);通过Western Blotting方法测定神经元的细胞核和细胞浆中AIF的含量变化。结果缺血24h组,神经元生存率分别为42.34%(37℃)和65.76% (33℃),差异有统计学意义(P<0.05)。随着缺血时间的延长,MAP-2的表达逐渐减低,在缺血16h和24h,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。细胞核中AIF的含量逐渐增加,而细胞浆中AIF的含量逐渐减少,在缺血16h和24h,与常温组相比,低温组细胞核AIF的含量显著性减低(P<0.05)。结论亚低温能促进缺血后神经元的存活,减少MAP-2的降解。亚低温干预了AIF介导的细胞凋亡途径,减少了缺血性损伤导致的AIF核位移。     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠模型海马神经细胞静息态[Ca^2＋]i的影响

目的观察血管性痴呆(VD)小鼠海马神经细胞内静息态游离Ca2+浓度([Ca2+]i)变化,以及石杉碱甲(哈伯因)对VD的治疗效果和[Ca2+]i的影响,进而探讨[Ca2+]i的改变在VD发病机制中的作用.方法采用双侧颈总动脉线结、反复缺血-再灌注法,制作小鼠血管性痴呆动物模型,并设假手术组作为对照,服用石杉碱甲者为治疗组.分别于术后第29天、第30天进行学习、记忆和行为学测试;然后快速制取海马活细胞,以Fluo-3/AM为荧光探针,在激光扫描共聚焦显微镜下观察各组海马神经细胞静息态[Ca2+]i变化.结果 (1)模型组的学习和记忆成绩低于假手术组及治疗组(P<0.05),治疗组及假手术组间无显著性差别;(2)模型组神经细胞静息态[Ca2+]i显著高于假手术组、治疗组(P<0.05),治疗组及假手术组间无显著性差别.结论石杉碱甲作为中枢神经系统特异性胆碱酯酶抑制剂和NMDA受体拮抗剂,可降低血管性痴呆小鼠海马静息态[Ca2+]i,并改善其临床症状;因此提示海马神经细胞静息态[Ca2+]i过高参与了血管性痴呆的发病过程.     

糖皮质激素对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴Ca~(2+)/CaMPKⅡ的影响

目的研究糖皮质激素醋酸可的松对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)游离钙(Ca2+)及钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMPKⅡ)的影响。方法用流式细胞仪及钙荧光探针Flou-3/AM来测定细胞中的Ca2+,通过液体闪烁仪测定γ-32P-ATP参入反应底物的摩尔数,用来表示蛋白激酶的活性。结果醋酸可的松组大鼠下丘脑细胞[Ca2+]i荧光强度为129.32±17.74,显著高于对照组60.65±10.64,P<0.05。而醋酸可的松组大鼠下丘脑、肾上腺组织中CaMPKⅡ活性分别为14.07+3.15和3.87+1.47(nmolPi.min-1.mg-1protein),与对照组的7.91+3.2和2.23+0.52(nmolPi.min-1.mg-1protein)相比显著升高,差异有统计学意义,P<0.001。结论糖皮质激素对下丘脑-垂体-肾上腺轴的调控作用与Ca2+、CaMPKⅡ密切相关。     

人参皂甙RD预处理对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨人参皂甙RD预处理对谷氨酸所致PC12细胞损伤的影响。方法将PC12细胞分为对照组、谷氨酸损伤组和人参皂甙RD预处理组。对照组细胞正常培养;谷氨酸损伤组细胞置于含10 mmon/L谷氨酸的DMEM培养基中培养24 h;人参皂甙RD预处理组细胞经50μmol/L人参皂甙RD预处理30 min后,再加谷氨酸继续培养24 h。采用噻唑蓝比色法检测细胞活力;按试剂盒检测培养液乳酸脱氢酶（LDH）释放量;流式细胞仪检测胞内活性氧（ROS）水平;按试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果人参皂甙RD预处理最佳浓度为50μmol/L。与谷氨酸损伤组相比,人参皂甙RD预处理PC12细胞活力明显增高（P〈0.05）,培养液LDH释放量明显降低（P〈0.05）,胞内ROS含量明显降低（P〈0.05）,胞内SOD含量明显增高（P〈0.05）。结论人参皂甙RD预处理可减轻谷氨酸引起的PC12细胞损伤。     

抑制CaMKⅡ对异氟烷神经毒性的影响

目的探讨钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对异氟烷神经毒性的作用及相关机制。方法 0.96 mM异氟烷处理培养1 w后的神经细胞6 h,异氟烷处理之前两天在培养基中加入CaMKⅡ抑制剂十四烷酰肉豆蔻酰-钙调蛋白自变性抑制肽(myrAIP)或激动剂钙调素(CaM)。抑制剂实验将细胞随机分为对照组、CaMKⅡ抑制剂处理组、异氟烷处理组、异氟烷加抑制剂组(n=10),激动剂实验分为对照组、异氟烷处理组、异氟烷加CaMKⅡ激动剂组(n=10)。检测细胞活力MTT,对细胞进行Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞并计数。结果抑制剂实验中,与对照组相比,各处理组MTT值明显降低(P<0.05),凋亡神经元明显增多(P<0.05),异氟烷加抑制剂组的凋亡细胞明显多于单纯异氟烷处理组(P<0.05);激动剂实验中,异氟烷加激动剂组部分逆转了单纯异氟烷处理引起的MTT下降(P<0.05)并减轻了单纯异氟烷处理引起的凋亡细胞增多(P<0.05)。结论 0.96mM的异氟烷处理6h对小鼠的神经元产生了明显的毒性;CaMKⅡ抑制剂能明显加重异氟烷的神经毒性。     

病变侧亚低温对大鼠局脑缺血再灌注后Akt、Survivin表达的影响

目的 通过检测Akt及Survivin蛋白的表达,探讨亚低温对局脑缺血再灌注后神经元存活的影响.方法 用线拴法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）局脑缺血再灌注模型,将44只SD大鼠随机分成假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组,缺血组分别缺血2,6 h再灌注4,24,72 h,1周,2周后处死,亚低温组于缺血后13～14 min实施病灶侧亚低温持续4 h.免疫组织化学法检测Akt、Survivin 蛋白的表达.结果 相同缺血再灌注时间点,亚低温组比常温组缺血侧Akt、Survivin、表达水平显著增高（P＜0.05）.结论 病灶侧亚低温通过促进缺血半暗带脑组织Akt、Survivin表达的核内移,从而抑制神经元凋亡,促进脑缺血后神经功能恢复.     

亚低温对缺氧/复氧后星形胶质细胞AQP4表达的影响

目的 观察缺氧/复氧条件下大脑星形胶质细胞水通道蛋白4(AQP4)的表达变化以及亚低温对其表达的影响,探讨脑缺血再灌注脑水肿与AQP4的关系以及亚低温对脑缺血再灌注损伤的保护机制.方法 利用新生24 h内的SD大鼠,进行原代、传代培养,将星形胶质细胞分为对照组、常温组及亚低温组.用台盼蓝染色法测定37℃及32℃时,缺氧/复氧不同时间点星形胶质细胞的存活率,作为细胞受损指标,用倒置相差显微镜对细胞进行形态学观察,应用细胞免疫化学技术检测星形胶质细胞缺氧/复氧各个时间点AQP4的表达变化及亚低温的干预效果.结果 (1)缺氧4,8h时细胞形态变化不明显,随着复氧时间的延长,可见细化逐渐明显,而亚低温干预的细胞形态及细胞存活力变化均较相应的常温组明显减轻;(2)缺氧及复氧早期AQP4的表达降低,复氧后6h随着时间延长AQP4表达明显增多,在复氧≤8h,常温组及亚低温组的表达均低于对照组(均P＜0.05或0.01),而复氧后10,12h,AQP4蛋白表达均明显高于对照组(均P＜0.05或0.01);(3)在复氧后各时间点亚低温组AQP4的表达均明显低于常温组(均P＜0.05或0.01).结论 星形胶质细胞对缺氧的耐受能力较强,亚低温可以减轻缺氧/复氧后星形胶质细胞的损伤,通过降低AQP4的表达,可能是亚低温减轻缺血性脑水肿的作用机制之一.     

亚低温联合丁苯肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察亚低温联合丁苯肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法制备SD大鼠MCAO模型,梗死2 h后再灌注,并分为假手术组、模型组、丁苯肽组及亚低温联合丁苯肽组（联合组）,再灌注24 h后进行神经功能缺损评分检测脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）浓度、病理变化及大脑缺血面积并比较.结果 （1）丁苯肽组与联合组的神经功能缺损评分明显低于模型组,且联合组的神经功能缺损评分明显低于丁苯肽组（P＜0.01）.（2）与假手术组相比,模型组SOD活性降低,MDA含量增加（P＜0.01）;与模型组相比,丁苯肽组与联合组SOD活性增高,MDA含量降低（P＜0.01）,且联合组与丁苯肽组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.（3）模型组、丁苯肽组及联合组病理学检查均较假手术组差,但联合组好于丁苯肽组好于模型组（P＜0.01）.（4）模型组、丁苯肽组及联合组脑缺血面积较假手术组增大,而联合组＜丁苯肽组＜模型组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 亚低温联合丁苯肽对脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用.     

高渗刺激引起培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和C6细胞合成并释放谷氨酸

目的观察高渗刺激对培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞或C6细胞合成、释放谷氨酸的影响。方法获取一日龄SD大鼠下丘脑组织，进行星形胶质细胞培养、纯化和鉴定。培养细胞随机分五组：（1）等渗组：用新鲜等渗培养液置换原先的培养液，将细胞分成5个亚组，分别孵育1、3、5、10和15min。（2）高渗组：用320mosMNaCl高渗溶液置换原先的培养液，将细胞分成5个亚组，分别孵育1、3、5、10和15min。（3）甘伯酸（carbenoxolone，CBX，一种缝隙连接阻断剂）＋等渗组和（4）CBX＋高渗组：用含有CBX（终浓度为100mmol／L）的等渗培养液作用1h，后分别用等渗或高渗培养液置换出原培养液，将细胞分成5个亚组，分别孵育1、3、5、10和15min。（5）Ca2＋高渗组：用含有Ca2＋（1000μmol／L）的等渗培养液作用1h，后用高渗培养液置换出原培养液，将细胞分成5个亚组，分别孵育1、3、5、10和15min。每个亚组5个培养皿。收集各组的细胞，进行抗谷氨酸和抗胶质原纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein，GFAP）的双重免疫荧光染色，Confocal显微镜观察。用反相高效液相色谱荧光测定法测定细胞培养液中谷氨酸的含量。培养的C6细胞分为四组：等渗组，高渗组，CBX＋等渗组和CBX＋高渗组，用于流式细胞仪（flowcytometry，FCM）定量检测细胞内谷氨酸的含量。结果星形胶质细胞内抗GFAP染色的荧光强度在五组问无明显差异。星形胶质细胞内抗谷氨酸染色的荧光强度在等渗组中各时间点无明显变化，高渗组中在刺激1min后表达增加，5min达到高峰，15min恢复到正常。CBX＋高渗组的抗谷氨酸染色荧光强度明显高于CBX＋等渗组和等渗组，一直维持到15min不下降。培养基中的谷氨酸浓度在等渗组各时间点无明显变化，高渗组中谷氨酸浓度从5min到15min明显增加。Ca2＋高渗组和CBX＋高渗组中?     

急性轻、中型颅脑损伤患者血清胶质纤维酸性蛋白水平变化及其临床意义

目的探讨血清胶质纤维酸性蛋白（GFAP）水平与急性轻中、型颅脑损伤患者伤情的关系。方法选择2010年10月至2012年10月收治的急性颅脑损伤患者120例（颅脑损伤组）,伤后4h时内测定血清GFAP浓度;并与同期体检中心健康志愿者30例和急诊科就诊的四肢外伤患者（无头部外伤）25例血清GFAP水平进行比较。结果颅脑损伤患者血清GFAP水平显著高于健康志愿者[（1．42±0．24）ng／L;P〈0．05]和四肢外伤患者[（1．38＋0．29）ng／L;（P〈0．05）],而后两组之间无统计学差异（P〉0．05）。中型颅脑损伤患者血清GFAP水平[（1．75＋0．27）ng／L;P〈0．05]显著高于轻型颅脑损伤患者[（1．63±0．19）ng／L;P〈0．05]。头颅CT检查阳性颅脑损伤患者血清GFAP水平[（1．79±0．23）ng/L]显著高于阴性患者[（1．57±0．21）ng／L;P〈0．05）]。手术治疗颅脑损伤患者血清GFAP水平[（1177±0．25）ng,L]显著高于保守治疗患者[（1．60±0．23）ng／L;P〈0．05]。结论血清GFAP可以作为早期评估急性轻、中型颅脑损伤患者病情的一个有价值的指标。     

低频rTMS对TBI患者兴奋性毒性指数的影响

目的探讨低频重复经颅磁刺激（rTMS）对颅脑损伤（TBI）患者兴奋性毒性指数（EI）的影响。方法 48例急性TBI患者按GCS评分分为轻型组（MI组）、中型组（MO组）及重型组（SE组）,根据治疗方法每组又分为两亚组,即常规治疗组（c组）及低频rTMS治疗组（r组）,每亚组8例患者。治疗7 d后,采用高效液相色谱法测定患者脑脊液中谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、γ-氨基丁酸（GABA）的浓度并计算出兴奋性毒性指数（EI）=[Glu]×[Gly]/[GABA]。结果对于轻型颅脑损伤患者,与c组相比,r组脑脊液Glu、Gly、GABA浓度及EI均有下降趋势,但无统计学差异（P〉0.05）。对于中型颅脑损伤患者,与c组相比,r组脑脊液Glu、GABA及EI均明显降低（P〈0.05）。对于重型颅脑损伤患者,与c组相比,r组脑脊液Glu、Gly、GABA及EI均明显降低（P〈0.05）。结论低频rTMS可以减轻中、重型TBI患者的兴奋毒性,从而起到脑保护作用。     

大鼠颅脑损伤后亚低温治疗对Calpain及作用底物MAP-2表达的影响

目的探讨亚低温治疗对颅脑损伤后Calpain、MAP-2基因和蛋白表达的影响。方法将54只SD大鼠随机分为假手术组（n=6）、常温脑损伤组（n=24）和亚低温脑损伤组（n=24）。亚低温脑损伤组在液压打击伤后即接受持续4h的亚低温治疗。伤后6h、12h、24h和72h4个时间点分别处死3只常温脑损伤组和亚低温脑损伤组大鼠。荧光PCR、Western blot半定量检测皮质Calpain及MAP-2基因转录和蛋白的表达。结果颅脑损伤后12h及24h亚低温使Calpain mRNA表达增加（P〈0．05）,伤后6h、12h、24h和72h亚低温均可减少Calpain蛋白的升高,伤后12h及72h尤其显著（P〈0．05）。与假手术组比较,常温脑损伤组和亚低温脑损伤组MAP-2基因转录均减少（P〈0．05）;与常温脑损伤组比较,伤后6h、12h和24h亚低温可抑制MAP-2基因转录的下调,但亚低温脑损伤组MAP-2蛋白的表达均比同时间点常温组低（P〈0.05）。结论颅脑损伤后亚低温治疗的脑保护机制可能与调节Calpain蛋白的表达有关,而亚低温与MAP-2的关系还有待进一步研究。