γ干扰素上调吉兰一巴雷综合征患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的研究

目的探讨γ干扰素（IFN-γ）诱导吉兰-巴雷综合征（GBS）患者外周血CD4^＋CD25 T细胞转化为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的可行性。方法不同浓度IFN-γ刺激GBS患者外周血中的CD4^＋CD25T细胞。Real-timePCR检测诱导CD4^＋CD25^＋调节性T细胞中FoxP3的表达,共培养检测其抑制功能;结果与健康人中天然的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比较。结果IFN-γ可诱导CD4^＋CD25^＋T细胞转化为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞。IFN-γ40ng.mL^-1诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞中FoxP3表达含量最高,但仍然低于天然的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞;其抑制能力最强,与天然的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比较差异无统计学意义。结论IFN-γ可诱导GBS患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞转化为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞,IFN-γ,40ng.mL^-1诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞表型和功能与天然的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞相当。     

γ-干扰素诱导人外周血CD4~+CD25~-T细胞转化为CD4~+CD25~+调节性T细胞的可行性研究

目的研究γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)将人外周血CD4~+CD25~- T细胞诱导为CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Tregs)的可行性。方法采用免疫磁珠法分离19名健康志愿者外周血单个核细胞中的CD4~+CD25~- T细胞,在抗CD3和抗CD28抗体存在条件下给予不同水平IFN-γ刺激72 h,以流式细胞仪检测CD4~+CD25~+T细胞比例并以real time-PCR法检测其特异性表型标志FoxP3表达水平。将诱导生成的CD4~+CD25~+T细胞与自体CD4~+CD25~-T细胞共培养检测诱导生成的CD4~+CD25~+T细胞抑制CD4~+CD25~-T细胞增殖的能力。结果IFN-γ刺激后CD4~+CD25~+T细胞比例上调且其FoxP3表达较诱导前明显增高,当IFN-γ水平为20、40 ng/mL时,CD4~+CD25~+T细胞上调比例最高;40 ng/mL IFN-γ诱导的CD4~+CD25~+T细胞FoxP3表达最高,但不及CD4~+CD25~+Tregs。IFN-γ诱导所得CD4~+CD25~+T细胞可抑制自体CD4~+CD25~-T细胞增殖,40 ng/mL IFN-γ诱导的CD4~+CD25~+T细胞抑制能力与CD4~+CD25~+Tregs相当。结论 IFN-γ可诱导CD4~+CD25~-T细胞转化为CD4~+CD25~+T细胞,当IFN-γ水平为40 ng/mL时诱导率最高且诱导生成的CD4~+CD25~+T细胞表型和功能与CD4~+CD25~+Tregs相当。     

雷公藤内酯醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎外周血及中枢神经系统中CD4+T淋巴细胞的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇（Tri）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）外周血及中枢神经系统中CD4^＋T淋巴细胞的影响，为Tri临床应用提供实验依据。方法 建立EAE大鼠模型，给予Tri预防性治疗．流式细胞术检测大鼠外周血的CD4^＋T淋巴细胞变化，免疫组化观察中枢神经系统中CD4^＋T淋巴细胞的浸润情况。结果 与生理盐水模型组比较，Tri治疗组的发病率显著降低，中枢神经系统中CD4^＋T淋巴细胞的浸润显著减少，而外周血CD4^＋T淋巴细胞的量变化不大。结论 Tri可能通过抑制CD4^＋T淋巴细胞在中枢神经系统的浸润，而阻止EAE的发病，提示Tri在治疗人类多发性硬化方面有一定应用前景。     

多发性硬化患者外周血CD4+CD25+ T细胞变化及其机制探讨

目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血CD4 CD25 T细胞数量及叉头样转录因子(FOXP3)表达水平与MS病情的关系。方法选择温州地区MS患者44例(男12例、女32例),均按Poser诊断标准诊断,结合头颅MRI增强扫描排除合并其他神经系统和免疫系统疾病,并统一行EDSS评分;对照组43例(男13例、女30例)为健康查体者。具体方法:流式细胞仪检测外周血CD4 CD25 T细胞数量;免疫磁珠法分离CD4 CD25 T细胞;RT-PCR法检测CD4 CD25 T细胞FOXP3 mRNA表达并进行半定量分析。结果MS患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞数量与对照组比较无明显变化(P>0.05);活化的效应性T细胞数量增加(P<0.05)且活动期增加更为显著(P<0.01)。同一个体疾病活动期外周血CD4 CD25 调节性T细胞数量较非活动期减少(P<0.05)。MS患者外周血中CD4 CD25 T细胞的FOXP3 mRNA表达降低(P<0.05),且活动期降低更明显(P<0.01)。结论此组MS患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞抑制活性降低,FOXP3 mRNA表达减少,活化的效应性T细胞数量增加,且与MS疾病活动性有关。     

CD4+CD25+Treg细胞与缺血性卒中的研究进展

调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）是T细胞的一种重要亚群,对于维持机体免疫自稳、防止自身免疫病等具有重要的作用。目前认为,免疫炎性反应贯穿于缺血性卒中发生发展的全过程,脑缺血及缺血后的再灌注所引发的免疫炎性反应在脑缺血再灌注损伤中发挥重要作用。Treg细胞作为负性免疫调节作用细胞,能够明显抑制脑缺血再灌注损伤引起的局部炎性反应,具有一定的脑保护作用。本文综述了CD4⁺CD25⁺Treg细胞在缺血性卒中发病机制中的作用。     

睾丸内胰岛移植对CD4+ CD25+调节性T细胞分布的影响

背景：CD4+ CD25+调节性T细胞是维持机体免疫耐受的重要调控者，参与了多种移植免疫耐受的诱导。 目的：拟观察小鼠睾丸内胰岛移植后CD4+ CD25+调节性T细胞分布的特点。 设计、时间及地点：观察对照动物实验，2007-04/2008-01在江西省实验动物中心完成。 材料：成年Balb/c小鼠。 方法：分离小鼠胰岛细胞，采用胰管内注射胶原酶水浴消化及Ficoll 400不连续密度梯度离心法纯化，以双硫腙染色，计算胰岛细胞纯度，以体外葡萄糖刺激胰岛素分泌试验判定胰岛细胞功能。将胰岛移植至小鼠睾丸或肾包膜下，每只移植300~400个胰岛。在胰岛移植24 h后麻醉处死小鼠，取脾脏、睾丸及淋巴结，制成细胞悬液，免疫磁珠法分离CD4+CD25+ T细胞，通过流式细胞仪分析计数。 主要观察指标：胰岛细胞的纯度及功能，CD4+ CD25+调节性T细胞的分布。 结果：纯化后每只胰腺获得(478±53)个胰岛细胞，纯度为(81.5±12.3)%，纯化后细胞形态完好，活度大于90%。睾丸内胰岛移植时，睾丸、淋巴结及脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞均显著增多（P < 0.05~0.01）。 结论：睾丸内胰岛移植能明显上调睾丸、淋巴结及脾脏中CD4+ CD25+调节性T细胞数量。     

CD4+CD25+ T细胞的扩增及其功能分析*☆

背景：CD4+CD25+ T细胞增殖能力低,且在人外周血中仅占单个核细胞的4%左右。若能在体外高效扩增CD4+CD25+ T细胞,并保持其免疫调节特性,将会对临床移植产生积极的影响。 目的：观察C57BL/6小鼠来源的CD4+CD25+ T细胞体外增殖情况及其扩增后的功能变化。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-10/2008-05在南方医科大学珠江医院血液科完成。 材料：SPF级C57BL/6及BALB/C雄性小鼠购自南方医科大学动物所。小鼠白血病细胞EL9611由珠江医院血液科惠赠。 方法：利用免疫磁珠法分选小鼠CD4+CD25+ T细胞;以抗鼠 CD3ε单抗、抗鼠CD28单抗、鼠重组白细胞介素2及辐射过的BALB/C小鼠脾细胞为共刺激因子,通过实时定量RT-PCR检测扩增后CD4+CD25+ T细胞FoxP3基因mRNA表达变化,以确定增殖效率;3H-TdR掺入法检测扩增后的CD4+CD25+ T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的影响;LDH释放法检测扩增后的CD4+CD25+ T细胞对CD4+CD25-T细胞杀伤小鼠白血病细胞EL9611的影响,以CD4+CD25-T细胞为效应细胞,以EL9611细胞为靶细胞。 结果：经免疫磁珠分选可获得高纯度及较强活性的CD4+CD25+ T细胞。扩增后CD4+CD25+T细胞FoxP3基因mRNA的表达平均为扩增前的5.46倍,最高可达14.39倍。扩增后CD4+CD25+T细胞可明显抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,且随着CD4+CD25+T细胞数的增加,这种抑制增殖的能力也逐渐增强,当两者比例为1:1时抑制率最大,达62.05%。与单纯CD4+CD25- T细胞对EL9611细胞杀伤率比较,效靶比为10:1时扩增后的CD4+CD25+ T细胞联合CD4+CD25- T细胞的杀伤率无明显变化（t=2.199,P > 0.05）;效靶比为5:1时扩增后的CD4+CD25+ T细胞联合CD4+CD25- T细胞的杀伤率则明显降低（t=5.839,P < 0.05）。 结论：单抗加异源性抗原能有效扩增CD4+CD25+T细胞;扩增后的CD4+CD25+T细胞比新鲜分离的CD4+CD25+T细胞能更有效地抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,其对CD4+CD25-T细胞杀伤白血病细胞的作用则取决于其与CD4+CD25-T细胞的相对比例。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与神经系统自身免疫性疾病研究进展

调节性T细胞是一群具有免疫抑制功能的T淋巴细胞,是维持机体免疫耐受的关键细胞,在免疫系统中扮演着不可或缺的角色。近年来,调节性T细胞数量或功能的改变与免疫性疾病的相关性成为研究热点。现对CD4~+CD25~+调节性T细胞与神经系统自身免疫性疾病的研究进展进行综述,进而了解调节性T细胞参与自身免疫性疾病发病的机制,为自身免疫性疾病的治疗探寻新的途径。     

CD4^＋CD25^＋Tregs外周转化相关因素及CD4^＋CD25^＋Tregs在神经免疫疾病中的研究

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells, CD4+CD25+ Tregs)是具有调节功能的成熟T细胞亚群,在神经免疫疾病中具有重要作用.近年来证实CD4+CD25+ Tregs不仅由胸腺发育而来,且可在外周血中转化生成.通过研究其转化的因素,可达到控制CD4+CD25+ Tregs活动并促进神经免疫疾病向良性方向发展的目的 ,为在细胞水平治疗神经免疫疾病提供新的治疗手段.     

外周血CD4+CD25highTreg细胞的比例变化在肾移植受者术后免疫监测中的临床应用研究

目的 研究外周血CD4+CD25highTreg细胞(regulatory T cell,Treg)比例对肾移植受者免疫力的影响,为CD4+CD25highTreg细胞的比例变化作为评估移植受者免疫状态及作为预测排斥反应和感染的特异性指标提供实验依据。方法 肾移植受者52例按肾移植术后恢复情况分为免疫力正常组26例,发生排斥反应组17例,发生感染组9例,用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25highTreg细胞的比例,所得结果进行相关分析。结果 发生急性排斥反应组CD4+CD25highTreg细胞比例较免疫力正常组显著降低（p〈0.05）,发生感染组外周血CD4+CD25highTreg细胞的比例较正常组显著升高（p〈0.01）,均有统计学意义。FK-506和CsA分别对CD4+CD25highTreg细胞比例的影响没有显著性差异。结论 肾移植术后受者外周血CD4+CD25highTreg细胞比例与受者免疫状态密切相关。CD4+CD25highTreg细胞比例的变化可以反应机体的免疫状态的变化,其升高或降低可以作为预测肾移植受者术后发生感染或排斥反应的指标之一。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血CD4+CD25+T细胞的研究

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)动物模型血CD4 CD25 T细胞的变化及其意义。方法以豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH)为抗原免疫Wistar大鼠,建立EAE的动物模型,采用三色流式细胞仪检测EAE和正常大鼠外周血CD4 CD25 T细胞的细胞数并进行比较;通过观察大鼠行为学及脑和脊髓的病理改变确定EAE。结果EAE模型大鼠的成功率为48.9%,EAE大鼠外周血CD4 CD25 T淋巴细胞数(5.29±4.00)显著低于正常对照组(12.61±2.24)(P<0.01)。结论EAE大鼠血CD4 CD25 T细胞数明显减少,CD4 CD25 T淋巴细胞对神经系统脱髓鞘疾病是一种保护因子。     

强迫症的药物治疗——强迫症患者细胞免疫学改变的相关研究

目的：探讨强迫症细胞免疫功能变化及其与焦虑、抑郁和强迫症状的相关性。方法：对36例强迫症患者和36名健康对照者采用抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)、强迫症量表(Y-BOCS)测查；采用免疫组化碱性磷酸酶桥联酶标法(APAAP)测定T细胞亚群。结果：强迫症患者CD4^ 、CD4^ ／CD8^ 比例显著低于对照组，CD4^ 、CD4^ ／CD8^ 比例与强迫思维、焦虑呈显著负相关。结论：强迫症患者的细胞免疫功能下降，并且与强迫思维、焦虑等症状有密切关系。     

调节性T细胞与胶质瘤免疫研究进展

调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一群具有抑制其他免疫细胞功能的负调控细胞,Treg细胞通过多种机制抑制CD4+T和CD8+T淋巴细胞、NKT细胞、B淋巴细胞、树突状细胞以及单核细胞/巨噬细胞等的分化和效应功能,是肿瘤免疫逃逸的关键因素;同时肿瘤细胞可以通过分化、扩增或招募Treg细胞有效地抑制抗肿瘤免疫,所以Treg细胞在肿瘤的发生、发展过程中发挥着极为重要的作用,是免疫治疗新的有效靶点。文章就其近年来在胶质瘤免疫领域的研究进展做一综述。     

抑郁症中糖皮质激素受体与CD4+CD25+调节性T细胞的关系及其所致免疫失衡机制的初步探讨

目的 研究抑郁症患者外周血细胞因子白介素-10(IL-10)、转化生长因子β(TG-β)的变化、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的数量及其特征性标志叉头样转录因子P3(Foxp3)的表达与糖皮质激素受体(GR)的表达之间的关系,探讨抑郁症患者免疫失衡的可能机制.方法 纳入36例抑郁症患者和36名正常对照,根据Hamilton抑郁量表总分将患者划分为轻、中和重不同抑郁程度组;利用ELISA方法测定受试者外周血血清细胞因子IL-10、TGF-β浓度;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GR的α及β两种亚型(GRα、GRβ)、Foxp3 mRNA表达水平;免疫磁珠分离CD4+ CD25+ Treg,共聚焦显微镜观察Foxp3与GR在CD4+CD 25+ Treg上的共表达.结果 与正常对照组比较,患者组血清IL-10、TGF-β的水平降低(P＜0.05),外周血CD4+ CD25+ Treg数量及在CD4+T细胞中的比例明显少于对照组(P＜0.01),且重度抑郁组上述指标明显低于中度和轻度抑郁组(P＜0.01).抑郁各组单个核细胞GRamRNA和FoxP3 mRNA表达水平随抑郁程度而降低(P＜0.01),GRβmRNA却在重度抑郁组表达增加.共聚焦显微镜下可观察到重度抑郁患者CD4+CD25+Treg上GR与Foxp3表达显著减少.结论 糖皮质激素受体可能通过影响调节性T细胞的功能和数量在抑郁症患者免疫失衡的病理生理机制中发挥着重要的作用.     

胶质母细胞瘤组织中CD4+T细胞人类白细胞抗原G受体表达简

目的探讨三种主要人类白细胞抗原G（HLA—G）受体，即CD158d、CD85j和CD85d，在胶质母细胞瘤中CD4^＋T细胞的表达情况。方法分离胶质母细胞瘤和正常脑组织中CD4^＋T细胞利用佛波酯和离子霉素进一步激活CD4^＋T细胞。利用流式细胞术分析CD4^＋T细胞三种HLA—G受体的表达。结果胶质母细胞瘤中CD4^＋T细胞表面CD158d、CD85j和CD85d的表达阳性率较正常脑组织明显升高（P〈0．05），应用佛波酯和离子霉素刺激后，这三种受体表达水平显著增高（P〈0．05）。结论胶质母细胞瘤中CD4^＋T细胞存在HLA—G受体表达的上调现象，高表达HLA—G受体可能与肿瘤中T细胞功能抑制并最终引发肿瘤的免疫逃逸有关。     

重症肌无力患者Foxp3~+CD4~+CD25~+调节性T细胞与AChRAb、Titin-Ab的相关研究

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者Foxp3~+CD4~+CD25~+调节性T细胞(Foxp3~+CD4~+CD25~+Treg)与乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)及连接素抗体(Titin-Ab)之间的关系,进一步揭示MG的发病机制。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测22例MG患者以及20名健康对照者血清AChRAb和Titin-Ab水平;采用流式细胞术(FCM)检测两组外周血中CD4~+CD25~+Treg的比例及其表达Foxp3的比例。结果 MG患者外周血CD4~+CD25~+Treg比例[(2.9±0.52)%]与健康对照组[(3.12±0.51)%]比较无统计学差异(P0.05);CD4~+CD25~+Treg细胞Foxp3表达比例为(37.24±9.57)%,低于健康对照组[(58.60±4.91)%](P0.01)。MG组CD4~+CD25~+Treg表达Foxp3比例与AChRAb、Titin-Ab水平[分别为(0.232±0.060)和(0.170±0.035)pg/mL]均呈负相关(r=-0.449,P0.05;r=-0.691,P0.01)。结论 Foxp3~+CD4~+CD25~+Treg细胞数目减少导致机体免疫功能缺陷是MG发病的重要环节。     

后循环短暂脑缺血发作患者外周Treg、IL-17检测及意义

目的探讨后循环短暂缺血发作（TIA）患者外周血CD4。CD25’调节性T细胞（Treg）比例、白介素17（IL-17）的水平变化及意义。方法2012年9月至2013年2月纳入后循环TIA患者65例,根据ADCD2评分分为高危组（4～7分,34例）和低危组（0～3分,31例）,另取同期本院体检中心健康成人30例作为对照组。采用流式细胞分析法及酶联免疫吸附法检测各组外周血Treg占CD4＋T细胞比例及血清IL-17浓度值。结果高危组外周血Treg与CD4’细胞比值（11．38±3．58）％显著低于低危组[（14．83±4．10）％,P〈0．05]和对照组[（15．60±4．19）％,P〈0．05],低危组和对照组没有统计学差异（P〉0．05）。高危组血清IL-17浓度[（312．65~63．69）pg／m1]和低危组[（290．13＋63．65）pg／ml,P〈0．05]显著高于对照组[（207．26±63．00）pg／ml,P〈0．05],而高危组和低危组之间无统计学差异（P〉0．05）。结论高危后循环TIA患者外周血Treg减少、IL-17浓度升高,可能是导致其外周血自身免疫调节失去平衡,进而发生脑梗死的原因之一。     

CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3与多发性硬化的关联

调节性T细胞(regulatoryT cell.Treg)是一类具有免疫调节功能的T细胞哑群,它们在维持外周免疫耐受、预防自身免疫性疾病的发牛过程中起着重要作用.     

FoxP3+ CD4+ CD25+调节性T细胞在重症肌无力发病机制中的作用

目的 在细胞与分子水平检验重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)的表达缺陷,探讨CD4+CD25+Tregs亚群异常与MG发病间的关系.方法 流式细胞技术检测21例MG患者(11例经胸腺切除)与20名健康对照者(healthy controls,HCs)外周血CD4+CD25+Tregs及FoxP3+CD4+CD25+Tregs含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)分析MG患者与HCs外周血CD4+CD25+Tregs中FoxP3 mRNA的表达.结果 MG患者外周血CD4+CD25+ Tregs占CD4+T细胞含量与HCs比较无统计学差异(P＞0.05).MG患者外周血FoxP3+CD4+CD25+ Tregs含量及FoxP3 mRNA表达量与HCs比较均显著性降低(P＜0.05);胸腺切除的MG患者与未经胸腺切除的MG患者外周血FoxP3+CD4+CD25+ Tregs含量及FoxP3mRNA表达量无统计学差异(P＞0.05).结论 MG患者外周血CD4+CD25+ Tregs数量正常,但其表面分子FoxP3的表达下调,这种CD4+CD25+ Tregs亚群的异常发现有助于深入阐明MG的免疫发病机制.     

重症肌无力患者外周血CD4+T细胞OX40的表达及作用机制研究

目的 分析重症肌无力(MG)患者外周血CD4+T细胞协同刺激分子OX40表达及其对FoxP3+CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的调控作用,初步探讨OX40在MG免疫学发病中的作用机制.方法 以流式细胞技术检测42例MG患者及38名健康对照的外周血OX40+CD4+T细胞、FoxP3+CD4+CD25+Treg表达水平,比较OX40表达在MG患者不同临床疾病状态、Osserman分型、临床绝对评分、胸腺病理类型等情况下的差异,并分析OX40对FoxP3+CD4+CD25+Treg细胞的影响.结果 (1) MG患者外周血OX40+CD4+T细胞占淋巴细胞百分比高于健康对照组(P<0.01).(2)MG患者OX40+CD4+T细胞百分比在发作或加重期高于缓解期(P＜0.05);在临床绝对评分呈中、重度患者OX40+CD4+T细胞百分比高于轻度患者(均P＜0.05);Osserman Ⅱ、Ⅳ型患者OX40+CD4+T细胞百分比高于Ⅰ型患者(均P＜0.05);胸腺增生及胸腺瘤患者OX40+CD4+T细胞百分比高于胸腺正常患者(P＜0.05,P＜0.01).(3)MG患者外周血OX40+CD4+T细胞百分比与FoxP3+CD4+CD25+Treg细胞百分比呈负相关(r=-0.843,P=0.01).结论 协同刺激分子OX40参与MG发病,可能通过抑制FoxP3+CD4+CD25+Treg细胞生成发挥作用.