神经生长因子在胎脑组织保存和移植中的应用

大鼠胚胎脑组织放入神经生长因子（ＮＧＦ）溶液或ＤＭＥＭ培养液中保存１～６天，观察不同时间细胞存活率，ＮＧＦ组均高于ＤＭＥＭ组。将这两种液体中保存５天的组织分别植入两组成年大鼠脑内，６～８周后组织学观察发现，ＮＧＦ组移植成活４／１０，对照组移植物成活３／９．尽管两组移植物成活率比较差别不显著（Ｐ＞０．０５），但是移植物生存质量ＮＧＦ组明显优于对照组。     

大鼠胶质细胞源性神经营养因子的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

用逆转录一聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）以大鼠纹体总ＲＮＡ为模板，扩增了大鼠胶质细胞源性神经营养因子（ｒＧＤＮＦ）成熟序列的ｃＤＮＡ片段，将此ｃＤＮＡ克隆到载体ｐＧＥＭ－Ｔ中，对重组质粒进行限制酶切分析和序列测定，确定为含ｒＧＤＮＦｃＤＮＡ的重组质粒，将该ｒＧＤＮＦｃＤＮＡ重组到融合表达载体ｐＧＥＸ－１λＴ内，在大肠杆菌中较高的表达。     

TGF－β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达γ干扰素（ＩＦＮ－γ）、白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与ＥＡＭＧ对照组相比，某些淋巴器官中ＡＣｈＲ诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４数降低，ＡＣｈＲ诱导的ＴＧＦ－β细胞明显上调。提示ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＴＧＦ－β与ＥＡＭＧ的发病有关，而ＴＧＦ－β高调在鼻腔ＡＣｈＲ耐受ＥＡＭＧ中起重要作用。     

神经生长因子对严重烫伤大鼠纹状体及海马NOS阳性神经元的影响

应用ＮＡＤＰＨ－ｄ 酶组织化学方法，观察了大鼠烫伤后脑内ＮＯＳ阳性神经元数目和阳性反应面积的变化及ＮＧＦ对其影响。结果显示：大鼠体表烫伤后３ 天，纹状体ＮＯＳ阳性神经元数目明显增加，染色呈强阳性，阳性反应面积增加。海马的ＮＯＳ阳性神经元数变化不明显，仅见阳性反应面积增加，ＮＧＦ可降低纹状体的ＮＯＳ阳性神经元数目、阳性反应面积，ＮＯＳ阳性神经元着色较淡；海马的ＮＯＳ阳性反应面积减少，ＮＧＦ的作用与Ｌ－ＮＡＭＥ抑制ＮＯＳ的作用相似。这些结果提示，ＮＧＦ可能通过降低ＮＯＳ活性，从而减轻烫伤引起的神经元损伤。     

TGF—β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达子γ干扰素（ＩＦＮ－γ）白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠Ｇｕｏ窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与Ｅ     

腺病毒介导反义IGF-1抑制鼠胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的重组腺病毒反义ＩＧＦ－１基因（ＡｄＨＣＭＶ－ＩＧＦ－１Ａ）治疗大鼠Ｃ６胶质瘤。方法体外克隆反义ＩＧＦ－１３００ｂＰ基因片段重组入腺病毒,经扩增纯化,测定滴度,体外体内感染Ｃ６胶质瘤细胞,观察ＩＧＦ－１的表达及肿瘤大小、生存期变化。结果重组腺病毒反义ＩＧＦ－１滴度６．５×１０１０ｐｆｕ／ｍｌ,反义ＩＧＦ－１基因序列正确,体外Ｃ６－Ａｄ－ＩＧＦ－１Ａ的ＩＧＦ－１表达降低,Ａｄ－ＩＣＦ－１Ａ治疗皮下Ｃ６肿瘤细胞接种组,肿瘤完全消失。与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０１）,Ａｄ－ＩＧＦ－１Ａ治疗脑内Ｃ６肿瘤细胞接种组,大鼠生存期超过９０天,而对照组分别为１６．５±１．４天（Ａｄ－ｌａｃｚ组）、１５．７±１．６天（生理盐水组）,Ｐ＜０．００１。结论重组腺病毒反义ＩＧＦ－１可抑制Ｃ６细胞ＩＧＦ－１的表达,ＡｄＨＣＭＶ－ＩＧＦ－１Ａ治疗大鼠Ｃ６胶质瘤效果显著。     

重症肌无力B细胞免疫应答涉及乙酰胆碱受体的全部亚单位

用酶联免疫斑点（Ｅｌｉｓｐｏｔ）法计数乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）及其α－、β－、γ－和δ－４种亚单位的特异性ＩｇＧ抗体分泌细胞，评价重症肌无力（ＭＧ）患者外周血Ｂ细胞免疫应答。与其他神经疾病（ＯＮＤ）组相比，ＭＧ组存在显著高水平的ＡＣｈＲ及其４种亚单位的抗体分泌细胞，ＭＧ组４种ＡＣｈＲ亚单位的抗体分泌细胞平均值为１０／１０５～１５／１０５外周血单个核细胞（ＭＮＣ），ＯＮＤ组为０．６／１０５～１．４／１０５ＭＮＣ（Ｐ＜０．０００１）。ＭＧ组ＡＣｈＲ抗体分泌细胞数总是高于任何一种亚单位抗体分泌细胞数，且对α－亚单位的Ｂ细胞免疫应答占有明显优势，这可能是α－亚单位存在主要免疫源区（ＭＩＲ）的间接证据。     

腺病毒介导的HSV—tk基因治疗大鼠脑胶质瘤实验研究

目的：带有ＨＳＶ－ｔｋ基因的重组腺病毒（ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ）结合核苷类似物（ＮＡ）治疗大鼠Ｃ６脑胶质瘤。方法：用Ｘ－ｇａｌ染色测定ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ转染大鼠Ｃ６胶质瘤细胞的效率。用ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ／ＡＣＶ、ＧＣＶ离体及活体治疗大鼠Ｃ６胶质瘤。结果：ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ感染Ｃ６细胞效率达１００％，ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ感染Ｃ６细胞，在病毒感染复数为１０００时，ＧＣＶ和ＡＣＶ半致死剂量分别为３μｇ／ｍｌ和２０μｇ／ｍｌ，Ａｄ－ＨＣＭＶ－ｔｋ／ＡＣＶ治疗大鼠Ｃ６胶质瘤模型，大鼠生存期超过９０天，而对照组分别为１７．０±１．６天（生理盐水组）、１４．５±１．３天（ＡｄＨＣＭＶ－ｌａｃＺ组），Ｐ＜０．００１。结论：重组腺病毒对靶细胞感染效率可达１００％，ＡｄＨＣＭＶ－ｔｋ用ＧＣＶ的杀伤Ｃ６胶质瘤细胞比ＡＣＶ强，而ＨＳＶ－ｔｋ／ＡＣＶ用腺病毒介导治疗大鼠脑肿瘤疗效显著。     

运动神经元病患者血浆胰岛素样生长因子-1的变化

目的 探讨运动神经元病（ＭＮＤ）患者血浆胰岛素生长因子－１（ＩＧＦ－１）变化的临床意义。方法 应用放射免疫法测定２１例ＭＮＤ患者血浆ＩＧＦ－１水平,同时测定其血清胰岛素和空腹血糖水平,并设立正常对照组。结果 与正常对照组比较,ＭＮＤ患者血浆ＩＧＦ＿１水平显著下降,虽然两组血糖水平无明显差异,但口才组血浆胰钫 水平明显下降。结论 ＩＧＦ－１系统参与了ＭＮＤ的发病机理,神经营养支持的缺乏是导致髓运动元     

P物质对大鼠新鲜分离DRG神经元NMDA及GABA激活电流的调制作用

实验应用全细胞膜片钳技术在大鼠新鲜分离的背根神经节（ＤＲＧ）神经元胞体膜上观察到Ｐ物质（ＳＰ）对ＮＭＤＡ和ＧＡＢＡ激活电流有调制作用。单独给予ＳＰ（１０－８～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）可在ＤＲＧ神经元记录到一幅值较小的，浓度依赖性的无明显去敏感之内向电流。预加ＳＰ３０ｓ后，其对ＮＭＤＡ和ＧＡＢＡ激活电流分别具有明显的增强和抑制作用，而且ＳＰ对ＮＭＤＡ和ＧＡＢＡ激活电流的增强和抑制作用也是剂量依赖性的。如ＳＰ浓度为１０－７ｍｏｌ／Ｌ时，可使ＮＭＤＡ激活电流较之对照增强４６．３±７．２％（ｘ±ｓ，ｎ＝８）；使ＧＡＢＡ激活电流比对照减小３８．９±７．８％（ｘ±ｓ，ｎ＝６）．ＳＰ的此种调制作用可以在同一ＤＲＧ神经元上观察到。     

运动神经元病的单纤维肌电图的研究

目的研究单纤维肌电图（ＳＦＥＭＧ）对运动神经元病的辅助诊断价值及探讨单纤维肌电图异常率与其病型、病情的关系。方法应用单纤维肌电图技术对４８例运动神经元病（ＭＮＤ）患者，２４例颈椎性脊髓病（ＣＳＭ）患者及４２名健康正常受试者进行研究。结果ＭＮＤ患者的ＳＦＥＭＧ阳性率为７３％，ＣＳＭ患者的ＳＦＥＭＧ阳性率为４％。结论ＳＦＥＭＧ有助于鉴别ＭＮＤ与ＣＳＭ。ＳＦＥＭＧ异常率与病型无关，与病情有关，提示ＭＮＤ存在明显的神经肌肉接头传递功能障碍。     

不同类型Guillain—Barre‘综合征患者血清中TNF—α,IL—6水平？…

目的：探讨肿瘤坏死因子,白细胞介素６与不同类型Ｇｕｉｌｌａｉｎ－Ｂａｒｒｅ‘综合征（ＧＢＳ）发病机制的关系及临床意义。方法：采用ＥＬＩＳＡ法检测ＧＢＳ组,其中ＡＩＤＰ组,ＡＭＡＮ组和其它神经系统疾病组,正常对照组的血清中ＴＮＦ－α,ＩＬ－６的水平。结果;急性期ＡＩＤＰ组,ＡＭＡＮ组患者血甭中ＴＮＦ－α,ＩＬ－６水平明显高于两个对照组,且与病情轻重显著相关。     

新生期注射谷氨酸单钠对刺激下丘脑弓状核镇痛作用的影响

下丘脑弓状核（ＡＲＣ）是脑内β－内啡肽（β－ＥＮＤ）能神经元胞体集中的一个主要核团。新生期注射谷氨酸单钠（ＭＳＧ）能选择性地损毁ＡＲＣ中的神经元胞体而不累及路过纤维，是研究ＡＲＣ中神经元生理功能的一个良好模型。本实验利用这个实验模型研究刺激ＡＲＣ的镇痛效应。结果发现在这种ＭＳＧ处理的大鼠，刺激ＡＲＣ不再出现明显的镇痛效应（用电刺激鼠尾－嘶叫法测定）。这时脑室内注射β－ＥＮＤ（５μｇ／１０μｌ）能使刺激ＡＲＣ的镇痛效应恢复；若脑室注射多巴胺（ＤＡ，５μｇ／１０μｌ）不仅没有恢复作用，反而能削弱正常大鼠刺激ＡＲＣ的镇痛效应。实验结果提示，经ＭＳＧ处理的大鼠之所以不出现明显的镇痛效应，可能是由于ＡＲＣ中丧失了β－ＥＮＤ能神经元的结果，ＤＡ能神经元在其中不起重要作用。     

神经生长因子对大鼠脑缺血后海马CA1区神经细胞凋亡的影响

目的　研究神经生长因子（ Ｎ Ｇ Ｆ）在缺血性脑损伤中对神经细胞凋亡的影响。方法　采用大鼠 ４ 血管闭塞脑缺血模型， Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 方法原位标记 Ｄ Ｎ Ａ 片段，观察脑室内注射 Ｎ Ｇ Ｆ 后海马 Ｃ Ａ１ 区神经细胞凋亡的变化。结果　使用 Ｎ Ｇ Ｆ 后 ３ｄ 海马 Ｃ Ａ１ 区 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 阳性神经细胞数为神经细胞总数的１３．９％ ±１１．６％ ，与缺血对照组（２１．３％ ±１３．７％ ）比较显著减少（ Ｐ＜ ０．０１）。结论　外源性 Ｎ Ｇ Ｆ 对脑缺血所致的神经细胞凋亡可能具有一定的保护作用。     

脑源性神经营养因子对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元 …

目的 观察脑源性神经营养因子对帕金森病大鼠模型黑质多巴胺能神经元的影响。方法 将６－羟基多巴胺用立体定向注入大鼠一侧中脑黑质制作ＰＤ大鼠模型,并在注入６－羟基多巴胺之间每天向预伤侧壳核区定位注入ＢＤＮＦ,采用酪氨酸羟化酶免疫组化方法及透视电镜等观察ＢＤＮＦ对黑质多巴胺能神经元的显微超微结构影响。结果 ＢＤＮＦ能改善６－羟基多巴胺造成的ＰＤ大鼠黑质多巴胺能神经元数目减少及超微结构影响。结论 ＢＤＮＦ     

大鼠脑针刺损伤引起的碱性成纤维细胞生长因子变化与5‘—甲基？…

系统观察大鼠ＣＮＳ针刺损伤后表达ｂＦＧＦ、ＦＧＦ受体（ＦＧＦＲ）和ＧＦＡＰ的细胞种类、时相以及相互影响，探讨ＦＧＦＲ抑制剂－－５’－ＭＴＡ对体内反应生形胶质化的影响。将７５只ＳＤ雄性大鼠均分１５组：伤后０．５ｈ￣３０ｄ处死的实验组与对照组。将２０只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠均分２大组。甲组伤后４ｄ处死（５只加药鼠），乙组伤后８ｄ经（５只加药鼠）；其中非加药鼠作相应单纯损伤对照组。ＨＥ染色和免疫组化染色观     

丹参对颞叶缺血大鼠空间认知障碍的改善和对血小板源性生长 …

目的 探讨丹参对颞叶缺血性损害大鼠空间认知能力的改善作用及对血小板源性生长因子９ＰＤＧＦ）表达的影响。方法 采用光化学技术导致大鼠左侧颞叶皮层缺血，术前３０分钟及术后第３天分别给丹参组大鼠腹腔注射丹参１０ｇ／ｋｇ，用Ｍｏｒｒｉｓ迷宫及图像自动监系统监测大鼠行为。然后取脑进行梗死体积测定及ＰＤＧＦ－Ａ免疯组化分析。结果 丹参使颞叶缺血大鼠在Ｍｏｒｒｉｓ迷宫中搜索目标的反应进和行程显著缩短，使用正常认     

脑源性神经营养因子对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元的影响

目的 观察脑源性神经营养因子（Ｂｒａｉｎ ｄｅｒｉｖｅｄ－ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＢＤＮＦ）对帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ,ＰＤ）大鼠模型黑质多巴胺能神经元的影响。方法将６－羟基多巴胺用立体定向法注入大鼠一侧中脑黑质制作 ＰＤ大鼠模型,并在注入６－羟基多巴胺之间每天向预伤侧壳核区定位注入ＢＤＮＦ,采用酪氨酸羟化酶免疫组化方法及透射电镜等观察ＢＤＮＦ对黑质多巴胺能神经元的显微超微结构影响。结果　ＢＤＮＦ能改善６－羟基多巴胺造成的ＰＤ大鼠黑质多巴胺能神经元数目减少及超微结构影响。结论　ＢＤＮＦ可减轻６－羟基多巴胺对黑质多巴胺能神经元的毒性作用。     

老年期痴呆患者血液和脑脊液的氧自由基反应相关指标研究

测定了１８例老年期痴呆患者和１５例正常老年人血液及脑脊液中ＳＯＤ，ＧＳＨ－Ｐｘ活力以及ＭＤＡ含量等氧自由基反应相关指标。发现：ＣＳＦ中平均Ｔ－ＳＯＤ活力及ＳＯＤ／ＭＤＡ比值老年期痴呆组显著低于正常老年组；而ＣＳＦ中ＭＤＡ含量两组之间无显著差别。血清Ｔ－ＳＤＯ活力和铨血ＧＳＨ－Ｐｘ活力以及血清ＭＤＡ含量在两组之间无明显差异。     

突触体研究简介

突触体研究简介吴馥梅，杨丽娅，萧信生南京大学生物科学与技术系神经生物学研究室南京２１００９３ＢＲＩＥＦＲＥＶＩＥＷＯＦＳＹＮＡＰＴＯＳＯＭＡＬＲＥＳＥＡＲＣＨ￥ＷＵＦｕ－Ｍｅｉ；ＹＡＮＧＬｉ－Ｙａ；ＸＩＡＯＸｉｎ－Ｓｈｅｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ...