急性脑缺血再灌注大鼠不同脑区乙酰胆碱酯酶活性的变化

本文旨在探讨胆碱能神经在脑缺血再灌注时的变化和意义。采用双侧颈总动脉夹闭（CCAO）的大鼠脑缺血动物模型,用改良的Ellman法测定大脑皮层、海马、间脑、纹状体和脑子五个脑区乙酰胆碱酯酶（AChE）活性,观察脑缺血30分钟和再灌注30分钟不同脑区AChE活性的变化。结果发现：在生理状态下不同胞区AChE活性不同,纹状体最高（181．8±1．7μ／g）,皮层最低（24．1±0．4μ／g）,CCAO30分钟皮层、海马、间脑、纹状体的AChE活性均明显下降,较正常大鼠分别降低278％、26．3％、16．9％、23．6％（P＜0．01）,再灌注30分钟后分别回升18.4％、17.6％、10．2％、23．7％（P＜0．01）。而脑干在缺血和再灌注中无显著变化。结果提示不同胞区胆碱能活性程度不同;脑AChE活性对缺血和再灌注是敏感的,推测胆碱能神经可能在缺血性脑损伤中起重要作用。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织STAT3变化的免疫组织化学研究

目的 探讨信号转导和转录激活子（ＳＴＡＴ）３在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的表达及其与缺血性神经细胞损伤的关系方法 用ＡＢＣ免疫组化方法观察大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中的ＳＴＡＴ３蛋白免疫反应阳性细胞分布。结果 正常和假手术大鼠脑内以及脑缺血后的非缺血半球脑组织中未发现有ＳＴＡＴ３免疫反应阳性细胞,脑缺血再灌注损伤后１２小时在栓塞侧梗死区可见少量ＳＴＡＴ３免疫阳性细胞,２４小时后阳性细胞显著增多达高峰,在缺血侧纹状体和缺血皮质周边区表达最明显,１周后梗死周边区少数神经细胞仍有阳性表达。差异有显著意义（Ｐ〈０．０１）。结论 ＳＴＡＴ３活化及超量表达可能介导了缺血神经细胞信号转导过程,并参与了脑缺血神经细胞损伤与修复的病理生理过程。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注后MMP-9表达和脑水肿的影响

目的通过研究亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达和脑水肿的影响，探讨亚低温脑保护的可能机制。方法雄性SD大鼠72只，随机分为假手术组、亚低温组、常温组，线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注48h模型，缺血时间2h。采用比色法测定脑组织中伊文思蓝（EB）含量反映血脑屏障（BBB）通透性；干-湿重法检测脑组织含水量；免疫组化法检测MMP-9表达。结果与假手术组相比，缺血鼠缺血侧脑组织的EB含量及脑含水量明显增高，可见大量MMP-9免疫阳性细胞（P〈0．05）。亚低温组和常温组大鼠脑EB含量分别为（22．42±1．86）μg/g脑重和（38．67±2．94）μg／g脑重，脑含水量分别为80．07％±0．56％和82．49％±0．97％，皮质缺血区MMP-9阳性细胞IOD值分别为380．33±40．87和695．16±67．67，纹状体区MMP-9阳性细胞IOD值分别为294．19±33．47和451．87±5．77，差异均有显著性意义（P〈0．05）。亚低温明显减轻缺血脑组织病理学损伤。结论推测亚低温可通过抑制MMP-9表达，减轻BBB的破坏，继而减轻脑水肿，从而发挥确实的脑保护作用。     

大鼠脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性的改变及转移生长因子β1的表达

目的：探讨大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障（BBB）通透性的改变以及转移生长因子β1（TGF－β1）在脑组织中的表达。方法：采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，通过测定脑组织中伊文氏蓝（EB）含量及免疫组化法来观察TGF－β1的表达。结果：缺血2h再灌注3h,BBB 通透性开始增加，24h达高峰，72h后明显减弱。同时，TGF－β1在缺血再灌注3h开始表达，24h达高峰，持续至72h,72h后逐渐减弱。结论：脑缺血后BBB的破坏与TGF－β1的表达密切相关，提示TGF－β1参与了BBB内皮细胞破坏的修复过程。     

脑缺血再灌注大鼠脑内angiogenin的动态变化

目的观察大鼠脑缺血再灌注后angiogenin（ANG）在脑内表达水平的动态变化。方法大鼠大脑中动脉栓塞法（MCAO法）制作脑缺血再灌注模型,免疫组化染色检测ANG表达水平。结果ANG在正常大鼠脑内普遍弱阳性表达,脑膜、室管膜及血管染色较强。脑缺血2h再灌注3h后缺血脑区ANG表达水平较对侧增强（P＜0．05）,缺血再灌注24h后ANG表达水平达高峰,缺血再灌注3d及7d时ANG表达维持较高水平,缺血再灌注14d时ANG表达水平有所降低,但仍高于对照组,缺血再灌注21d时ANG表达水平与对照无显著差别。结论脑缺血再灌注大鼠缺血脑区ANG表达水平增强,并且表达水平随缺血再灌注后时间而变化。     

米诺环素对脑缺血再灌注后明胶酶活性及血脑屏障影响的研究

目的 探讨米诺环素对大鼠局部脑缺血再灌后血脑屏障损伤的影响及其作用机制.方法 28只Wistar大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、米诺环素组和生理盐水组.运用磁共振成像监测缺血再灌后血脑屏障损伤及梗死体积的变化,再灌注24h后进行神经功能缺陷评分和脑组织明胶酶活性测定.结果 缺血再灌后3.5h及24h,米诺环素组DWI、T2WI上异常高信号体积,T1WI增强扫描的信号强化范围、信号强度均明显低于缺血再灌注组和生理盐水组（P＜0.05）;与后两组相比,米诺环素组神经功能缺陷评分及脑组织明胶酶活性亦显著降低（P＜0.05）.结论 米诺环素能显著减轻缺血再灌注早期血脑屏障损伤,缩小梗死体积,促进神经功能恢复,其保护机制可能与米诺环素抑制脑组织明胶酶活性有关.     

单唾液酸四已糖神经节苷脂在脑缺血再灌注损伤中作用的实验研究

目的：观察单唾液酸四已糖神经节苷胸（GM1）对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用四血管闭塞（4VO）全脑缺血再灌注动物模型，测定假手术组，缺血30min再灌注60minGM1；处理组（10mg／kg，缺血5min腹腔注射），缺血30min再灌注60min生理盐水（NS）处理组鼠脑海马组织兴奋性氨基酸（ExcitatoryAminoAcid，EAA），钙调素（Calmodulin，CaM），丙二醛（Malondiadehyde，MDA）的含量。结果：脑缺血再灌注组海马组织EAA含量显著性降低（P〈0．01），而CaM、MDA则显著性升高（P＜0．01），GM1处理组海马EAA、CaM、MDA含量同假术术组比较没有显著性差异（P＞0．05）。结论：GM1能阻抑脑缺血再灌注损伤中EAA的过度释放和／或重摄取障碍，细胞内外钙平衡紊乱，氧自由基产生过多等病理生理过程，发挥脑保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障超微结构及紧密连接蛋白Occludin变化的研究

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注模型血脑屏障(BBB)超微结构和Occludin的变化,探讨BBB的结构改变及Occludin的表达异常在再灌注损伤中的作用。方法雄性Wistar大鼠,随机分成假手术组、缺血2h再灌注3h、12h、24h、72h组,应用透射电镜、RT-PCR、免疫组化和Western Blot等方法观察再灌注后不同时相缺血区皮质BBB的超微结构,Occludin mRNA和蛋白水平的变化。结果局灶性脑缺血再灌注后,缺血区皮质BBB的超微结构受损,Occludin mRNA和蛋白表达水平下调。上述变化开始于再灌注后3h,再灌注24h达到高峰,72h开始减弱。结论脑缺血再灌注过程中,BBB的超微结构损伤及Occludin的表达下降加重了缺血再灌注损伤。     

缺血再灌注对鼠脑血管内皮生长因子表达的影响

目的 了解血管内皮生长因子（VEGF）在一过性全脑缺血再灌注鼠脑表达的动态变化。方法 采用Pulisnelli改良法四血管堵塞全脑缺血再灌注模型,用免疫组织化学方法观察了全缺血15min再灌注2－14d时,VEGF表达的动肪变化。结果 全脑缺血15min再灌注6h VEGF即可在大脑皮层,纹状体及丘脑等区域的血管内皮细胞表达,1d达高峰,一直持续到缺血后再灌注3d,结论 脑缺血后再灌注可上调VEGF在大脑皮质,纹状体及丘脑等区域内皮细胞的表达,VEGF可能通过促进血管内皮细胞生长对缺血性神经元损伤起一定的作用。     

重组人促红细胞生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注炎症损伤的保护作用

目的 探讨重组人促红细胞生成素（r-HuEPO）对大鼠局灶性脑缺血再灌注炎症损伤的保护机制。方法 采用线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，应用ELISA方法检测r-HuEPO治疗前后缺血侧脑皮质TNF-α含量变化，应用Westernblot检测缺血侧脑皮质p38MAPK表达的变化。结果 与假手术组相比，缺血再灌注组脑皮质TNF-α、磷酸化p38MAPK表达水平明显增加，r-HuEPO可抑制缺血再灌注脑皮质TNF-α增加及磷酸化p38MAPK表达。结论 r-HuEPO可能通过抑制磷酸化p38MAPK表达，减少炎症因子TNF-α的释放而抑制脑缺血再灌注损伤炎症反应。