131I-Herceptin在昆明小鼠及荷人卵巢癌裸鼠模型中的生物分布和显像

目的 研究131 I标记抗人表皮生长因子受体-2蛋白(HER-2/neu)单克隆抗体Herceptin在正常昆明小鼠和荷人卵巢癌裸鼠体内的生物分布及荷人卵巢癌裸鼠的放射免疫显像特点.方法 (1)Iodogen法131I标记Herceptin,测定其标记率、放化纯、稳定性及免疫活性.(2)流式细胞仪和免疫组织化学法分别检测人卵巢癌SKOV-3、HO-8910细胞株及瘤组织HER-2/neu表达情况.(3)计算131I-Herceptin经昆明小鼠尾静脉注射后5,15,30 min和1,2,4,12,24,48,72 h及荷瘤裸鼠尾静脉注射后4,12,24和48h的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)和肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值.(4)行131I-Herceptin荷卵巢癌裸鼠模型显像,观察注射后1,2,4,8,12,24,48,72,96和120h显像情况并确定最佳显像时间.结果 (1)131I-Herceptin标记率为89.8%,放化纯为98.4%,24 h后仍大于80%,标记物免疫活性较好.(2)SKOV-3细胞株HER-2/neu高表达,表达率92.67%;而HO-8910细胞株表达很低,表达率仅9.59%.(3)131I-Herceptin在昆明小鼠体内主要经肝、脾及肾代谢,血液快相半排期为0.27 h,慢相半排期为51.96h.在荷人SKOV-3移植瘤部位,24 h时放射性摄取值达到18.08%ID/g,显著高于其他脏器组织;T/NT比值随时间延长逐渐增高,72 h时肿瘤/脑放射性比值高达27.27.(4)SKOV-3荷瘤裸鼠在尾静脉注射131I-Herceptin后2 h即可见移植瘤放射性浓聚,48 h后与周围组织对比更为明显,至120 h时仍见移植瘤部位放射性明显浓聚,与对侧感兴趣区比值高达11.44.而HO-8910荷瘤裸鼠各时间点移植瘤几乎未见放射性浓聚.结论 131I-Herceptin对荷人SKOV-3移植瘤具有良好的靶向作用,有望用于高表达HER-2/neu的人卵巢癌患者放射免疫显像及其复发转移灶的靶向治疗.     

131I-Herceptin在昆明小鼠及荷人卵巢癌裸鼠模型中的生物分布和显像

目的 研究131 I标记抗人表皮生长因子受体-2蛋白(HER-2/neu)单克隆抗体Herceptin在正常昆明小鼠和荷人卵巢癌裸鼠体内的生物分布及荷人卵巢癌裸鼠的放射免疫显像特点.方法 (1)Iodogen法131I标记Herceptin,测定其标记率、放化纯、稳定性及免疫活性.(2)流式细胞仪和免疫组织化学法分别检测人卵巢癌SKOV-3、HO-8910细胞株及瘤组织HER-2/neu表达情况.(3)计算131I-Herceptin经昆明小鼠尾静脉注射后5,15,30 min和1,2,4,12,24,48,72 h及荷瘤裸鼠尾静脉注射后4,12,24和48h的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)和肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值.(4)行131I-Herceptin荷卵巢癌裸鼠模型显像,观察注射后1,2,4,8,12,24,48,72,96和120h显像情况并确定最佳显像时间.结果 (1)131I-Herceptin标记率为89.8%,放化纯为98.4%,24 h后仍大于80%,标记物免疫活性较好.(2)SKOV-3细胞株HER-2/neu高表达,表达率92.67%;而HO-8910细胞株表达很低,表达率仅9.59%.(3)131I-Herceptin在昆明小鼠体内主要经肝、脾及肾代谢,血液快相半排期为0.27 h,慢相半排期为51.96h.在荷人SKOV-3移植瘤部位,24 h时放射性摄取值达到18.08%ID/g,显著高于其他脏器组织;T/NT比值随时间延长逐渐增高,72 h时肿瘤/脑放射性比值高达27.27.(4)SKOV-3荷瘤裸鼠在尾静脉注射131I-Herceptin后2 h即可见移植瘤放射性浓聚,48 h后与周围组织对比更为明显,至120 h时仍见移植瘤部位放射性明显浓聚,与对侧感兴趣区比值高达11.44.而HO-8910荷瘤裸鼠各时间点移植瘤几乎未见放射性浓聚.结论 131I-Herceptin对荷人SKOV-3移植瘤具有良好的靶向作用,有望用于高表达HER-2/neu的人卵巢癌患者放射免疫显像及其复发转移灶的靶向治疗.     

131I标记B细胞淋巴瘤Fab抗体荷瘤裸鼠体内分布和显像

目的 研究131I标记B细胞淋巴瘤Fab抗体(131I-Fab抗体)在荷人B细胞淋巴瘤裸鼠体内的分布和放射免疫显像效果.方法 应用免疫组织化学和流式细胞仪检测经噬菌体抗体库技术获得的B细胞淋巴瘤Fab抗体的免疫活性.以Iodogen法对Fab抗体和CD20单克隆抗体(简称单抗,对照)进行131I标记.标记物经尾静脉注入荷瘤裸鼠后2,4,8和24 h分别进行显像,并测定荷瘤裸鼠体内主要组织的放射性分布.结果 免疫组织化学和流式细胞仪检测结果表明Fab抗体和131I-Fab抗体均能与Raji细胞膜抗原结合,结合率＞87%.显像结果显示131I-Fab抗体在注入荷瘤裸鼠体内8 h即可使肿瘤清晰显影,24 h基本被清除.131I-CD20单抗注入后24 h肿瘤可见放射性浓聚.荷瘤裸鼠体内分布结果表明在2,4和8 h 131I-Fab抗体组肿瘤每克组织百分注射剂量率(%ID/g)分别为(1.37±0.28),(1.84±0.13)和(2.21±0.15)%ID/g,均高于对照组[分别为(0.33±0.06),(0.62±0.08)和(1.46±0.24)%ID/g;F=52.22,278.42和29.00,P均＜0.05],24 h则明显低于对照组[分别为(0.44±0.07)和(3.56±0.66)%ID/g;F=89.7,P＜0.05].2,4,8,24 h 131I-Fab抗体组肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值分别为(0.22±0.03)～(5.44±0.31),(0.43±0.11)～(21.01±3.97),(1.09±0.07)～(20.28±2.77),(1.12±0.02)～(10.29±1.78);而对照组T/NT比值分别为(0.04±0.01)～(3.10±0.29),(0.11±0.05)～(7.99±1.81),(0.48±0.06)～(23.55±1.69),(2.32±0.34)～(33.23±6.83).结论 131I-Fab抗体具有相对分子质量小、活体定位准确高效、显像早和清除快速等优点, 对临床放射免疫显像诊断B细胞淋巴瘤具有潜在的应用价值.     

hNIS基因转染介导Hela细胞移植瘤放射性核素显像和治疗的实验研究

目的 利用131I对转染hNIS基因的宫颈癌Hela-NIS（＋）细胞移植瘤进行显像及治疗实验研究,评价hNIS基因转染介导131I治疗宫颈癌的可行性.方法 （1）利用Hela-NIS（＋）细胞和未转染hNIS的Hela细胞分别建立荷宫颈癌裸鼠模型,进行131I及99TcmO4-显像,观察移植瘤的显影情况,并计算移植瘤部位与对侧相同部位的T/B比值.（2）通过腹腔注射法观察比较74,111和148 MBq131I对荷Hela-NIS（＋）宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用,另设不行任何治疗的对照组.用SPSS 13.0软件,样本均数间差异行t检验.结果 （1）成功构建荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤与荷Hela裸鼠移植瘤模型.131I显像示荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤部位明显放射性浓聚,注射后8 h T/B比值最高达17.34,而未转染hNIS基因的荷Hela裸鼠移植瘤部位始终未见明显的放射性浓聚.99TcmO4-显像示荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤部位在注射后25 h内持续放射性浓聚.（2）经不同剂量的131I治疗后2～3周起,各治疗组荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤生长开始受到抑制,移植瘤体积有不同程度缩小.111MBq组和148 MBq组的移植瘤抑制率差异无统计学意义（t=0.13～2.17,P＞0.05）,但二者均明显高于74 MBq组的移植瘤抑制率（t=2.74～5.75,P＜0.05）.对照组荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤持续生长.结论 荷Hela-NIS（＋）宫颈癌裸鼠移植瘤可明显聚集131I及99TcmO4-,且在较长时间内持续清晰显影;131I体内治疗效果显著.     

慢病毒介导的HER2-siRNA对人卵巢癌移植瘤的抑制及其显像监测

目的 研究慢病毒介导的干扰RNA沉默人表皮生长因子受体2(HER2)对卵巢癌SKOV-3细胞移植瘤生长的影响,并探讨放射免疫显像在RNA干扰肿瘤生物治疗中的应用价值.方法 利用HER2-短发夹状(sh) RNA慢病毒表达载体和随机序列慢病毒载体感染SKOV-3细胞株,建立稳定表达HER2-小干扰(si) RNA的SKOV-3细胞株及阴性对照(NC)细胞株.分别将细胞株接种于裸鼠,建立荷人卵巢癌裸鼠模型实验(KD1)组和NC组,并以未感染的SKOV-3细胞株裸鼠模型作为空白对照(CON)组,检测各组裸鼠(每组5只)的成瘤率、成瘤时间、瘤体大小、HER2蛋白表达.通过131Ⅰ-曲妥珠单克隆抗体(Herceptin)进行荷瘤小鼠放射免疫显像,观察肿瘤显影情况,比较各实验组T/B比值.采用SPSS 17.0对实验结果进行单因素方差分析和最小显著差异t检验.结果 裸鼠成瘤率为100％(15/15).CON组、NC组和KD1组的平均成瘤时间分别为(4.583±0.520)、(4.567±0.284)和(6.023±0.316) d(F=13.946,P＜0.01),KD1组移植瘤较另2组平均成瘤时间延长(t=4.557、4.608,均P＜0.01).至种植后28 d各组间移植瘤体积差异有统计学意义(F=26.343,P＜0.01);CON组、NC组和KD1组离体瘤质量分别为(0.614±0.135)、(0.558±0.190)和(0.120±0.489) g(F=225.026,P＜0.01);KD1组平均瘤体积(t=7.125、4.759)、瘤体质量(t=19.158、16.977)较另2组明显减小(均P＜0.01).免疫组织化学结果显示KD1组HER2蛋白表达明显减少(弱阳性).核素显像示各组荷瘤小鼠移植瘤均有不同程度显影,KD1组1、4、8、12、24、48、72和96 h T/B比值(0.208 ～4.427)均低于NC组(0.576～5.508)和CON组(0.640～5.695;F=9.197～ 39.375,均P＜0.05).结论 慢病毒介导的HER2-siRNA可以显著抑制人卵巢癌移植瘤的生长;131Ⅰ-Herceptin放射免疫显像能在一定程度上反映HER2蛋白的表达情况,有望用于针对HER2靶点的RNA干扰肿瘤生物治疗的疗效评估.     

^99Tc^m标记亲肿瘤三肽的实验研究

目的 进行99Tcm-精氨酸-谷氨酸-丝氨酸（RES）的亲肿瘤实验研究.方法 采用标准Fmoc固相合成法合成RES,在不同的试剂和温度（100 ℃或室温）条件下,以氯化亚锡为还原剂进行RES的99Tcm标记,优化标记条件.进行荷A549肺癌裸鼠99Tcm-RES显像并测定%ID/g,研究99TcmRES在荷瘤裸鼠体内的分布.比较兔炎性反应和肿瘤模型显像结果.结果 （1）酒石酸钠及氢氧化钠为缓冲剂,氯化亚锡为还原剂,100 ℃水浴10 min,RES放化纯最高达到85%;99Tcm-RES性能稳定,室温下放置6 h,放化纯仍达75%.（2）注射后0.5 h,99Tcm-RES多分布于心、肝、肾等血供丰富脏器,2 h血液的放射性（0.36%ID/g）降幅明显,仅相当于0.5 h（2.35%ID/g）的1/7;心、肝、肺的放射性降幅稍慢,但明显快于肿瘤;注射后0.5 h肿瘤放射性摄取为2.32%ID/g,6 h为1.54%ID/g,6 h后仍有超过60%的放射性滞留.99Tcm-RES注射后6 h肿瘤/血、肿瘤/心、肿瘤/肝、肿瘤/肺、肿瘤/脾和肿瘤/骨骼肌放射性比值分别为5.31,1.88,1.57,3.58,4.16和5.92.（3）荷瘤鼠显像发现肿瘤部位明显浓聚99Tcm-RES,而201Tl、99Tcm-MIBI在肿瘤部位未见明显浓聚.（4）兔炎性反应和肿瘤模型显像示肿瘤部位放射性明显浓聚,而炎性反应部位放射性无明显浓聚,注药后6 h肿瘤/炎性反应部位放射性比值为3.12.结论 用放射性组合化学文库筛选出的小分子RES是一种与肿瘤高亲和力的多肽,有望成为一种肿瘤显像剂.     

荷瘤裸鼠整合素αv β3受体显像的实验研究

目的探讨99Tcm标记精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）小分子多肽（GY11）作为肿瘤显像剂的可能性.方法利用SnCl2直接还原法进行GY11的^99Tcm标记.建立荷人黑色素瘤A375、肺癌H460和宫颈癌HeLa BALB/c裸鼠肿瘤模型,分别进行体内分布和肿瘤显像研究.结果GY11的^99Tcm标记率为80%.黑色素瘤A375荷瘤裸鼠体内分布显示,^99Tcm-GY11主要经肾脏快速从血液中清除,注射后2 h肿瘤摄取量为3.13%ID/g,肿瘤/血和肿瘤/骨骼肌比值随时间的推移而增加,注射后1和6 h比值分别为3.0、4.3和8.1、15.1.对于黑色素瘤A375和肺癌H460荷瘤裸鼠,^99Tcm-GY11静脉注射后2 h肿瘤均能清楚显示,24 h后显像更清晰;2 h后宫颈癌HeLa肿瘤能显影,但6 h后肿瘤放射性基本清除.结论^99Tcm-GY11有望成为肿瘤αvβ3受体显像剂.     

131I-K237的制备及对荷人肺癌裸鼠靶向治疗实验

目的 探讨131I标记多肽K237的方法,观察131I-K237对荷人肺癌A549裸鼠肿瘤靶向治疗的疗效.方法 采用Iodogen法进行131I标记多肽K237,人奇静脉内皮细胞（HUVEC）增殖抑制实验和竞争抑制实验检测131I-K237的生物活性.建立荷人肺癌A549裸鼠模型25只,利用随机数字表法分成5组：对照组（注射生理盐水）、131I组（11.1 MBq）、K237组（40μg）、131I-K237静脉组（含K23740μg,11.1 MBq）和131I-K237瘤内注射组（含K237 40μg,11.1 MBq）.各实验鼠均于注药后15 d再次给药,剂量与前次相同.定期测量肿瘤体积.两样本均数比较用成组设计t检验,多组均数比较用单因素方差分析.结果 131I-K237的标记率为（60.16±1.21）%,经分离纯化后其放化纯为（96.87±0.82）%.HUVEC增殖抑制实验显示131I-K237与未标记K237的抑制率差异无统计学意义[（73.69±5.36）%和（62.68 ±3.83）%,t=1.67,P＞0.05].131I-K237静脉注入荷瘤裸鼠后肿瘤/对侧相应部位肌肉组织的放射性（T/N）比值随时间延长而逐渐升高,12 h达到最高,为4.31.治疗结束时,131I-K237静脉和瘤体内注射组、K237组及131I组的抑瘤率分别为75.01%、78.99%、31.15%、12.61%.131I-K237静脉和瘤体内注射组肿瘤平均体积较小,与对照组、K237组和131I组比较,差异均有统计学意义（F=15.233和13.611,P均＜0.01）.结论 131I-K237易于制备,具有较理想的动物体内动力学行为和对肿瘤的高亲和性,对荷人肺癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,是一种具有潜在价值的新型靶向性肿瘤血管生成显像和治疗药物.     

双功能制剂^99Tc^m-Gd-DTPA-DG的制备及在荷瘤裸鼠体内的生物分布

目的 通过99Tcm一步法对DTPA-DG钆盐（Gd-DTPA-DG）进行标记,并观察标记物的稳定性及在荷瘤裸鼠体内的生物分布.方法 首先合成DTPA-DG,再与Gd2O3螯合,制得Gd-DTPADG.采用1.5T超导型MR扫描仪观察Gd-DTPA-DG在荷瘤裸鼠体内的肿瘤靶向效果,用正交实验设计对Gd-DTPA-DG进行99Tcm标记,采用薄层色谱法分析标记率;用SPECT仪观察标记药物在裸鼠体内的分布.裸鼠体内注入标记药物后10,30 min和1,2,4,24 h测定血液、心、脑、肝、脾、肺、肾、小肠、肌肉、肿瘤中的%ID/g.结果 Gd-DTPA-DG在荷瘤裸鼠体内显示出良好的肿瘤靶向效果.99TcmGd-DTPA-DG的放化纯约98.5%;体外放置6 h,放化纯为96.2%.2 h时肿瘤组织显像清晰,肿瘤组织对99Tcm-Gd-DTPA-DG的摄取为（1.48±0.12）%ID/g,肿瘤与肌肉的放射性比值达2.91.结论 MRI示合成的Gd-DTPA-DG可使肿瘤强化;用99Tcm标记Gd-DTPA-DG是可行的,标记物在裸鼠体内显示出良好的肿瘤靶向性,是一种极具发展潜力的SPECT-MRI双功能制剂.     

^131I-Herceptin在荷人乳腺癌裸鼠模型中的生物分布及抗肿瘤活性研究

目的探讨^131I-Herceptin在荷人乳腺癌裸鼠模型中的生物分布及其对人表皮生长因子2（HER2）高表达乳腺癌的放射免疫治疗疗效。方法^131I-Herceptin采用Iodogen法制备。15只HER2高表达乳腺癌裸鼠模型分为3组：^131I-Herceptin组、Herceptin组与空白对照组,每组5只。以肌肉为参照,注射后第3,6,9天显像观察肿瘤等组织的放射性摄取并计算肿瘤／肌肉（T／M）比值。注射后1～9d,测量肿瘤大小并计算肿瘤抑制率。第9天处死裸鼠,剥离肿瘤,计算肿瘤的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）值并以Western—Blot法、反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测肿瘤组织HER2及癌胚抗原（CEA）蛋白及基因表达水平的变化。肿瘤T／M比值与其他脏器的差别、HER2及CEA基因表达水平、蛋白表达水平在各治疗组间的差异采用One—way ANOVA检验;^131I-Herceptin组和Herceptin组肿瘤抑制率的差异采用t检验。结果^131I-Herceptin的放化纯为94％,比活度约为37kBq／μg,在注射后第9天,T／M比值达4．11,显著高于其他组织（F=12．370,P〈0．05）;肿瘤摄取分数为（16．1±1．7）％ID／g,高于其他组织、器官（F=166．150,P〈0．01）。至治疗后9d,^131I-Herceptin组抑瘤率显著高于Herceptin组[（42．0±6．9）％与（23．2±3．8）％,t=5．321,P〈0．001]。^131I-Herceptin组HER2蛋白表达（0．435±0．087与0．557±0．043,t=2．811,P〈0．05）与基因表达（0．256±0．073与0．350±0．029,t=2．678,P〈0．05）均显著低于Herceptin组。^131I-Herceptin组CEA蛋白表达（0．537±0．048与0．607±0．029,t=2．800,P〈0．05）与基因表达（0．362±0．048与0．607±0．079,t=5．932,P〈0．001）均显著低于Herceptin组。结论^131I-Herceptin对HER2高表达的乳腺癌具有很高的靶向特性,能比Herceptin更有效地抑制乳腺癌细胞分裂、增殖、分化、存活,控制肿瘤生长。     

131I标记抗NRP-1单克隆抗体A6在荷瘤裸鼠体内分布和显像研究

目的制备131I标记的抗神经纤毛蛋白-1（NRP-1）单克隆抗体A6（131I-A6）,探讨其作为NRP-1靶向显像新型分子探针的可行性。方法（1）采用Iodogen法对A6进行131I标记,检测其标记率、放化纯和体外稳定性。（2）以人胶质瘤细胞株U87MG为实验细胞进行体外实验,测定131I—A6生物学活性、结合率及其与受体的亲和力。（3）将荷U87MG胶质瘤模型裸鼠采用随机抽样法分为5组,每组5只,分别于注射1．2MBq 131I-A6后24、48、72、96和120h处死,计算各脏器放射性摄取（％ID／g）、肿瘤／血液（T／B）和肿瘤／肌肉（T／M）比值。（4）取6只荷瘤裸鼠,以随机抽样法分为未阻断组和竞争阻断组,前组注射3．7MBq 131I-A6;后组注射3．7MBq 131I-A6和未标记的700仙gA6,均分别于注射后24、48、72、96和120h行SPECT／CT显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计学分析。结果（1）131I—A6标记率为（95．46±3．34）％,放化纯〉95％;131I—A6在室温下PBS溶液中放置至96h,其放化纯仍〉85％。（2） 131I-A6与U87MG胶质瘤细胞特异性结合率1h达到最高值,为（15．80±1．30）％,在加入未标记的抗体A6时,U87MG细胞对131I-A6明显受抑制（t=2．862,P〈0．05）;与细胞表面抗原的亲和力（kd）为（1．67±0．14）nmol／L。（3）24h时131I—A6在荷瘤裸鼠血液放射性最高,为（8．00±1．42）％ID／g;其次是肝脏和肿瘤组织,分别为（7．68±1．56）和（6．00±1．24）％ID／g;脑、骨、肌肉组织放射性计数较低。给药后24h,T／B和T／M分别为0．78±0．10和3．20±0．30,随时间延长比值逐渐增高,在120h达到最高,分别为1．87±0．50和7．13±0．24。（4）体内显像示,注射 131I-A6后24h肿瘤略显影,随时间延长变清晰,120h显影为最清晰,阻断后未见肿瘤显影。结论 131I-A6的标记方法简单易行,标记率高,产物稳定性好,?     

131I标记17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的制备及生物分布

目的 建立131I标记17-丙烯胺基-17.去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)的方法,并观察其在动物体内的生物分布.方法 采用过氧化氢法对17-AAG进行131I标记.测定131I.17.AAG注射后0.5,1,4,8和24 h在ICR健康小鼠体内的生物分布,通过显像动态观察131I-17-AAG在兔Vχ2肝癌模型中的分布.结果 建立了131I过氧化氢法标记17-AAG的最佳条件,131I-17-AAG标记率达85.65%,纯化后其乙酸乙酯相、生理盐水水溶液和4℃下放置5 d的生理盐水水溶液的放化纯分别为(96.51±0.80)%,(95.57±0.09)%和(90.96±1.29)%.尾静脉注射131I-17-AAG,健康ICR小鼠胆囊的摄取(每克组织百分注射剂量率,%ID/g)在0.5 h达到峰值(3.0963±1.3394)%ID/g,胃和小肠的摄取均在4 h达到高峰,24 h时肠道放射性明显减少,肝、肾摄取较少.瘤体给药后于2 h和4,6,14 d进行显像,可见131I-17-AAG在兔肿瘤中持续浓聚,肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值分别为10.36,3.62,4.32和3.50,其他脏器未见显影.结论 成功建立了131I-17-AAG标记方法,标记物保留了17-AAG生物学活性,体外稳定性好.兔肝肿瘤间质给药提示131I-17-AAG对肿瘤具有理想靶向性作用.     

^99Tc^m标记RGD环肽在荷肺腺癌裸鼠中的显像研究

目的制备^99Tc^m标记的含RGD序列的^99Tc^m-联肼尼克酰胺（HYNIC）-c（RGDfK）环肽单体,评价其在整合素表达阳性的肺腺癌严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠肿瘤模型中的生物学分布,并进行显像研究。方法（1）以HYNIC为双功能螯合剂,以三羟甲基甘氨酸（tricine）和乙二胺二乙酸为协同配体,采用二步法制备^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）,进行细胞结合实验,测定标记物生物学活性;（2）将荷A549肺腺癌模型小鼠分为7组[第7组作为竞争性抑制组,注射显像剂前0．5h先注射HYNIC-c（CRDGfk）100μg],每组5只,经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC-c（RGDfK）,于注射后0．5,1,2,4,8,12h处死,计算荷A549肺腺癌小鼠模型各脏器％ID／g,同时采用ROI技术研究^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在小鼠体内的生物学分布,计算不同时间点的T／NT比值（NT选取肌肉）;（3）取6只荷瘤裸鼠,其中3只为竞争性抑制组,经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）,于注射后0．5,1,2,4,8,12h进行静态1显像。结果^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）的标记率〉90％,放化纯〉95％。^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）与A549肺腺癌细胞特异性结合率最高为36．14％,体内分布实验显示^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在肾的摄取率始终高于20％ID／g,注射后0．5h肿瘤％ID／g为10．52±1．48,8h为17．26±2．81,12h为8．93±0．90,竞争性抑制组注射后0．5h为2．29±0．85。通过ROI技术测得T／NT在8h达6．87。注射后1h肿瘤可显影,4～8h显影更清晰。结论^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）易于制备,具有良好的靶向性。     

99Tcm—survivinmRNA反义肽核酸制备及荷瘤裸鼠基因显像研究

目的制备99Tcm标记的survivinmRNA反义肽核酸（PNA）探针,并进行荷瘤裸鼠体内基因显像,研究其对肿瘤早期诊断的价值。方法化学合成survivinmRNA的反义、无义PNA,在5’端连上4个氨基酸[Gly一（D）Ala—Gly—Gly],形成1个类似N。结构的强螯合基团;为消除空间阻碍,引入1个1一氨基丁酸（Aba）作为隔离物,利用配体交换法进行99Tcm标记。用HPLC及ITLC对标记物的标记率、放化纯进行鉴定。并对反义、无义组各5只人肺癌A549荷瘤裸鼠行99Tcm一survivinmRNA反义、无义PNA体内显像。注药后1,2和4h分别显像,利用ROI测得肿瘤与对侧组织的rr／NT比值。结果分析采用SPSS13．0软件进行成组t检验。结果99Tcm一survivinmRNA反义PNA即刻标记率为（95．48±1．92）％,放化纯〉95％,且标记物体外稳定性好,与血清保温24h后标记率仍〉85％。无义PNA标记率与之基本一致。99Tcm一survivinmRNA反义PNA在肿瘤组织内特异性浓聚,随时间延长,浓聚程度逐渐增加,1,2和4hT／NT值分别为2．70±0．28,3．44±0．35和4．21±0．63。无义PNA在肿瘤组织中稍有浓聚,但在4h内变化不大,4h时T／NT值（3．12±0．50）与反义组差异有统计学意义（t=2．918,P：0．019）。结论99TcmsurvivinmRNA反义PNA即刻标记率高,稳定性好,无需纯化即可用于显像,在肿瘤组织中特异性浓聚,对肿瘤的早期诊断有潜在价值。     

抗癌胚抗原单链抗体在荷人结直肠癌裸鼠体内的分布和放免显像

目的研究１２５Ｉ、１３１Ｉ标记抗癌胚抗原单链抗体（ＣＥＡＳｃＦｖ）在荷人结直肠癌裸鼠体内的分布和定位显像。方法采用Ｉｏｄｏｇｅｎ法制备１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ和１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ。２０只荷人结直肠癌裸鼠,腹腔注射１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ后１、３、６和２４ｈ进行裸鼠的体内分布研究,对３只荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ后１、３、６和２４ｈ进行裸鼠的定位显像研究。结果在荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ后３ｈ,肿瘤与血之比为１２８,６ｈ达５５０,２４ｈ达到最高,为６４６。腹腔注射１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ后,６ｈ肿瘤部位放射性明显浓聚,２４ｈ本底明显降低,肿瘤呈放射性热区。结论ＣＥＡＳｃＦｖ能提高靶／非靶组织比值,缩短显像时间,改善图像质量。     

131I-抗ProGRP（31-98）单克隆抗体E-B5放射免疫显像及放射免疫治疗实验研究

目的了解131I标记的胃泌素释放肽前体（ProGRP）单克隆抗体E-B5在荷小细胞肺癌裸鼠的体内分布及放射免疫显像情况,观察131I—E—B5对荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法（1）分别建立荷小细胞肺癌、荷肺腺癌及荷大肠癌裸鼠模型。（2）自荷小细胞肺癌裸鼠尾静脉注射131I—E-B5后1,12,24,48,72和96h处死裸鼠并取各主要脏器组织,计算各时间点的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）和肿瘤／非肿瘤放射性（T／NT）比值。（3）分别对荷小细胞肺癌、荷肺腺癌和荷大肠癌裸鼠模型进行131I—E—B5放射免疫显像,观察移植瘤的显影情况,并计算移植瘤体／对侧相同部位的放射性（T／B）比值。（4）以未经任何治疗处理组为对照,采用瘤内注射法观察比较3．7,7．4,14．8和22．2MBq131I-E—B5和Na131I对荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用。采用SPSS13．0软件处理数据,行两样本均数t检验。结果（1）体内分布研究示：注射后72h,荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤体的放射性摄取达到最高值,为（14．1±2．9）％ID／g,高于其他脏器及组织（t=4．11～8．58,P均〈0．05）,瘤体与各脏器组织的T／NT比值随时间延长而逐渐升高,72h时瘤体与肌肉组织的T／NT比值高达4．67±0．66。（2）放射免疫显像发现：注射131I—E—B5后24h荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤部位放射性明显聚集,随时间延长放射性浓聚程度逐渐增强,72至96h时最为清晰。荷肺腺癌裸鼠移植瘤局部无明显的放射性浓聚。荷大肠癌裸鼠移植瘤模型显像结果与荷小细胞肺癌裸鼠模型显像结果类似,但其T／B比值低于荷小细胞肺癌裸鼠模型（t=4．29,P〈0．01）。注射后72h,荷小细胞肺癌、荷大肠癌及荷肺腺癌裸鼠的T／B比值分别为5．27±0．97,2．28±0．72和1．26±0．65。（3）131I—E-B5对荷小细胞肺癌移植瘤的生长抑制作用明显大于Na131I（t=2．88～17．77,P均〈0．05）。结论131I—E—B5对小细胞肺癌有较好的靶向作用,可以抑制小细胞肺癌移植的生长并破坏肿瘤组织,有望成为一种较为理想的小细胞肺癌放射免疫显像及放射免疫治疗药物,值得进一步深入研究。     

^131I-酪氨酸-奥曲肽对荷人非小细胞肺癌小鼠的抑瘤效果

目的探讨^131I标记酪氨酸一奥曲肽（^131I-Tyr-octreotide）对荷人非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠的抑瘤效果。方法经氯胺T法标记Tyr-octreotide,测其放化纯及其在小鼠体内的生物分布;建立荷人NSCLC小鼠模型,分为尾静脉注射^131I-Tyr-octreotide组、肿瘤间质注射^131I-Tyr-octreotide组、肿瘤间质单纯注射^131I组和间质注射生理盐水组,观察肿瘤部位的放射性摄取,勾画感兴趣区（ROI）,计算肿瘤与对侧正常组织（T／NT）放射性比值,并对肿瘤进行细胞周期检测和免疫组织化学检测,观察癌细胞的凋亡。采用SPSS 11.0软件进行统计学处理,组间两两比较行单因素方差分析。结果标记产物放化纯为（95．23±1．67）％,比活度为3．5×10^6 Bq／μg。小鼠体内放射性分布示肾摄取最高,肝、脾摄取较少;荷瘤鼠显像示：间质注射^131I-Tyr-octreotide组肿瘤放射性浓聚较尾静脉注射和间质单纯注射^131I明显,放射性滞留较久;其24h的T／NT比值最高,为52．74±0．13,明显高于其他2组（8．90±0．23,6．42±0．02,q=628．81和664．33,P均〈0．05）;流式细胞检测可见经间质给药组较尾静脉给药组和单纯注射^131I组G．期细胞阻滞明显[各组G1期肿瘤细胞占总细胞的百分比分别为（83．17±6．86）％、（57．02±18．81）％、（49．29±7．80）％,q=1．56～6．86,P均〈0．05],免疫组织化学检查结果示肿瘤细胞大量凋亡,可见凋亡小体形成。结论^131I-Tyr-octreotide易于标记且与生长抑素受体（SSTR）表达阳性的NSCLC有较高的亲和力,对肿瘤组织有较强的促凋亡和抑瘤作用。     

99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（tricine）的制备及对胰腺癌荷瘤鼠显像研究

目的制备99Tcm-（联肼尼克酰胺-蛙皮素类似肽）（N-三羟甲基甘氨酸）（三苯基膦三间磺酸钠盐）[（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）]三重配位化合物,评价其在正常小鼠及胰腺癌荷瘤裸小鼠的生物分布。方法双功能螯合剂HYNIC与[Lys3]-BBS偶联（pH值9．0）,以SnCl2为还原剂,tricine和TPPTS为协同配体,进行99Tcm-标记,合成三重配位化合物99Tcm-（HYNIC-[Lys。]-BBS）（tricine）（TPPTS）。用Sep-PakC18cartridge和HPLC对其纯化和分析,测定其标记率和放化纯,研究其在人血清中的稳定性,并进行正常小鼠体内的生物分布研究以及胰腺癌荷瘤裸小鼠活体显像。结果99Tcm-（HYNIC_[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）标记率为（90±2）％,放化纯〉95％,在人血清中放置4h其放化纯仍大于85％。正常小鼠体内分布结果表明,99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）血液清除迅速,2h血液中放射性为（0．07±0．01）％ID／g,主要经。肾排泄,肝、胃肠道摄取较少,2h时肝放射性为（0．27±0．03）％ID／g,胃为（0．06±0．03）％ID／g,肠为（0．04±0．00）％ID／g。胰腺癌荷瘤裸小鼠吖显像可见肿瘤部位有放射性浓聚影,2h后肿瘤与对侧正常肌肉的T／NT比值最高达3．71±0．57。结论99Tcm-（HYNIC-[Lys3]-BBS）（tricine）（TPPTS）三重配位化合物制备成功,所用标记方法可行,标记物稳定性较好,标记率和放化纯较高,生物分布特性良好,有望用于胰腺癌的显像研究。