~(125)I-聚乙二醇化胸腺素α1的制备与纯化

目的制备高纯度放射性125I标记的酪氨酸聚乙二醇化胸腺素α1(Tyr-PEG-TA1)用于动物药代动力学研究。方法改良Iodogen法进行125I标记。Ziptip头监测标记反应进程以优化反应条件。采用Sephadex G50与Sephadex G10两步凝胶层析法对标记混合物进行纯化。利用酶免疫分析(EIA)方法鉴定PEG-TA1增加酪氨酸残基前后以及Tyr-PEG-TA1经125I标记前后免疫学活性的变化。结果PEG-TA1增加酪氨酸残基前后以及Tyr-PEG-TA1经125I标记前后免疫活性均无明显变化,纯化后的标记产物放化纯度为95.9%,放射性比活度为39.4Bq/ng。结论成功地制备了放化纯度和放射性比活度均满足药代动力学研究的125I-Tyr-PEG-TA1。     

125I-聚乙二醇化胸腺素α1的制备与纯化

目的制备高纯度放射性^125I标记的酪氨酸聚乙二醇化胸腺素α1（Tyr-PEG-TA1）用于动物药代动力学研究。方法改良Iodogen法进行^125I标记。Ziptip头监测标记反应进程以优化反应条件。采用Sephadex G50与Sephadex G10两步凝胶层析法对标记混合物进行纯化。利用酶免疫分析（EIA）方法鉴定PEG-TAl增加酪氨酸残基前后以及Tyr-PEG-TA1经^125I标记前后免疫学活性的变化。结果PEG-TA1增加酪氨酸残基前后以及Tyr-PEG-TA1经^125I标记前后免疫活性均无明显变化，纯化后的标记产物放化纯度为95．9％，放射性比活度为39．4Bq／ng。结论成功地制备了放化纯度和放射性比活度均满足药代动力学研究的^125I-Tyr-PEG-TA1。     

药代动力学研究用蛋白质多肽药物的放射性标记、分离纯化和鉴定

药代动力学研究用蛋白质多肽药物的放射性标记、分离纯化和鉴定柴彪新刘秀文汤仲明为保证药代动力学研究的可靠性，要求标记蛋白质多肽的放化纯度＞９５％，保持标记多肽的生物活性和高比活度。为此，笔者重点研究了标记蛋白质多肽分离纯化方法，标记混合物中杂质的来源、...     

O-(2-~(18)F-氟代乙基)-L-酪氨酸的合成及初步动物实验

目的　研制18F标记的氨基酸类肿瘤显像剂o (2 18F 氟代乙基 ) L 酪氨酸 (18F FET)。方法　亲核氟代法制备 2 18F 氟代乙醇对甲苯磺酸酯 ,再与酪氨酸二钠反应得18F FET。进行了小鼠体内分布实验和小鼠肿瘤显像。结果　18F FET放化收率 4 4% ,放化纯度 >99%。注射后 6 0min小鼠肿瘤显像清晰。结论　18F FET标记简便 ,小鼠肿瘤显像清晰。     

O—（2—^18F—氟代乙基）—L—酪氨酸的合成及初步动物实验

目的 研制了^18F标记的氨基酸类肿瘤显像剂O-(2-^18F-氟代乙基）－L－酪氨酸（^18F-FET)。方法 亲核氟代法制备2－^18F-氟代乙醇对甲苯磺酸酯，再与酪氨酸二钠反应得^18F-FET。进行了小鼠体内分布实验和小鼠肿瘤显像。结果 ^18-FET放化收率4．4％，放化纯度＞99％。注射后60min小鼠肿瘤显像清晰，结论 ^18F-FET标记简便，小中瘤显像清晰。     

脂质体包99 Tcm标记Survivin反义寡核苷酸的制备和体外研究

目的研究脂质体包裹99Tcm标记Survivin反义寡核苷酸(ASON)的制备方法及其在肝癌细胞中的表达.方法合成20碱基单链Survivin ASON,全程硫代修饰,5'末端经氨基修饰,以双功能联结剂联肼尼克酰胺(HYNIC)为螯合剂,ASON与HYNIC偶联后用99Tcm标记,经P4柱纯化后,用阳离子脂质体(lipofectamine2000)对纯化产物进行包裹,并对其标记率、放化纯、比活度、稳定性、细胞摄取率进行研究.结果99TcmO-4比活度为18.5、14.8和7.4 MBq/μg时,标记率分别为(63.10±1.15)%、(62.40±1.05)%和(58.90±3.01)%.脂质体包裹的99Tcm-HYNIC-ASON放化纯为(99.47±3.32)%,以生理盐水、新鲜人血清孵育4 h后放化纯分别为92.51%和92.70%.转染后6 h,经脂质体包裹99Tcm-HYNIC-ASON的肝癌细胞摄取率达(66.21±0.46)%,明显高于未经脂质体包裹的ASON[(25.17±1.08)%,t=23.979～98.858,P＜0.01)].结论以HYNIC作为螯合剂标记ASON方法可行,脂质体能明显增加细胞摄取ASON.     

恶性肿瘤标记物─—~（131）碘－血卟啉衍生物的制备

利用１３１碘标记的血卟啉衍生物（ＨｐＤ）提高恶性肿瘤诊断的灵敏度，以明确肿瘤部位、大小及转移范围。本文介绍了１３１Ｉ─ＨｐＤ的制备方法，并对反应条件进行了讨论。标记品的比活度为６．７ＭＢｑ／ｍｇ，放化纯度＞９２％。可供动物药理等基础研究之用。     

131I标记抗胃泌素释放前体单链抗体的制备及其稳定性和免疫活性研究

目的 研究抗胃泌素释放前体(ProGRP(31-98))单链抗体(scFv)的131I标记方法,并对其标记后的稳定性和免疫活性进行分析.方法 采用氯胺-T法碘化标记制备131I-anti-ProGRP(31-98)scFv,凝胶柱层析法分离纯化标记产物,利用纸层析法测定标记物的标记率、放化纯和稳定性,通过细胞结合试验测定131I-anti-ProGRP(31-98)scFv的免疫活性.结果 131I-anti-ProGRP(31-98)标记率为93.35%.标记产物纯化后即刻放化纯为98.49%,在37℃水浴箱中放置24 h后放化纯为94.59%,48h后测定仍大于90%,与正常人血清充分混合24 h后放化纯为85.16%,48 h测定大于80%.131I-anti-ProGRP(31-98) scFv对人小细胞肺癌NCI-H446和肺腺癌A549细胞株的免疫结合率分别为85.36%和21.02%.结论 131I-anti-ProGRP(31-98)scFv的标记率高,且有良好的稳定性和免疫活性,有望成为高表达ProGRP的恶性肿瘤放射免疫显像及治疗药物,值得进一步深入研究.     

99mTc-标记c-myc mRNA反义寡核苷酸探针

目的建立９９ｍＴｃ标记反义寡核苷酸（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，简称ｏｌｉｇｏ）的方法。方法将联肼尼克酰胺衍生物偶联到人工合成的１５ｍｅｒｃｍｙｃｍＲＮＡ反义ｏｌｉｇｏ末端连接的氨基上，以三羟甲基甘氨酸做协同配体进行９９ｍＴｃ标记，用ＳｅｐＰａｋ反相柱纯化９９ｍＴｃｏｌｉｇｏ，并评价其特性。结果标记率为６０％～８０％，纯化后９９ｍＴｃｏｌｉｇｏ的放化纯度在室温４小时内保持＞９５％，比活度在５～４２ＭＢｑ／μｇ范围。对照组标记到ｏｌｉｇｏ上的放射性＜５％。９９ｍＴｃｏｌｉｇｏ在新鲜人血清中稳定，不被核酸酶降解，也不与血清中蛋白质结合，打点杂交证实９９ｍＴｃ标记的反义探针探测其靶序列（正义链）ＤＮＡ的最大可探测灵敏度为３０ｎｍｏｌ／Ｌ。结论制备的９９ｍＴｃ标记反义ｏｌｉｇｏ探针具有良好的稳定性和杂交反应特性     

基于小分子肽的放射性药物

由于肽分子小,标记物显示了良好的药代动力学性质,如迅速的靶器官摄取、快速的血液清除,为药物进入体内能早期获得显像提供了可能.目前面临的挑战是既要获得高比放的放射性标记的生物活性物质而又不能损伤肽的生物活性.分子生物工程技术已能合成各种生物活性的小分子肽,在它们的分子结构中可引入螯合基团而又不影响它们与受体结合的特性,因而获得高比活度的产品.本文扼要综述了目前基于小分子肽的受体靶向的放射性药物的研究与临床应用情况,主要包括标记的小分子肽的基本特性,及其在血栓、炎症/感染、肿瘤的诊断和治疗方面的应用.     

人尿源性激肽释放酶在家兔和大鼠中的药代动力学

目的　研究兔和大鼠静脉注射125I-激肽释放酶后的药代动力学。方法　125I标记结合分子排阻高效液相(SHPLC)。结果　125I-激肽释放酶保持酶解生色底物S-2266的生物活性,放化纯度(95.2±1.8)%。家兔静脉注射5×10-3、15×10-3和45×10-3pNAU*kg-1剂量125I-激肽释放酶后与血浆蛋白质结合,t1/2α为0.09～0.15h,t1/2β为1.28～2.18h。曲线下面积与剂量成正比,而全身清除率相近。大鼠三氯醋酸(TCA)可沉淀放射性,分布特点是泌尿排泄系统最高,血管丰富内脏组织较高,脑皮层最低。大鼠静脉注射125I-激肽释放酶后主要经尿排泄,少量经粪排泄;48h尿粪排出(96.9±3.3)%;12h胆汁排出(7.9±1.8)%。125I-激肽释放酶与兔血浆蛋白质结合的Bmax为(94.3±0.77)%,Kd为8.9×10-8mol*L-1。结论　家兔静脉注射125I-激肽释放酶后符合线性药代动力学,大鼠静脉注射125I-激肽释放酶后不能进入血脑屏障。     

~(99)Tc~m-octreotide体外受体结合法及其结合特性研究

直接标记法制备99Ｔｃｍ ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ已获得成功[1] ,但标记过程的化学处理有可能影响受体结合特性 ,因此 ,笔者进行了体外细胞膜放射受体分析研究 ,以便为临床受体显像提供实验依据。一、材料与方法1 膜受体结合方法学研究。99Ｔｃｍ ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ纯化后放化纯为 93 8% ,放射性比活度 6 49ＴＢｑ/ｍｏｌ[1] ,采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑皮质细胞膜进行体外受体结合分析 ,其制备方法参照文献 [2 ],有改进。细胞膜蛋白质质量浓度为 0 32ｇ/Ｌ。按照体外放射受体分析的一般流程 ,首先进行最大结合活性测定 ,取定量99Ｔｃｍ ｏｃ…     

18 F-胆碱类似物的制备及动物体内分布研究

目的 研究肿瘤显像剂^18F标记胆碱类似物2－^18F－氟乙基－二甲基－2－氧乙基铵盐（FECH）。方法 通过两步反应制备FECH。^18F^-与乙二醇二对甲苯磺酸酯发生亲核取代反应，生成2－^18F－氟代乙醇－2－对甲苯磺酸酯，后者与N，N－二甲基乙醇胺反应制成FECH。测定FECH放化纯度及其正常小鼠与荷瘤裸鼠体内生物分布。结果 FECH放射化学产率为25％，总放化合成时间为80min，放射化学纯度＞99％。FECH在小鼠体内血液清除快，肝、肾、膀胱和胰腺有高放射性摄取，脑、心肌、胃、肠道及骨骼放射性摄取较低。有较高的肿瘤／血液、肿瘤／脑、肿瘤／心脏、肿瘤／胃及肿瘤／肌肉放射性比值。结论 ^18F－FECH可望用于某些肿瘤的PET显像。     

^131I-酪氨酸-奥曲肽对荷人非小细胞肺癌小鼠的抑瘤效果

目的探讨^131I标记酪氨酸一奥曲肽（^131I-Tyr-octreotide）对荷人非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠的抑瘤效果。方法经氯胺T法标记Tyr-octreotide,测其放化纯及其在小鼠体内的生物分布;建立荷人NSCLC小鼠模型,分为尾静脉注射^131I-Tyr-octreotide组、肿瘤间质注射^131I-Tyr-octreotide组、肿瘤间质单纯注射^131I组和间质注射生理盐水组,观察肿瘤部位的放射性摄取,勾画感兴趣区（ROI）,计算肿瘤与对侧正常组织（T／NT）放射性比值,并对肿瘤进行细胞周期检测和免疫组织化学检测,观察癌细胞的凋亡。采用SPSS 11.0软件进行统计学处理,组间两两比较行单因素方差分析。结果标记产物放化纯为（95．23±1．67）％,比活度为3．5×10^6 Bq／μg。小鼠体内放射性分布示肾摄取最高,肝、脾摄取较少;荷瘤鼠显像示：间质注射^131I-Tyr-octreotide组肿瘤放射性浓聚较尾静脉注射和间质单纯注射^131I明显,放射性滞留较久;其24h的T／NT比值最高,为52．74±0．13,明显高于其他2组（8．90±0．23,6．42±0．02,q=628．81和664．33,P均〈0．05）;流式细胞检测可见经间质给药组较尾静脉给药组和单纯注射^131I组G．期细胞阻滞明显[各组G1期肿瘤细胞占总细胞的百分比分别为（83．17±6．86）％、（57．02±18．81）％、（49．29±7．80）％,q=1．56～6．86,P均〈0．05],免疫组织化学检查结果示肿瘤细胞大量凋亡,可见凋亡小体形成。结论^131I-Tyr-octreotide易于标记且与生长抑素受体（SSTR）表达阳性的NSCLC有较高的亲和力,对肿瘤组织有较强的促凋亡和抑瘤作用。     

用2-IT修饰单抗SZ-51制备99Tcm-IT-SZ-51血栓显像药盒

目的 研究^99Tc^m标记抗P-选择素单克隆抗体SZ-51血栓显像药盒的制备方法。方法 用2-亚氨基噻吩盐酸盐（2-IT）修饰SZ-51。用^99Tc^m-葡庚糖酸钠转换络合标记法标记IT-SZ-51,测定标记物的放化纯度及生物活性,以最佳标记条件制备体内血栓显像药盒。结果 以最佳比例修饰SZ-51,每分子抗体游离疏基数为13个,纸层析法测得标记率大于90%,酶联免疫吸附测定结果表明标记物保留了抗体的免疫活性。制成的药盒4℃条件下可保存3个月。结论 该标记方法简便快速。     

放射性碘间接标记血管活性肠肽

目的：研究能有效降低体内脱碘的血管活性肠肽（VIP）的标记方法。方法：（1）标记前体N－琥珀酰亚胺－3－（三正丁基锡）苯甲酸酯（ATE），得到中间体N－琥珀酰亚胺－3－I（^125I)代苯甲酸酯（S^125IB)；采用Iodogen方法进行放射性碘标记，并考察一系列条件对标记率的影响。通过Sep-Pak硅胶柱分离得到产物S^125IB,于4℃避光保存2d。标记率和稳定性通过薄层层析（TLC）方法测定。（2）S^125IB与VIP的联接：S^125IB与VIP直接混合得到产物3－1（^125I)代苯甲酰化血管活性肠肽（^125IBA-VIP)。以反相TLC测定其标记率。产物^125IBA-VIP经高效液相层析（HPLC，RP C18柱）分离得到。三氯乙酸（TCA）沉淀法测定^125IBA－VIP的体外稳定性。体外生物活性分析通过与细胞株SGC7901的细胞结合实验测定。结果：（1）前体标记结果。室温条件下，氧化剂用量约10μg，n（ATE）：n（Na^125I)为3－8：1，反应5min标记率＞96％。S^125IB在上述条件下较稳定，TLC结果显示无明显的放射性杂质产生。（2）S^125IB与VIP的联接。TLC测定标记率＞75％，HPLC示^125IBA－VIP的保留时间（tR)为13．3min,S^125IB为19．6min,VIP为8．32min.^125IBA-VIP的体外稳定性较好，4℃保存7d后，无明显脱碘现象。细胞结合实验结果表明，^125IBA－VIP活性与Iodogen法直接标记得到的^125I－VIP一致，无明显生物活性损失。结论：以ATE为前体对VIP进行放射性碘标记，解决了直接标记稳定性差、体内脱碘严重的问题，为蛋白质及多肽的放射性卤标提供了一个有效途径。     

131I-Tyr-octreotide的标记方法学及其生物学分布的研究

目的探讨131^Ⅰ采用氯胺-T氧化还原法标记生长抑素类似物Tyr-octreotide的可行性和标记物的稳定性，并研究其在正常小鼠体内的生物学分布和非小细胞肺癌荷瘤鼠SPEC3、显像。方法采用氯胺-T法制备131^Ⅰ-Tyr-octreotide，并测定标记物的放化纯、胶体含量及正常小鼠体内的生物学分布，不同时间点眼球取血后处死，测定血液及各主要脏器的放射性，计算％ID／g。对非小细胞肺癌荷瘤鼠模型进行131^Ⅰ-Tyr-octreotide显像研究。结果采用氯胺-T法131^Ⅰ标记Tyr-octreotide的最佳条件：磷酸缓冲液（0．2mol／L）0．15ml，Tyr-oetreotide（1g／L）10μl，Na131^Ⅰ（3．7MBq）0．1ml，氯胺-T（30g／L）4μl，迅速混匀反应2．5min，之后加入Na2S2O5（30g／L）5μl终止反应，放化纯可达97％，6h后放化纯可达83％，胶体含量为1．02％。小鼠体内分布实验表明，肾脏和肝脏对131^Ⅰ-Tyr-octreotide的摄取最高，胃肠消化器官次之，其他脏器摄取较少；对肿瘤组织具有较好的亲和力。结论131^Ⅰ-Tyr-octreotide采用氯胺-T法标记具有标记率高、方法简便和迅速、体外稳定性较好、无需进一步纯化等优点。在小鼠体内主要经肝、肾系统代谢，血液清除快，有望成为以生长抑素介导的生物靶向诊断和治疗非小细胞肺癌的分子药物。     

在线自动化制备多巴胺转运蛋白显像剂11C-β-CFT

目的建立适于在线自动化制备多巴胺转运蛋白显像剂11C-甲基-N-2β-甲基酯-3β-(4-氟-苯基)托烷(β-CFT)的方法.方法将11C-碘代甲烷转换成11C-三氟甲基磺酰甲烷(Triflate-甲烷),与前体2β-甲基酯-3β-(4-氟-苯基)去甲基托烷(nor-β-CFT)反应,在线转移到反相C-18柱上纯化,最后将11C-β-CFT洗脱于收集瓶.正常大鼠给药后不同时间处死,测定其生物分布.2例帕金森病(PID)患者分别用11C-β-CFT和多巴胺D2受体显像剂11C-雷氯必利(Raclopride)显像.结果在线自动化制备的11C-β-CFT放化纯＞98%,比活度＞2TBq/mmol,校正合成效率为(92.4±3.1)%,从11C-碘代甲烷到11C-β-CFT的合成时间为4 min.放射性在正常大鼠体内主要分布于肝、肾和脑;颅内纹状体摄取放射性最高,与小脑的比值在5、15、30min分别为2.15、4.18和3.15.2例PD患者显像结果表明,11C-β-CFT对PD的诊断比11C-Raclopride灵敏.结论在线自动化制备11C-β-CFI效率高,速度快,放化纯高.初步显像结果表明,其可满足临床需要.     

O-(2-18F-氟代乙基)-L-酪氨酸的新合成路线及其生物学评价

目的研究O-（2-^18F-氟代乙基）-L-酪氨酸（^18F-FET）新的一步直接亲核放射氟化法合成路线及其生物学评价。方法以N-叔丁氧羰基-（O-（2-对甲苯磺酰乙氧基））-L-酪氨酸甲酯[N-BOC-（O-TsE）-L-Tyr-OMe]为标记前体，采用直接亲核放射氟化法合成^18F-FET，并用体内外稳定性和药代动力学实验评价其生物学性能。结果^18F-FET的合成时间约为50min，放化产率为40％（未经衰减校正），放化纯〉97％。体内外稳定性好，在PBS中放置3个半衰期后，放化纯没有变化；注射^18F-FET后1h内小鼠血样示踪没有发现代谢产物。^18F-FET在动物体内的时间-血药浓度曲线符合二室模型，分布相较短，消除相很长，适合显像。结论用该合成路线标记前体易得，合成时间短，放化产率高，产物具有良好的体内行为。     

用2-IT修饰单抗SZ-51制备~(99)Tc~m-IT-SZ-51血栓显像药盒

目的　研究99Tcm 标记抗P 选择素单克隆抗体SZ 5 1血栓显像药盒的制备方法。方法用 2 亚氨基噻吩盐酸盐 (2 IT)修饰SZ 5 1。用99Tcm 葡庚糖酸钠转换络合标记法标记IT SZ 5 1,测定标记物的放化纯度及生物活性 ,以最佳标记条件制备体内血栓显像药盒。结果　以最佳比例修饰SZ 5 1,每分子抗体游离巯基数为 13个 ,纸层析法测得标记率大于 90 % ,酶联免疫吸附测定结果表明标记物保留了抗体的免疫活性。制成的药盒 4℃条件下可保存 3个月。结论　该标记方法简便快速