HPLC-MS/MS测定比格犬血浆中非诺贝酸浓度及其药代动力学研究

目的建立快速有效的HPLC-MS/MS方法测定比格犬血浆中非诺贝特的代谢物非诺贝酸,并探讨其在比格犬体内的药代动力学。方法 4只健康雄性比格犬随机分为两组,在禁食状态下口服给药〔非诺贝特片（纳米）和对照药Tri-cor〕,HPLC-MS/MS测定非诺贝酸浓度。流动相为甲醇-水（0.1%甲酸）,在200μl.min-1流速下梯度洗脱,地西泮为内标,色谱柱为Thermo Syncronic-C8,柱温：20℃。质谱测定利用多离子监测扫描模式,电离方式为ESI正离子模式,检测离子反应非诺贝酸为m/z 319.10→232.86,地西泮为m/z 285.04→193.04。血药浓度数据经Origin Pro 7.5与WinNonlin Phoenix软件处理,计算主要药动学参数。结果本方法中非诺贝酸在5～1000 ng.ml-1范围内线性良好（r2〉0.98）,定量下限为5 ng.ml-1。方法的精密度准确度,专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。非诺贝特纳米片和Tricor在比格犬体内的主要药动学参数：tmax为（1.50±1.16）和（1.94±2.48）h、t1/2为（8.58±3.41）和（8.02±2.08）h、Cmax为（5857.20±3563.44）和（6697.56±3912.92）ng.ml-1、AUC为（25 328.13±16 009.09）和（26 379.89±17 392.47）ng.h.ml-1。结论建立了准确、灵敏的HPLC-MS/MS检测方法用于比格犬血浆中非诺贝特代谢产物非诺贝酸的含量测定;研究了非诺贝酸在比格犬体内的药代动力学,结果显示非诺贝酸在比格犬体内的代谢动力学过程呈单室模型,该结果为不同来源非诺贝特片的生物等效性研究奠定了基础,为非诺贝特临床安全合理用药提供参考依据。     

酒石酸美托洛尔渗透泵控释片比格犬体内药动学研究简

目的以酒石酸美托洛尔普通片作为参比制剂,研究酒石酸美托洛尔渗透泵控释片比格犬体内药动学特征。方法采用自身对照交叉试验设计,比较研究比格犬单剂量口服酒石酸美托洛尔渗透泵控释片与普通片的药动学特征,采用HPLC—MS测定比格犬血浆中酒石酸美托洛尔浓度。结果酒石酸美托洛尔渗透泵控释片和普通片的Cmax分别为（1124．76±318．09）和（3822．88±567．28）ng·ml-1;Tmax分别为（8．00±1．79）和（0．88±0．14）h;MRT分别为（11．18±2．46）和（4．54±0．84）h;AUC。分别为（11773．09±3897．03）和（14876．61±3903．03）ng·h·ml-1。酒石酸美托洛尔渗透泵控释片的体外累积释放百分数与比格犬体内药物吸收百分数之间线性相关系数为0．993。结论与普通片相比,口服酒石酸美托洛尔渗透泵控释片的Cmax显著降低,Tmax和MRT显著延长,具有明显缓释效果,体内外相关性良好。     

双靶标新药YL-0919在比格犬体内的药代动力学研究

目的研究5-HT1A受体激动和5-HT重摄取抑制双靶标新药YL-0919在比格犬体内多次给药的药代动力学。方法比格犬按1.5 mg.kg-1剂量灌胃给药,第1天和第5天各给药1次,第2～4天每天给药2次。采用LC-MS/MS法测定血浆中YL-0919浓度,用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果首次和末次口服YL-0919(1.5 mg·kg-1)后,主要药代动力学参数为:Cmax分别为(287.73±106.50)和(220.07±58.90)ng·ml-1;tmax分别为(1.10±0.55)和(0.95±0.67)h;t1/2z分别为(3.28±0.85)和(3.02±1.20)h;MRT(0～24)分别为(4.16±0.59)和(3.81±1.22)h;AUC(0～24)分别为(1242.10±462.27)和(922.29±345.29)ng·h·ml-1;AUC(0～∞)分别为(1251.23±464.03)和(938.57±350.30)ng·h·ml-1;CLz/F分别为(1.41±0.74)和(1.95±1.23)L·h-1·kg-1;Vz/F分别为(6.43±2.79)和(7.11±1.90)L·kg-1。经配对t检验,多次给药达稳态后除AUC(0～24)和AUC(0～∞)降低外,其余药动学参数差异均无统计学意义。结论 YL-0919在比格犬体内多次给药后无明显蓄积作用。     

布托啡诺联合舒芬太尼用于术后自控静脉镇痛效果观察

目的：观察布托啡诺舒联合芬太尼用于术后患者自控静脉镇痛（PCIA）的效果。方法：将腹部手术90例随机分为布托啡诺（B组）、舒芬太尼（S组）和布托啡诺＋舒芬太尼组（BS组）各30例。B组布托啡诺10mg/100ml,S组舒芬太尼100mg/100ml,BS组（布托啡诺5mg＋舒芬太尼50μg）/100ml;持续量2ml/h,单次给药量为1ml,间歇时间10min。观察比较3组PCIA开始后4h、8h、12h、24h、48h患者的生命体征、VAS评分、Ramsay评分和不良反应的发生率。结果：3组术中及术后各时间节点HR、BP、SaO2、ECG和PETCO2差异不显著（P〉0.05）;在4h、8h、12h、24h时间节点上,B组VAS评分显著高于S组和BS组（P〈0.01）;12h内,B组Ramsay评分显著高于S组和BS组;B组在0～4h、4～8h、8～12h和12～24h时间段PCA总需求次数显著多于S组和BS组（P〈0.01）;B组头晕发生率显著高于S组和BS组（P〈0.05）;S组恶心、呕吐发生率显著高于B组和BS组（P〈0.05）。结论：布托啡诺联合舒芬太尼镇痛效果优于布托啡诺或舒芬太尼单独应用。     

LC-MS/MS法研究左旋去甲基苯环壬酯在比格犬体内的生物利用度

目的评价左旋去甲基苯环壬酯在比格犬体内生物利用度。方法 LC-MS/MS法测定比格犬口服和静脉给药后体内的血药浓度,计算药代动力学参数和绝对生物利用度。结果比格犬口服给药2 mg/kg后5 min即可测得血中药物含量,口服给药后1 h左旋去甲基苯环壬酯在比格犬体内血药浓度达峰,给药后36 h血中药物浓度均已降至LLOQ以下。比格犬口服和静脉注射2 mg/kg左旋去甲基苯环壬酯的t1/2分别为（5.36±0.82）h和（6.73±2.00）h,Cmax分别为（141.88±51.03）和（591.84±144.61）μg/L;AUC（0-36 h）分别为（962.42±220.96）和（1572.06±365.80）μg.L-1.h;用AUC（0-36 h）计算比格犬口服单剂量左旋去甲基苯环壬酯的绝对生物利用度为（61.22±10.78）%。结论左旋去甲基苯环壬酯口服给药吸收迅速,绝对生物利用度较高,具有良好的开发前景。     

LC-MS/MS法研究左旋去甲基苯环壬酯在比格犬体内的生物利用度

目的评价左旋去甲基苯环壬酯在比格犬体内生物利用度。方法 LC-MS/MS法测定比格犬口服和静脉给药后体内的血药浓度,计算药代动力学参数和绝对生物利用度。结果比格犬口服给药2 mg/kg后5 min即可测得血中药物含量,口服给药后1 h左旋去甲基苯环壬酯在比格犬体内血药浓度达峰,给药后36 h血中药物浓度均已降至LLOQ以下。比格犬口服和静脉注射2 mg/kg左旋去甲基苯环壬酯的t1/2分别为(5.36±0.82)h和(6.73±2.00)h,Cmax分别为(141.88±51.03)和(591.84±144.61)μg/L;AUC(0-36 h)分别为(962.42±220.96)和(1572.06±365.80)μg.L-1.h;用AUC(0-36 h)计算比格犬口服单剂量左旋去甲基苯环壬酯的绝对生物利用度为(61.22±10.78)%。结论左旋去甲基苯环壬酯口服给药吸收迅速,绝对生物利用度较高,具有良好的开发前景。     

布托啡诺与芬太尼应用于术后静脉镇痛的临床效果比较

目的比较布托啡诺与芬太尼用于病人自控静脉镇痛(PCIA)的临床价值。方法选择40例择期手术病人随机分为两组,N组(布托啡诺组:n=20):布托啡诺8mg、0.9%生理盐水加至100ml;F组(芬太尼组:n=20):芬太尼0.8mg、0.9%生理盐水加至100ml。选择负荷剂量加维持剂量即微泵连续给药方式行静脉镇痛(持续注药速度为2.0ml/h,单次PCA剂量为1ml,锁定时间60min)。结果N组与F组相比,镇痛评分、镇静评分、恶心呕吐、尿潴留发生率均无显著差异性(P>0.05)。两组病人均无发生呼吸抑制。结论布托啡诺用于术后静脉镇痛,效果确切、不良反应少。     

咪达唑仑片在中国回族和汉族健康人体的药动力学研究

目的研究健康回族和汉族志愿者单剂量口服咪达唑仑片的药代动力学。方法健康志愿者20名（回族、汉族各10名,男女各半）,单剂量口服15mg咪达唑仑片后,用高效液相色谱法测定咪达唑仑的血浆浓度,用DAS2.0药动学软件拟合主要药代动力学参数,采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果回族健康志愿者的主要药代动力学参数分别为：Cmax（130.1±38.3）μg.L-1,tmax（1.0±0.9）h,t1/2z（3.5±1.9）h,MRT0-12h（3.4±0.2）h,Clz/F（0.7±0.2）L.h-.1kg-1,Vz/F（3.5±2.6）L.kg-1和AUC0-12h（397.2±99.8）μg.h.L-1。汉族受试者的主要药代动力学参数分别为：Cmax（103.1±26.4）μg.L-1,tmax（1.5±0.7）h,t1/2z（3.0±0.8）h,MRT0-12h（3.6±0.4）h,Clz/F（0.7±0.2）L.h-.1kg-1,Vz/F（2.7±0.8）L.kg-1和AUC0-12h（368.8±103.6）μg.h.L-1。另外,咪达唑仑片的血药浓度-时间曲线中存在双峰现象。结论单剂量口服咪达唑仑片,回族和汉族健康志愿者的药代动力学无显著性种族差异,达峰时间和消除速率等方面存在显著的性别差异。     

布托啡诺对大鼠脊髓阿片受体表达的影响

 目的 评估大鼠鞘内注射不同剂量布托啡诺镇痛效果及其对脊髓阿片受体基因表达的影响.方法 112只雄性SD大鼠随机分成7组.C0组不做任何处理,V组与C1组分别经尾静脉注入布托啡诺0.2 mg/kg及等容生理盐水,T1、T2、T3、C2组鞘内注射布托啡诺10、20、30 μg及生理盐水.记录注射前后热甩尾潜伏期(TFL)变化.注射后1 h、2 h各组取8只大鼠的L3～5脊髓,以RT-PCR技术检测κ、δ、μ mRNA的表达水平.[HTH〗结果 T2、T3、V组注药后1 h、2 h镇痛效果相仿且优于T1组.V、T1、T2、T3组1、2 h时κ受体表达升高,而μ受体与δ受体表达下降,并以2 h为著,并且组间差异有统计学意义(P<0.05,或P<0.01).结论 鞘内注射布托啡诺20 μg与30 μg对热甩尾潜伏期镇痛效果相仿.大鼠鞘内注射布托啡诺可促进大鼠脊髓κ受体及抑制μ受体与δ受体的表达,并且上述效应呈剂量依赖性.     

抗乙肝新药阿米福韦药代动力学研究

目的对抗乙肝病毒前药阿米福韦（MCC-478）在比格犬中的口服生物利用度及体外的代谢转化情况进行研究。方法比格犬分别经灌胃和静脉注射给予等克分子量MCC-478和其活性产物602076,采用ESI-LC-MS/MS技术同时定量检测比格犬血浆中MCC-478和602076。体外MCC-478或602076分别在比格犬血浆、肝匀浆和肠匀浆等孵育体系,于不同时间点取样,采用ESI-LC-MS/MS技术同时定量检测比格犬血浆和肝肠匀浆中MCC-478和602076浓度。结果比格犬经灌胃给予MCC-478后体内602076的绝对生物利用度较低（2.38%）。在体外孵育体系中,MCC-478在犬血浆、肝匀浆和肠匀浆中均有代谢降解,t1/2分别为10.76、11.20、59.23 min,仅在血浆孵育体系中检测到活性产物602076且代谢活化率较低（5.90%）。602076在肝匀浆和肠匀浆中均较稳定,t1/2分别为533.08、693.00 min。结论比格犬灌胃MCC-478后,602076在比格犬体内的口服生物利用度较低可能与其体外代谢活化效率低有关。     

瑞舒伐他汀钙胶囊人体生物等效性研究

 目的 评价瑞舒伐他汀钙胶囊在健康人体中相对生物利用度及生物等效性。方法 随机、自身双交叉、单剂量口服试验制剂或参比制剂10 mg,采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定血浆中药物浓度,药动学参数采用DAS软件处理获得。结果 两种制剂峰浓度（C_max ）分别为（7.32±4.21）ng/ml和（7.37±3.23）ng/ml,达峰时间（T_max）分别为（4.3±1.3）h和（3.4±1.6）h,半衰期（t_1/2）分别为（11.57±8.18）h和（10.70±5.26）h,0～t药时曲线下面积（AUC_0–t）分别为（64.8±28.0）ng/（ml.h）和（71.0±28.0）ng/（ml.h）,0～∞药时曲线下面积（AUC_0–∞）分别为（66.1±28.3）ng/（ml.h）和（72.2±28.8）ng/（ml.h）;相对于参比制剂,试验制剂的生物利用度为（93.2±18.5）%（以AUC_0-t计）、（93.6±17.6）%（以AUC_0-∞计）。试验制剂和参比制剂的C_max、AUC_0–t和AUC_0–∞经对数转换后进行方差分析,两制剂间差异无统计学意义。结论 试验制剂瑞舒伐他汀钙胶囊和参比制剂瑞舒伐他汀钙片具有生物等效性。     

美洛昔康注射液人体的药动学研究

目的研究单剂量和多剂量肌注美洛昔康后的药代动力学。方法30名健康志愿者单剂量肌注3．75、7．5、15mg和11名健康志愿者7次肌注7．5mg后，采用LC／MS／MS法测定血浆中美洛昔康的浓度，DAS软件对各组药-时曲线进行拟合，并计算药代动力学参数。结果其药-时曲线符合开放性二室模型，呈一级消除动力学；分别得到3个单剂量组及多剂量组美洛昔康的Cmax、Tmax、AUC0-96h、t1／2β、MRT0-∞、Vd／F、CL/F各值；单剂量组28名强代谢型的Cmax、AUC0-96h与给药剂量呈线性正相关。结论各组受试者注射后耐受性好，其在受试者体内的药动学存在明显个体差异。可为美洛昔康注射液在临床用药的安全性和有效性提供依据。     

Recirculation of iopanoic acid after conjugation in the liver

The purpose of the investigation was to determine if an enterohepatic recirculation occurred for the metabolite of iopanoic acid. The major metabolite of iopanoic acid (Telepaque) in dog bile is the glucuronide conjugate. The identification and quantitation of glucuronide conjugate was accomplished by elemental analysis, paper chromatography, thin layer chromatography, fluorescent excitation analysis, and high pressure liquid chromatography. The stability of iopanoic acid glucuronide in refrigerated dog bile was confirmed. Known amounts of the glucuronide conjugate were instilled into the duodenum of 8 awake adult dogs, and bile collected for 8 hours. Between 19% and 53% (average 31%) of the administered dose was recovered in bile, thereby documenting the presence of an enterohepatic recirculation of conjugated iopanoic acid. The slow rise and plateau of the excretion curve suggests that either the compound is absorbed slowly, or that absorption depends upon deconjugation in the gut. The implications are discussed.     

多潘立酮片人体药代动力学和生物等效性

目的研究多潘立酮片(湖南威特)在健康人体内的相对生物利用度和生物等效性,为新药报批及其临床应用提供依据。方法18名健康受试者采用随机双交叉试验方法,单剂量口服受试及参比制剂20 mg,用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度,计算主要药代动力学参数。结果受试制剂多潘立酮片(湖南威特)的T1/2:(9.31±1.60)h、Cmax:(27.2±2.5)μg/L、Tmax:(0.76±0.20)h、AUC0-t:(142.5±24.4)μg.h/L;参比制剂多潘立酮片(西安杨森)T1/2:(8.72±1.39)h、Cmax:(28.1±3.9)μg/L、Tmax:(0.78±0.21)h、AUC0-t:(140.9±27.3)μg.h/L。以AUC0-t计算,与参比制剂相比受试制剂中多潘立酮的平均相对生物利用度为(101.6%±5.1%)。结论两制剂生物等效。     

高效液相色谱法研究人体内兰索拉唑片药动学和生物等效性

目的研究健康人口服兰索拉唑片后的药动学和生物等效性。方法19个健康受试者采用随机分组自身交叉对照试验设计,口服兰索拉唑片30mg后用HPLC法测定血浆中兰索拉唑浓度,以DAS软件计算其药动学参数和评价生物等效性。结果在选定的色谱条件下兰索拉唑与内标及血浆杂质分离良好,在20～2000ng·mL^-1范围内线性良好。相对回收率〉95．14％,日内和日间RSD〈13．2％。兰索拉唑片受试制剂和参比制剂的主要药动学参数：Tmax分别为（2．45±0．47）h和（2．45±0．47）h,Cmax分别为（818．0±275．2）ng·mL^-1和（859．3±311．3）ng·mL^-1;t1／2分别为（2．24±0．89）h和（2．18±0．85）h;AUC0→12分别为（2405±1141）ng·h·mL^-1和（2511±1351）ng·h·mL^-1;用面积法（AUC0→t）估算的兰索拉唑片相对生物利用度为（99．9±15．9）％。结论用HPLC法测定血浆中兰索拉唑浓度,杂质无干扰,定量限低,重复性好,准确度高。受试的兰索拉唑片与参比的兰索拉唑片生物等效。     

壬苯醇醚-9胶囊在比格犬体内的药代动力学研究

目的 建立一种快速、专属的反相高效液相色谱法测定比格犬血浆中壬苯醇醚-9的浓度,研究壬苯醇醚-9在比格犬体内的药代动力学.方法 6只健康♀比格犬,体质量9.5～10.0 kg,单剂量(192mg/只)口服给药壬苯醇醚-9自制胶囊,采用DiamonsilTM(钻石)ODS柱(200 mm ×4.6 mm,5μm,ID),...     

大鼠血浆中抗抑郁新药阿姆西汀浓度检测方法的建立及其药代动力学

目的：应用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）建立大鼠血浆中阿姆西汀（S-071031B）浓度测定方法,并考察大鼠灌胃给予阿姆西汀后的药代动力学。方法采用LC-MS/MS方法,以盐酸苯环壬酯左旋体（ L-8021）为内标,C18柱为分析柱,流动相为含0．1％甲酸的水-乙腈体系,流速为0．3 ml/min,采用电喷雾正离子（ESI ＋）、选择反应监测（SRM）模式进行检测。绘制血药浓度-时间曲线并利用DAS 2．0计算药代动力学参数。结果大鼠血浆中内源性杂质不干扰阿姆西汀和内标的测定,阿姆西汀的线性范围为2～1000 ng/ml （r2＝0．9965）,定量限为2 ng/ml,日内、日间精密度和准确度,绝对回收率和基质效应均符合生物样品测定需要。大鼠口服灌胃后在（0．8±0．3）h达到（287．2±50．8）μg/L的峰值浓度,t1/2为（2．9±0．6）h,AUC（0-∞）为（1372．6±255．3）μg/L· h。结论本方法灵敏度高、特异性好,可用于血浆中阿姆西汀的浓度测定及其药代动力学研究。     

盐酸川芎嗪透皮贴剂药代动力学研究

目的建立SD大鼠盐酸川芎嗪（TMPH）贴剂和灌胃给药后体内血药浓度的测定方法,计算贴剂组和灌胃组的药代动力学参数并进行比较。方法贴剂组：自制贴剂,SD大鼠背部给药（1.04 g/kg）,分别于给药后0.5、1.5、3、4、5、6、7、8、9、12、17、24 h从尾部静脉取血;灌胃组：SD大鼠灌胃给药（1.6 mg/kg）,分别在给药后5、8、10、13、15、21、34、45、61 min从尾部静脉取血;用HPLC测定两组大鼠体内TMPH的血药浓度,用DAS软件计算。结果灌胃组药代动力学参数：Tmax=0.167 h,Cmax=1.97 mg/L,T1/2=0.076 h,Auc0-t=0.597[（μg·h）/ml],Auc0-∞=0.650[（μg·h）/ml];贴剂组药代动力学参数：Tmax=5.917 h,Cmax=253 mg/L,T1/2=5.95 h,Auc0-t=3547.56[（μg.h）/ml],Auc0-∞=4132.47[（μg.h）/ml]。结论 TMPH灌胃给药时,达峰时间和半衰期都很短,说明TMPH普通制剂在体内吸收代谢非常迅速,难以长时间维持有效血药浓度;TMPH贴剂给药的达峰时间和半衰期大大延长,能够在较长时间内维持较高的血药浓度。     

LC-MS/MS法检测小鼠静注水溶性紫杉醇偶合物后血浆中的药物浓度

目的建立灵敏、特异的LC-MS/MS方法测定小鼠血浆中紫杉醇浓度,并应用于小鼠静注水溶性多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。方法用甲基叔丁基醚提取小鼠血浆样品,以多西紫杉醇为内标,在BetaBasicC18色谱柱上以流动相乙腈-水-甲酸（65∶35∶0.1,体积比）分离,流速为0.2ml/min;采用液相色谱-质谱-质谱联用仪,通过电喷雾离子化电离源,以选择反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z854.2→286.1（紫杉醇）和m/z808.3→527.2（多西紫杉醇）。结果测定紫杉醇的线性范围为0.5～1000ng/ml,相关系数r为0.9995,定量下限为0.5ng/ml,日内日间精密度分别小于11.52%和13.11%,准确度控制在87.05%～100.87%,提取回收率为85.04%～93.63%。结论该法快速、灵敏度高、专一性好,成功应用于小鼠静注10mg/kg水溶性多聚（L-谷氨酸）-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。