SEC-RI-MALLS测定甘露聚糖肽分子量与分子量分布

目的:建立尺寸排阻色谱-示差折光-多角度激光光散射检测器联用(size exclusion chromatography-refractive index-multiangle laser light scattering, SEC-RI-MALLS)测定甘露聚糖肽原料药和制剂分子量及分子量分布的方法。方法:采用SEC-RI-MALLS联用技术,以0.05 mol·L^-1硫酸钠溶液为流动相,Shodex OHpak SB-804 HQ为色谱分离柱,在流速0.5 mL·min^-1,柱温35℃的条件下对甘露聚糖肽分子量及其分布进行专属性、准确度、精密度、耐用性方法学验证,并与现行质量标准方法进行比较。结果:片剂辅料淀粉对测定无干扰,右旋糖酐标准品实测值同标示值的准确度相对误差<3.0%;当样品配制浓度为2 mg·mL^-1时精密度最好,RSD为0.40%;重现性、耐用性RSD均不大于5.0%。79批次样品采用Shodex OHpak SB-804 HQ色谱柱和TSK-GEL G4000 PW_XL色谱...     

HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定消疲灵颗粒中的7种成分

目的 建立同时测定消疲灵颗粒中7种成分含量的HPLC波长切换联合梯度洗脱方法。方法 采用Venusil MP-C₁₈色谱柱,流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液,流速为0.9 mL·min^-1,梯度洗脱,柱温为30 ℃,进样量为10 μL。结果 牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素检测浓度分别在2.56~51.20 μg·mL^-1,14.87~297.40 μg·mL^-1,2.14~42.80 μg·mL^-1,3.16~63.20 μg·mL^-1,3.80~76.00 μg·mL^-1,2.14~42.80 μg·mL^-1,4.81~ 96.20 μg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系（r≥0.999 1）,平均回收率97.0%~100.0%,RSD 0.55%~1.67%,精密度和重复性良好,供试品溶液在室温条件下12 h内稳定。结论 该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于消疲灵颗粒中7种有效成分含量的同时测定。     

藻酸双酯钠分子量及其分布的测定

采用示差折光检测器,以高效凝胶色谱法测定藻酸双酯钠分子量及其分布.以已知分子量的右旋糖酐为对照,采用Shodex OHpak SB-803HQ色谱柱,2.8%硫酸钠溶液(含0.02%叠氮钠)为流动相,检测池温度40℃,柱温35℃,流速0.5ml/min.     

食品虾仁中土霉素、四环素、金霉素含量测定方法的建立

目的：建立高效液相色谱法测定虾仁中土霉素、四环素、金霉素的含量。方法：采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;梯度洗脱,以甲醇为流动相A,乙腈为流动相B,10 mmol·L^-1三氟乙酸为流动相C;流速1.5 mL·min^-1;检测波长为350 nm。结果：土霉素、四环素、金霉素检出限分别为0.005、0.005和0.020 mg·kg^-1,土霉素、四环素线性范围为0.05~1.00 μg·mL^-1,相关系数为0.9996及0.9995,金霉素线性范围为0.20~4.00 μg·mL^-1,相关系数为0.9998;加标回收率为73.5%~94.2%。结论：本方法简便、灵敏、专属,重复性好,可用于同时测定虾仁中土霉素、四环素、金霉素的含量。     

邻苯二甲醛柱前衍生化-HPLC测定复方氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜的含量

目的 建立测定复方氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜含量的方法。方法 采用邻苯二甲醛（O-phthaladehyde,OPA）柱前衍生HPLC。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse AAA C₁₈柱（150 mm×4.6 mm,5µm）,检测波长为338 nm,流动相A为0.04 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液（调节pH至7.8）,流动相B为乙腈-甲醇-水（45：45：10）,梯度洗脱,流速为2.0 ml·min^-1,柱温为40℃,供试品溶液与OPA衍生剂及硼酸盐缓冲液按设定程序自动混匀后进样。结果 蛋氨酸亚砜的质量浓度线性范围为0.000 5~0.050 0 mg·mL^-1（R=0.999 9）;定量限为0.250 5 μg·mL^-1,检测限为0.083 5 μg·mL^-1;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;平均回收率为99.1%（RSD=1.33%,n=9）。结论 该方法操作简便,可用于复方氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜的含量测定。     

聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯中单双酯的制备及5种成分含量测定

目的 分离制备聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯中的单酯与双酯,并采用HPLC-UV、HPLC-ELSD测定聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯中的单酯、双酯、维生素E琥珀酸酯、α-生育酚及聚乙二醇1000的含量。方法 制备液相色谱分离采用DAC-HB50 C₁₈动态轴向压缩色谱柱（50 mm×250 mm,10 μm）,以水（A）-乙醇（B）为流动相,梯度洗脱,流速75 mL·min^-1,检测波长285 nm,收集目标组分旋蒸去除溶剂制得单酯、双酯,并确证其结构。含量测定色谱条件：Waters XBridge C₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,0.1%甲酸溶液为流动相A,乙腈-异丙醇（1∶1）为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长285 nm。HPLC测定制得的单双酯纯度及单酯、双酯、维生素E琥珀酸酯、α-生育酚含量;HPLC-ELSD测定聚乙二醇1000含量,采用相同色谱柱与流动相,进行不同的梯度洗脱,ELSD漂移管温度90.4℃,载气流速2.3 L·min^-1。结果 制得单、双酯纯度分别为99.1%,99.8%。各成分分离良好,在相应的范围内线性关系良好,相关系数r≥0.999 5;平均回收率为98.2%~99.7%。结论 制备液相色谱法可制得满足检测需求的单、双酯对照品;2种检测方法经验证,适用于聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯中单酯、双酯、维生素E琥珀酸酯、α-生育酚及聚乙二醇1000的含量测定。     

少腹逐瘀丸中松香酸的HPLC-MS检测方法研究

目的：建立少腹逐瘀丸中添加松香酸的HPLC和HPLC-MS/MS检测法。方法：采用HPLC、HPLC-PDA、HPLC-MS等。色谱柱为C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,体积流量1.0 mL·min^-1,流动相为乙腈-0.1%甲酸水（82：18）,检测波长为241 nm。液质联用验证采用C18柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,体积流量0.2 mL·min^-1,梯度洗脱。结果：松香酸进样量在0.1582~1.582μg·mL^-1与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.8%,RSD为0.23%。结论：该方法简便、快速、准确,专属性稳定性及重复性均良好。本文所建立的检测方法,可满足定性定量检测少腹逐瘀丸中非法添加松香酸的要求。     

HPLC测定沅江产芦笋中3种酚酸和6种黄酮类成分含量

目的 建立同时测定沅江产芦笋中原儿茶酸、绿原酸、香草酸、柚皮苷、芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚、芹菜素含量的HPLC。方法 采用Diamonsil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,双波长检测（酚酸：283,327 nm;黄酮：283,335 nm）,流速1 mL·min^-1,柱温35℃,进样量为10 μL。结果 3种酚酸及6种黄酮分别在25 min和50 min内分离,线性范围为14.8~500 μg·mL^-1（r=0.999 0~0.999 7）,检测限0.006 3~0.053 9 μg·mL^-1,定量限0.021 1~0.179 7 μg·mL^-1,加样回收率为98.73%~102.44%,RSD为1.27%~2.20%（n=6）。结论 该方法准确灵敏、重复性好,可用于检测芦笋中9种成分含量。     

LC-MS/MS测定阿齐沙坦及其盐在大鼠血浆中的药动学研究

目的 建立液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度并研究其药动学。方法 大鼠血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（50 mm×3.0 mm,1.8 μm）;流动相（乙腈：水=60：40）,流速为0.35 mL·min^-1,柱温为40℃;采用Agilent 6430三重四极杆串联质谱仪,离子化方式：电喷雾-正离子（API-ES）;监测方式：MRM;阿齐沙坦监测离子对457.3/233.1,缬沙坦监测离子对436.2/291.4,用作内标。SD大鼠灌胃给予阿齐沙坦1.0 mg·kg^-1及阿齐沙坦盐1.2 mg·kg^-1。结果 阿齐沙坦在5~30 000 ng·mL^-1内线性关系良好;回收率为85%~115%,精密度RSD在±15%内。阿齐沙坦盐大鼠体内主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（12.9±3.2）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（14.2±4.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（3.8±0.3）μg·mL^-1,T_1/2为（13.4±0.5）h。阿齐沙坦的主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（8.1±2.6）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（9.7±3.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（2.3±0.5）μg·mL^-1,T_1/2为（10.5±0.5）h。结论 本法经方法学验证,适用于大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度测定,可用于阿齐沙坦及其盐大鼠体内药动学研究。     

GC测定克痢痧胶囊中的冰片、甲基丁香酚和丁香酚的含量

目的 采用GC测定克痢痧胶囊中的冰片、甲基丁香酚和丁香酚的含量。方法 采用GC直接进样,色谱柱为AgilentHP-INNOWAX毛细管柱,检测器为氢火焰离子化检测器,温度为250℃,采用程序升温,进样口温度为210℃;流速为1.2 mL·min^-1,分流比为15︰1,进样量为1 μL。结果 冰片、甲基丁香酚和丁香酚的线性范围分别是48.59~728.88 μg·mL^-1（r=0.999）;4.29~64.39 μg·mL^-1（r=0.999）和31.83~477.48 μg·mL^-1（r=0.999）,精密度、重复性和稳定性试验的RSD均≤2.17%,平均加样回收率分别是98.69%（RSD=0.3%）,93.10%（RSD=1.6%）和99.41%（RSD=0.5%）。结论 本方法操作简单、快速、准确性和重复性好,可用于克痢痧胶囊的质量控制。     

低分子量羟丙甲纤维素的分子量及其分布的测定

目的测定低分子量羟丙甲纤维素的分子量及其分布。方法利用高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射检测器(HPSEC-RID-MALLS)技术,以0.1mol·L-1硝酸钠-甲醇(95∶5)为流动相,采用Shodex OHpak SB-804 HQ(8.0 mm×300mm)凝胶柱进行检测。结果低分子量羟丙甲纤维素的重均分子量测定误差≤2%,数均分子量和分子量分布误差均≤5%,结果准确可靠。结论利用HPSEC-RID-MALLS技术可测定低分子量羟丙甲纤维素的分子量及其分布。     

高效凝胶渗透色谱法测定莫海林分子量及其分布

目的 :建立一种莫海林分子量及其分布测定的质控方法。方法 :采用高效凝胶渗透色谱法 (HPGPC) ,色谱柱为ShodexAsahipakGF 5 10HQ (7 6mm× 30 0mm) ,以已知分子量的葡聚糖 (Dextran)为标样 ,0 2mol·L-1硫酸钠 (稀硫酸调至pH 5 0 )为流动相 ;柱温 35℃ ;流速 0 5mL·min-1;示差折光检测器。结果 :利用GPC软件处理 ,得到莫海林的数均、重均分子量和分子量累积重量分布曲线。结论 :本文所建立的HPGPC法简便、快速、重现性好 ,适合于该类药物的质量控制     

硫酸软骨素钠分子质量及其分布的测定

目的:采用两种方法测定硫酸软骨素钠的相对和绝对分子质量及其分布,并对两种分析方法进行比较。方法:色谱柱为TSKgel G3000SWXL,流动相为2.84%硫酸钠(pH 5.0,含0.02%叠氮化钠),流速为0.5 mL·min-1,柱温为35℃,分子排阻色谱(SEC)法为示差折光(RI)检测器,分子排阻色谱和多角度激光光散射联用(SEC-MALLS)法的检测器为示差折光检测器(DNDC仪)和激光光散射仪联用。结果:SEC法和SEC-MALLS法测得的分子质量结果存在较大差异。结论:由于目前国内没有合适的硫酸软骨素钠分子质量测定用标样,SEC法测定结果与真实分子质量存在较大误差,SEC-MALLS法准确,可靠。     

测定低分子量透明质酸相对分子质量的3种方法比较

目的比较3种测定低分子量透明质酸(LMWHA)相对分子质量(Mr)方法。方法分别采用特性黏度法、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法及多角度激光散射仪结合凝胶渗透色谱(GPC/MALLS)法测定LMWHA的Mr,并对所得结果进行对比分析。结果对于Mr介于10 000~100 000范围内的LMWHA,特性黏度法测得的Mr值与GPC/MALLS法测得的Mr值基本相同,而HPGPC法由于所用标准Mr对照品结构上的差异,测得的Mr与其它两种方法测得的值差异较大。结论在一定Mr范围内,特性黏度法和GPC/MALLS法均可用于测定LMWHA的Mr。     

三种肝素对维持性血液透析患者相关指标的影响

目的探讨不同肝素在血液透析(HD)中的应用对维持性血液透析(MHD)患者的影响。方法分别采用进口、国产低分子肝素(LMWH)及普通肝素(UFH)为血液透析抗凝剂,观察三年相关指标并进行对照分析。结果LMWH组各项出、凝血指标在透析中及透析后无明显改变,出血并发症明显减少,透析三年前后血脂无明显改变穴P>0.05雪。与UFH组比较,穿刺点压迫止血时间明显缩短,透析器及血路管复用容易。进口与国产LMWH无明显差异。结论无论进口或国产LMWH都是维持性血液透析尤其是对伴有轻中度活动性出血的透析患者较为理想的抗凝剂。     

低分子肝素钠早期干预治疗FGR的临床研究

目的：探讨低分子肝素钠早期干预治疗胎儿生长受限的临床效果及对围生儿结局的影响。方法选取我院2009年1月～2014年1月收治的经产前检查诊断为胎儿生长受限的孕妇200例,分为观察组和对照组,每组100例。两组患者在治疗母体基础性疾病基础上,观察组早期进行低分子肝素钠治疗,对照组单纯为加强饮食营养。观察两组孕妇每周宫高和腹围、胎儿双顶径、头围、股骨长。结果观察组明显优于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;两组患者胎儿治疗前的羊水、生物物理评分以及S/D评分比较,无显著性差异（P＞0.05）,治疗后观察组明显的优于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;两组患者新生儿胎龄、体重以及窒息情况比较,差异均有显著性（P＜0.05）。结论低分子肝素钠在改善胎盘循环,促进胎儿生长发育方面临床效果肯定,且对母亲和胎儿安全性均较好。     

低分子肝素相对分子质量与抗凝活性关系研究*

目的:研究低分子肝素相对分子质量与抗凝活性之间的关系。方法:用生色底物法测定不同相对分子质量的低分子肝素6个分级和未分级样品的抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价,相对分子质量采用高效体积排阻色谱法(high performance size exclusion chromatography,HPSEC)测定。结果:抗Ⅹa因子与抗Ⅱa因子效价比随着相对分子质量的降低而增大。结论:在测定范围内,低分子肝素相对分子质量降低,抗凝活性降低,抗栓作用增强。     

合成产物羟乙基淀粉主要质控指标研究

目的：分析合成物羟乙基淀粉的主要性能指标，并观察其与对照品的比较结果。方法：采用高效液相色谱法测定羟乙基淀粉的分子量大小及其分布特征；烷氧基化学滴定法分析羟乙基淀粉的取代度特征。结果：重均分子量13万的合成产物HES-36取代度在0．40左右，分布系数3．05；重均分子量20万的合成产物HES-89取代度在0．50左右，分布系数4．07。结论：高效液相色谱和烷氧基化学滴定为有效的测定羟乙基淀粉主要性能指标的方法，且合成物的测定结果同国外同类产品吻合性较好。     

那屈肝素钙注射液重均相对分子质量与相对分子质量分布探析

目的：考察那屈肝素钙注射液重均相对分子质量与相对分子质量分布情况及存在问题，并对现行标准检验方法进行改进与统一以便更有效评价产品质量。方法：按照现行标准对市售的4家企业47批样品的相对分子质量与相对分子质量分布项目进行检验；改进并统一检验方法：采用TSKgel G2000SWXL （300 mm×7.8 mm）色谱柱分离，以0.1 mol·mL^-1醋酸铵溶液为流动相，流速0.5 mL·min^-1，柱温30℃，样品浓度1 500 IU·mL^-1，示差折光检测器对47批样品进行测定；比较分析法定方法和拟定方法对相对分子质量与相对分子质量分布测定结果的影响及不同企业样品相对分子质量与相对分子质量分布的差异；比较分析加速时间对样品相对分子质量与相对分子质量分布的影响。结果：4家企业47批那屈肝素钙注射液的相对分子质量与相对分子质量分布按法定标准检验均符合规定。拟定方法经方法学验证，样品主峰与溶剂峰分离度良好，精密度RSD为0.1%；重均相对分子质量与相对分子质量分布结果的重复性RSD依次为0.1%、1.5%、0.1%、0.1%；日间精密度RSD依次为0.2%、1.9%、0.4%、0.4%。47批样品的相对分子质量与相对分子质量分布按拟定方法检验均符合规定，法定方法与拟定方法测定结果略有差异。B企业、C企业样品相对分子质量小于2 000的级分所占比例较D企业高。A、B、C 3家企业样品重均相对分子质量与加速时间呈负相关性。结论：A、B、C 3家企业样品的相对分子质量与相对分子质量分布及加速试验稳定性较D企业样品有一定差距。1家企业的现行质量标准较低，亟待提高。拟定方法降低流动相盐浓度，减少对色谱柱的损害，操作简便，检验成本低，重复性良好，方法耐用性符合要求，结果准确可靠，可用于那屈肝素钙注射液相对分子质量与相对分子质量分布的测定。