毛蚶多肽提取物的体外免疫活性

目的考察毛蚶多肽提取物(PEAS)的体外免疫活性。方法 MTT法测定PEAS对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及对小鼠NK细胞杀伤活性的影响;中性红吞噬法测定PEAS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;流式细胞术测定PEAS所致小鼠脾淋巴细胞周期的变化;双抗体夹心ELISA法测定PEAS对主要细胞因子IFN-γ和IL-4分泌水平的影响。结果 PEAS能够显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖(P<0.05或0.01),能够增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红活性和小鼠NK细胞杀伤活性(P<0.05或0.01);PEAS能够促进脾淋巴细胞G0/G1期向DNA合成期(S期)转化;PEAS协同Con A作用,能够增加IFN-γ的分泌(P<0.05或0.01),并且能够抑制IL-4的分泌(P<0.05或0.01)。结论 PEAS体外可促进小鼠脾淋巴细胞、腹腔巨噬细与NK细胞的免疫功能,其机制可能与促进脾淋巴细胞DNA合成,增加IFN-γ的分泌量有关。     

玉郎伞多糖对体外BALB/C小鼠淋巴细胞和巨噬细胞分泌细胞因子的影响

目的:探讨玉郎伞多糖（YLSPS）体外对BALB/C小鼠淋巴细胞、巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）及白细胞介素-2（IL-2）的影响及作用机制。方法:分离BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞,分为空白对照组、LPS或ConA对照组和各浓度YLSPS组(50,100,200 mg·L^-1),MTT法检测脾淋巴细胞增殖,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的浓度,RT-PCR法检测TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2 mRNA的表达。结果:各浓度YLSPS组能剂量依赖性地促进BALB/C小鼠脾淋巴细胞增殖和TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-2的分泌,显著增强这些细胞因子的mRNA的表达（P<0.01或P<0.05）。结论:YLSPS体外能促进BALB/C小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞分泌IFN-γ、IL-2、TNF-α和IL-6,其作用机制可能与上调上述细胞因子mRNA表达有关。     

IFN-γ、IL-12对B7-1转染肝癌细胞诱导T淋巴细胞活化的影响

目的探讨B7—1基因转染肝癌细胞与IFN-γ、IL-12联合在体外诱导T细胞活化的能力。方法酶联免疫吸附反应(ELISA)检测联合诱导瘤苗刺激淋巴细胞IFN-γ、IL-12蛋白合成及细胞表面CD4、CD8、CD25的表达。MTT法检测瘤苗对淋巴细胞增殖作用的影响。结果HepG2／B7—1细胞诱导淋巴细胞表达IL-2、IFN-γ,其蛋白质含分别为875pg／ml和1246pg／ml;而联合IL-12、IFN-γ后能进一步诱导IL-2、IFN-γ的蛋白质合成,较各自无细胞因子组明显提高(P＜0．05)。细胞表面CD4、CD8、CD25的表达显著增加。两者联合促进了淋巴细胞的增殖,在E／T=10：1时,较HepG2组明显增大。结论IL-12、IFN-γ增强经B7—1基因转染的肝癌细胞(HepG2／B7—1)诱导淋巴细胞产生IL-2、IFN-γ的能力;IL-12、IFN-γ可能通过调节B7—1分子的生物学活性影响其对T细胞的活化。     

姬松茸多糖ABP-AW1对免疫功能低下小鼠的免疫增强作用

目的探讨低分子质量姬松茸多糖ABP-AW1对免疫功能低下小鼠的免疫增强作用。方法 ICR小鼠ip给予环磷酰胺80 mg·kg~(-1),连续3 d,制备免疫功能低下小鼠模型;随后分别ig给予ABP-AW1 125,250和500 mg·kg~(-1),每天1次,连续7 d。治疗结束后处死小鼠,检测小鼠胸腺指数和脾指数,碳廓清实验检测小鼠巨噬细胞吞噬功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)和干扰素γ(IFN-γ)水平,流式细胞术检测小鼠脾T淋巴细胞亚群CD4~+/CD8~+比值。结果与正常对照组比较,免疫低下模型小鼠胸腺指数和脾指数以及巨噬细胞吞噬指数均降低(P<0.05);ABPAW1 250和500 mg·kg~(-1)可显著提高免疫低下模型小鼠胸腺指数和脾指数(P<0.05),升高巨噬细胞吞噬指数(P<0.05)。与正常对照组比较,模型小鼠伴刀豆凝集素A(Con A)和脂多糖(LPS)分别诱导的T淋巴细胞增殖反应和B淋巴细胞增殖反应降低,脾细胞分泌IL-2和IFN-γ水平降低,脾细胞CD4~+/CD8~+比值下降(P<0.05);与模型组比较,ABP-AW1 250和500 mg·kg~(-1)可促进免疫低下模型小鼠Con A和LPS分别诱导的T淋巴细胞增殖反应和B淋巴细胞增殖反应(P<0.05),显著增加脾细胞IL-2和IFN-γ水平(P<0.05),明显逆转免疫低下小鼠脾细胞CD4~+/CD8~+比值的下降(P<0.05)。结论 ABP-AW1对免疫功能低下小鼠具有一定的免疫增强作用。     

低剂量白藜芦醇增强小鼠免疫反应

目的:研究低剂量白藜芦醇的免疫调节作用.方法:用ConA和Sac分别刺激T淋巴细胞和抗原细胞并诱导细胞因子产生;[~3H]-胸腺嘧啶核苷掺入法检测淋巴细胞增殖;ELISA法检测IL-2,IL-12,IL-10和IFN-γ;用DNFB诱导小鼠迟发型超敏反应(DTH),小鼠耳肿胀作为DTH反应指标;流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞亚群的变化.结果:白藜芦醇(0.75-6μmol/L)剂量依赖性地促进小鼠T淋巴细胞的增殖和IL-2的产生;白藜芦醇还剂量依赖性地促进脾脏淋巴细胞IFN-γ和IL-12的生成,同时抑制IL-10的产生;白藜芦醇(4 mg/kg)灌胃给药能对抗乙醇(16％,w/v)对小鼠DTH反应的抑制作用;白藜芦醇对脾脏淋巴细胞亚群无明显改变,但能逆转乙醇对脾淋巴细胞中巨噬细胞数量和 MHC-II分子表达的下调作用.结论:低剂量白藜芦醇能促进小鼠细胞介导的免疫反应,促进Th1细胞因子产生及影响巨噬细胞功能是其可能的机制.     

云南黑松露醇提物对小鼠T淋巴细胞免疫调节作用

目的 观察云南黑松露醇提物对小鼠T淋巴细胞增殖及免疫功能的影响。方法 将干燥云南黑松露粉末进行乙醇超声提取、乙酸乙酯萃取,水相及乙酸乙酯相部分样品分别采用C₁₈反相柱、凝胶柱进行分离、浓缩;噻唑蓝(MTT)法检测云南黑松露醇提物对刀豆蛋白A(ConA)刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测云南黑松露醇提物对Anti-CD3刺激小鼠脾淋巴细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)的影响;蛋白印迹(Western blotting)法检测云南黑松露醇提物对小鼠脾淋巴细胞IFN-γ表达水平的影响;流式细胞术检测云南黑松露醇提物对小鼠脾淋巴细胞CD₃⁺及CD₄⁺细胞表达水平的影响。结果 云南黑松露醇提物共分离得到组分17个。其中水相部分分离得到组分8个,记作1-8;乙酸乙酯相部分分离得到组分9个,记作A-I。MTT结果显示,在ConA诱导下,F号组分对小鼠脾淋巴细胞具有一定促增殖活性。ELISA结果显示,在Anti-CD3诱导下,1、F和...     

黄芪皂甙Ⅳ对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞功能的影响(英文)

目的:探讨黄芪皂苷Ⅳ(ASI)对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响.方法:采用MTT法检测T、B淋巴细胞的增殖;采用分光光度计测定法检测抗体活性;IL-1活性用胸腺细胞增殖法测定;TNF-α活性用L929细胞杀伤法测定.结果:1)ASI50-200mg/kg ig 7天能够促进T淋巴细胞增殖和抗体生成,而ASI 50-100mg/kg能够促进B淋巴细胞增殖,但是220mg/kg对B淋巴细胞增殖无影响;2)ASI体外仅在100nmol/L对T、B淋巴细胞有促进作用;3)ASI 1 nmol/L可以促进腹腔巨噬细胞分泌IL-1,而100-1000nmol/L则抑制腹腔巨噬细胞分泌IL-1;4)ASI体外可以抑制LPS刺激或无LPS刺激下的腹腔巨噬细胞分泌TNF-α.结论:ASI能够促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖和抗体生成,同时可以抑制腹腔巨噬细胞体外分泌IL-1和TNF-α.     

干扰素γ诱导肝癌HepG2细胞表达B7分子的实验研究

目的研究干扰素γ(IFN-γ)对人肝癌细胞B7分子表达的影响。方法选用人肝癌HepG2细胞进行体外培养,经过不同浓度的IFN-γ干预后,采用MTT法检测细胞增殖作用,RT-PCR检测B7-1和B7-2mRNA的表达。结果不同浓度的IFN-γ对HepG2细胞体外生长有明显抑制作用;干预后HepG2细胞的B7基因表达明显增加。结论IFN-γ能直接抑制HepG2细胞增殖,显著上调HepG2细胞B7基因的表达,具有一定的抗肿瘤效应。     

达肝清对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 探讨达肝清对正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的影响.方法 用达肝清给正常小鼠和环磷酰胺免疫抑制小鼠灌胃,然后用称重法检测小鼠肝脾重量、溶血试验检测血清溶血素含量、QHS法检测抗体形成细胞数、RIA法检测IL-2含量、MTT法检测NK细胞活性和T淋巴细胞增殖功能.结果 达肝清对正常小鼠免疫功能无显著影响,对CXT免疫抑制小鼠有显著的抵抗作用,能增加免疫抑制小鼠肝脾的重量、促进抗体生成和IL-2分泌,增加NK细胞活性和T淋巴细胞增殖功能.结论 达肝清对正常小鼠的免疫功能无显著影响,但能抵抗CTX对小鼠免疫功能的抑制作用.     

酵母多糖对免疫功能的影响

目的从酵母菌中提取其多糖成分,探讨酵母多糖对小鼠免疫功能的影响,为酵母多糖的临床应用提供实验依据。方法取小鼠脾脏淋巴细胞,置于96孔细胞培养板中,加入酵母多糖为酵母多糖组和细胞培养液为空白对照组,测定小鼠脾细胞的增殖活性;取细胞上清液,测定细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ);用流式细胞术(FCM)检测细胞表型,观察酵母多糖对细胞免疫和体液免疫作用。结果实验组细胞增殖活性显著高于对照组(P<0.01);实验组IL-2,IFN-γ的浓度与酵母多糖在一定浓度范围内成剂量依赖关系;酵母多糖即能刺激B淋巴细胞,也能刺激T细增殖。结论酵母多糖可提高小鼠免疫功能,它不仅能提高体液免疫功能,而且能提高细胞免疫功能。     

鲨肝活性肽的免疫调节和抗细胞凋亡作用

目的　为了选择鲨肝活性肽 (SHAP)临床应用的适应症并了解其作用机制。方法　分离培养人外周血单核细胞 (PBMC) ,检测SHAP对其分泌IFN α和IFN γ的影响 ;用环磷酰胺 (Cy)建立免疫低下模型 ,检测SHAP对免疫低下小鼠血清溶血素的生成及血清IL 2水平的影响 ;用流式细胞仪分析SHAP对对乙酰氨基酚 (AAP)诱导小鼠肝损伤模型中细胞凋亡的影响 :用Fas单克隆抗体诱导小鼠暴发性肝炎和抑制肝癌细胞株SMMC772 1的增殖 ,用SHAP处理后 ,分析小鼠血清谷丙转氨酶 (GPT)的水平及SMMC772 1增殖的变化情况。结果　SHAP能够有效诱导PBMC分泌IFN α和IFN γ ,促进免疫低下小鼠血清溶血素的生成和提高血清IL 2的水平 ,显著降低AAP诱导的肝细胞凋亡。 5 0mg·L- 1的SHAP可消除 5mg·L- 1Fas单克隆抗体对SMMC772 1增殖的抑制作用。 3mg·kg- 1的SHAP能显著降低Fas单克隆抗体诱导的暴发性肝炎小鼠的血清GPT水平。结论　SHAP具有免疫调节作用和抗细胞凋亡的作用 ,可能是SHAP防治肝炎的作用机制之一。     

玉屏风多糖对佐剂性关节炎大鼠T细胞亚群的影响

目的观察玉屏风多糖(Yupingfeng Polysaccharide,YPF-P)对佐剂性关节炎大鼠T细胞亚群的影响。方法采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠AA模型。足容积法测量继发侧足肿胀度;MTT法检测刀豆蛋白(ConA)诱导的外周血淋巴细胞增殖反应;流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4+和CD8+T细胞的变化;ELISA法检测大鼠外周血中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)含量;放免法检测大鼠外周血中IL-4含量;RT-PCR法检测淋巴细胞IFN-γmRNA的表达。结果80、160mg.kg-1YPF-P给药能明显减轻关节肿胀度,不同程度地改善AA大鼠低下的外周血淋巴细胞增殖反应,明显降低CD4+/CD8+的相对比值。此外,80、160mg.kg-1YPF-P给药也能明显降低外周血IFN-γ含量和轻度提高IL-4含量,并能抑制IFN-γmRNA的表达。结论YPF-P能改善模型大鼠外周血T细胞亚群,纠正佐剂性关节炎模型大鼠Th1/Th2平衡的Th1偏移,这可能是减轻足肿胀的原因之一。     

黄芪皂苷Ⅳ对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：探讨黄芪皂苷Ⅳ（ASI）对小鼠T,B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响。方法：采用MTT法检测T,B淋巴细胞的增殖;采用分光光度计测定法检测抗体活性;IL－1活性用胸腺细胞增殖法测定;TNF－α活性用L9292细胞杀伤法测定。结果：1）ASI50－200mg/kg ig7天能够促进T淋巴细胞增殖和抗体生成,而ASI50－100mg/kg 能够促进B淋巴细胞增殖,但是200mg/kg对B淋巴细胞增殖无影响;（2）ASI体外仅在200nmol/L对T,B淋巴细胞有促进作用;（3）ASI 1nmol/L可以促进腹腔巨噬细胞分泌IL－1,而100－1000nmol/L则抑制腹腔巨噬细胞分泌IL－1;（4）ASI体外可以抑制LPS刺激或无LPS刺激下的腹腔巨噬细胞分泌TNF－α。结论：ASI能够促进小鼠T,B淋巴细胞的增殖和抗体生成,同时可以抑制腹腔巨噬细胞体内分泌IL－1和TNF－α。     

Lactococcus lactis subsp. cremoris FC triggers IFN-γ production from NK and T cells via IL-12 and IL-18

Lactic acid bacteria (LAB) benefit health as probiotics in a strain-dependent way. In this study, we investigated the immunomodulatory effects of Lactococcus lactis subsp. cremoris FC (LcFC) on dendritic cells (DCs), natural killer (NK) cells and T cells. LcFC induced the production of cytokines such as IL-10, IL-12, IL-6 and TNF-α from murine bone marrow DCs (BMDCs) via MyD88-dependent pathway. In comparison with the type strain L. lactis subsp. cremoris ATCC 19257, LcFC induced particularly high production of IL-12 while induction of IL-6 was moderate. Consequently, LcFC triggered IFN-γ production in splenic NK, CD8⁺, and CD4⁺ cells. Most prominent effect of LcFC on IFN-γ production was observed in NK cells, followed by CD8⁺ cells, which was completely inhibited by combination of neutralizing anti-IL-12 and anti-IL-18 mAbs. Moreover, oral administration of LcFC enhanced the production of IFN-γ and IL-10 from splenocytes of treated mice. These findings suggest that this LAB strain is an efficient activator of protective cellular immunity via stimulation of myeloid cells including DCs.     

丝裂霉素或顺铂对离体淋巴因子激活的杀伤细胞增殖和抗膀胱癌细 …

AIM: To study the effect of mitomycin (Mit) or cisplatin (Cis) on the proliferation of lymphokine-activated killer (LAK) cells in patients with transitional cell cancer of bladder and their cytolysis to bladder tumor cells. METHODS: LAK cell proliferation was assayed in the presence of Mit or Cis by cell counting. Bladder cancer cell lines BIU-87 and EJ were cultured as target cells and cytotoxicity of LAK cells was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. RESULTS: The proliferation of LAK cells induced by recombinant interleukin-2 (IL-2) was inhibited by Cis in a concentration-dependent manner and was decreased to 55.3% at 100 mg.L-1 compared with control at 96 h. The enhanced growth of the LAK cells was observed with Mit 5-10 mg.L-1 from 48 to 96 h. Cis 10 mg.L-1 increased the cytotoxicity against BIU-87 and EJ cells. CONCLUSION: Immunomodulatory effect of chemotherapeutic agents on LAK cell proliferation induced by IL-2 in patients with bladder cancer mainly depends on the drug itself.     

牛蒡寡糖对小鼠淋巴细胞增殖和IL-2、IFN—γ产生的影响

目的：探讨牛蒡寡糖对小鼠淋巴细胞增殖反应和IL-2、IFN-γ产生的影响。方法：取小鼠40只随机分为4组（对照组与实验组）,将牛蒡寡糖用3个不同剂量组250、500、1000mg／（kg·d）给予小鼠灌胃,对照组为0．9％NaCl溶液,连续灌胃14d后,检测小鼠淋巴细胞增殖和IL-2、IFN-γ的产生。结果：牛蒡寡糖能提高小鼠的脾淋巴细胞增殖及IL-2、IFN-γ的分泌。结论：牛蒡寡糖对正常小鼠的免疫功能具有促进作用。     

商陆多糖I对小鼠脾淋巴细胞增殖及脾淋巴细胞、巨噬细胞分泌细胞因子的影响

商陆多糖Ⅰ(Phytolacca acinosa polysaccharides Ⅰ,PAP-Ⅰ)体外能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,促进丝裂原诱导的淋巴细胞转化及双向混合淋巴细胞反应。检测PAP-Ⅰ和小鼠脾淋巴细胞培养上清液发现PAP-Ⅰ可显著促进小鼠脾淋巴细胞产生白细胞介素2(IL-2)及集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)。PAP-Ⅰ和小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液中也存在CSF活性及促进重组粒单系集落刺激因子诱导骨髓细胞增殖的细胞因子。PAP-Ⅰ,ip可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖及IL-2产生。     

淋巴细胞活性染色质诱导系统性红斑狼疮样小鼠模型

目的建立活性染色质诱导系统性红斑狼疮(SLE)样小鼠模型。方法从ConA活化的BALB/c小鼠脾淋巴细胞中提取活性染色质,分别于d 0、d 14、d 21和d 28以染色质100μg在BALB/c小鼠尾根部及背部皮内注射免疫4次,诱导SLE样小鼠模型。目测半定量尿蛋白试纸法检测动物的尿蛋白变化,HE染色法检查动物的肾脏、脾脏病理改变,计算动物的胸腺和脾脏指数,MTT法检测ConA和LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖反应,全自动生化分析仪检测血清中Crea和BUN水平,ELISA法检测小鼠血清中ANA、抗dsDNA、IgG1、IgG2a、IL-10、IFN-γ水平,流式细胞术检测脾脏T、B淋巴细胞亚群变化。结果诱导模型小鼠尿蛋白水平升高,出现肾小球肾炎、脾脏增生等病理改变;脾脏指数明显升高,LPS诱导的B淋巴细胞增殖反应增强;血清Crea、BUN、ANA、抗dsDNA、IgG1、IgG2a、IL-10和IFN-γ水平明显升高;脾脏CD19+、CD19+CD21+、CD19+CD23+、CD19+IgD+B淋巴细胞亚群百分比明显升高,CD4+CD25+T淋巴细胞百分比明显下降。结论 ConA活化淋巴细胞的染色质免疫同系BALB/c小鼠成功诱导了SLE样小鼠模型,其血清学、组织病理学及免疫学方面特征与人类SLE临床特征表现相似。     

人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应

目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR鉴定后用MTT法、Ho-echst染色和流式细胞术检测CHO细胞表达的rhIL-24诱导A549人肺腺癌细胞凋亡的抗肿瘤效应,用ELISA检测其刺激免疫细胞分泌IL-6和IFN-γ的功能。结果经双酶切和PCR鉴定,重组真核表达载体构建正确,人IL-24在CHO细胞中获得稳定表达,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549人肺腺癌细胞凋亡及上调免疫细胞表达IL-6和IFN-γ的免疫刺激活性。结论人IL-24基因的稳定表达和抗肿瘤效应的实验研究,为进一步研究人IL-24抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。