高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法对不同产地丹参中总砷和砷形态含量分析

目的：探讨不同产地丹参中总砷及砷形态的含量测定方法,为丹参药材的评价积累数据,同时为含有丹参的中药制剂的风险防控提供数据支持。方法：采用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定不同产地丹参中总砷的含量;采用高效液相色谱仪-电感耦合等离子体质谱联用法（HPLC-ICP-MS）测定不同产地丹参中6种砷形态的含量。结果：总砷在2.0～20ng?mL-1 范围内线性关系良好,标准曲线相关系数r= 0.9992,检测限（LOD）= 0.0016 ng?mL-1,加标回收率为98.3%～99.2%,RSD<3.7%（n=3）;六种砷形态在2.0～20ng?mL-1 范围内线性关系良好,标准曲线的相关系数r均>0.999,检测限（LOD）在0.0029～0.0103 ng?mL-1之间,加标回收率为89.6%～95.9%,RSD<7.7%（n=3）。采用HPLC-ICP-MS联用技术测定了不同产地丹参中六种砷形态的含量,结果表明丹参中含有少量AsB 、As（Ⅲ）,As（Ⅴ）,各产地丹参中的总砷含量虽然高,但是有毒的砷形态含量较低。结论：本法经初步方法学验证,可用于中药材及制剂中的砷含量的测定。     

高效液相色谱荧光法测定大鼠静脉注射桂利嗪的血药浓度

目的:建立大鼠血浆中桂利嗪浓度的高效液相色谱荧光检测法,并研究桂利嗪注射液在大鼠体内的药动学。方法:6只大鼠颈静脉插管给予桂利嗪注射液3mg·kg-1,于给药后5、10、20、40、60、120、240min时静脉取血,采用高效液相色谱荧光法测定血药浓度,并计算主要药动学参数。结果:桂利嗪检测浓度线性范围为10～1000ng·mL-(1r=0.9996),最低检测限为0.2ng·mL-1,平均提取回收率为95.9%～98.6%,RSD<8.6%。t1/2为(87.73±22.54)min,AUC0～240min为(58453±8672.8)ng·min·mL-1。结论:该法简便、准确、灵敏,适用于桂利嗪的药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定大补阴丸中小檗碱等4种成分含量

目的：建立同时测定大补阴丸中小檗碱、黄柏碱、毛蕊花糖苷、芒果苷的含量方法。方法：采用液质联用技术,以Agilent ZORBAX SB-C18为色谱柱,以甲醇-甲酸铵溶液为流动相,等度洗脱。结果：小檗碱、黄柏碱、毛蕊花糖苷、芒果苷的线性范围分别为5～500 ng·mL-1（r=0.9991）、0.5～50 ng·mL-1（r=0.9994）、1～100 ng·mL-1（r=0.9987）、1.5～150 ng·mL-1（r=0.9990）;加样回收率为98.35%～102.55%,RSD均＜1.60%;平均含量分别为3.55 、0.322、0.511、0.886 mg·g-1。结论：该法专属性强、快速灵敏,可用于大补阴丸中上述4种成分的含量测定。     

原子吸收分光光度法测定复方甘草片中重金属的含量

目的:建立原子吸收分光光度法测定复方甘草片中铅、镉、砷、汞、铜重金属含量的方法。方法:铅的含量采用石墨炉原子吸收法测定,检测波长为283.3nm;镉的含量采用石墨炉原子吸收法测定,检测波长为228.8nm;砷的含量采用氢化物发生-原子吸收法测定,吸收管温度为800～900℃,检测波长为193.7nm;汞的含量采用冷蒸气-原子吸收法测定,载气为氮气,检测波长为253.6nm;铜的含量采用火焰原子吸收法测定。结果:5批复方甘草片中含铅为0.332～0.587mg·kg-1,镉为0.008～0.019mg·kg-1,砷为0.095～0.189mg·kg-1,汞为0.010～0.024mg·kg-1,铜为3.987～7.769mg·kg-1。结论:经参照2005年版《中国药典》(一部)对甘草的重金属限度规定及香港特别行政区《中成药注册申请手册》有关重金属的含量限度标准规定,5批复方甘草片样品中重金属的含量均符合规定。     

UPLC-MS/MS法测定茵栀黄口服液中栀子苷与绿原酸的含量

目的：建立同时测定茵栀黄口服液中栀子苷与绿原酸含量的方法。方法：采用液质联用技术,乙腈∶5 mmol·L-1甲酸铵水溶液为流动相、等度洗脱,以Phenomenex Gemini C18色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源,正负离子同时检测,多反应监测方式。结果：栀子苷与绿原酸的线性范围分别为2.5～640 ng·mL-1(R=0.996 8)、2～512 ng·mL-1(R=0.997 7),加样回收率在97.12%～104.56%,RSD均低于3.30%。栀子苷与绿原酸在茵栀黄口服液中的平均含量分别为5.33 mg·mL-1、0.46 mg·mL-1。结论：该法专属性强、快速灵敏,可用于茵栀黄口服液中栀子苷与绿原酸的含量测定。     

原子荧光光度法测定聚乳酸中的锡

目的建立原子荧光光谱法测定聚乳酸中微量元素锡.方法采用AFS-920型双道氢化物-原子荧光光度计.结果锡的浓度在2～20ng·mL-1的范围内荧光强度与进样浓度呈良好线性关系,r=0.9996;平均回收率为102.98%,RSD=6.02%,最低检出限为0.5032ng·mL-1.结论本方法简便、准确,灵敏度高.     

维拉帕米和仙茅苷在大鼠体内药物相互作用研究

目的：研究维拉帕米联用仙茅苷之后,维拉帕米和仙茅苷在大鼠体内可能发生的药物相互作用。方法：24只雄性SD大鼠,随机分为单药组和联用药组,单药组灌胃仙茅苷20 mg· kg-1,联用药组灌胃维拉帕米和仙茅苷,其给药剂量分别为10 mg·kg-1和20 mg·kg-1。在不同时间点取血,采用LC-MS测定仙茅苷的的血药浓度,计算并比较仙茅苷的药代动力学参数。结果：与单药组相比,联用药组仙茅苷药代动力学参数发生明显变化,其中仙茅苷最大血药浓度从189.13 ng·mL-1增加到277.53 ng·mL-1,血浆曲线下面积从949.18 ng·h·mL-1增加到1728.08 ng·h·mL-1。结论：维拉帕米联合仙茅苷用药之后,维拉帕米能明显增强仙茅苷在大鼠体内的血药浓度。     

药材无名异中重金属的测定及可溶性砷形态分析

利用滴定法、电感耦合等离子体发射光谱仪法（ICP-OES）和离子色谱联用电感耦合等离子体质谱法（IC-ICP-MS）对无名异药材中MnO2及Pb、Cd、As、Hg、Cu进行测定,并对其可溶性砷的形态进行研究。测得7批无名异药材中的MnO2含量为12.18%~21.31%;7批无名异药材中Pb为277.5~1580 mg·kg-1、Cd为1.075~221.0 mg·kg-1、As为44.85~368.5 mg·kg-1、Hg为0.242~0.585 mg·kg-1、Cu为63.75~174.0 mg·kg-1;通过形态分析测得无名异中可溶性砷均为As（Ⅴ）,含量为7.676~65.75 mg·kg-1。本文建立的分析方法可简便快速地测定无名异药材中的主成分MnO2及Pb、Cd、As、Hg、Cu,并对其可溶性As的形态进行分析,可为无名异药材的质量控制提供有效的依据。     

电感耦合等离子体质谱法测定五味治肝片中的12种元素含量

目的:测定中成药中有害元素的含量,为中成药质量安全控制提供依据。方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法。射频功率1350W,采样深度8.5mm,等离子气流速15L·min-1,辅助气(高纯氩气)流速1.0L·min-1,载气(高纯氩气)流速1.14L·min-1,雾化室冷却温度1℃,雾化器为Babington,样品提升速度为0.40L·min-1。检测五味治肝片中镉、砷、铬、铜、锡、铅、锑、镍、银、锰、钡、锌元素的含量。结果:镉、砷、铬、铜、铅、锑、镍、银、锰、钡、锌检测浓度线性范围均为0.500～20.00ng·mL-1(r=0.9993～1.000),锡为0.500～10.00ng·mL-1(r=0.9998);各元素的加样回收率为95.0%～105.0%,RSD为0.3%～8.0%;样品中检出除锑、银外的所有元素,其中镉、砷、铬、铜、铅的含量均在2010年版《中国药典》规定的中药材限量范围内。结论:五味治肝片中部分元素的含量均能达到要求,但多数元素含量无相应的限量标准,锡、银、锑、镍等有害元素暂无国家限量标准,制定我国中药及其制剂中元素限量的标准具有重要意义。     

HPLC-ICP/MS联用测定滑石粉中6种砷形态化合物

摘要：目的:建立一种高效液相色谱联用电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP/MS）测定滑石粉中亚砷酸根[As（Ⅲ）]、砷酸根[As（Ⅴ）]、一甲基砷（MMA）、二甲基砷（DMA）、砷甜菜碱（AsB）和砷胆碱（AsC）共6种砷形态化合物的方法。方法:样品采用0.15 mol·L-1硝酸溶液热水浴振荡提取,CNW Sep AX阴离子交换色谱柱（4 mm×250 mm, 10μm）,0.025 mol·L-1磷酸二氢铵-水梯度洗脱,ICP-MS检测分析。结果:6种砷形态化合物在1～100μg·L-1浓度范围内线性关系良好,r均>0.997;加标回收率在97.7%～99.5%之间,RSD为2.3%～4.1%（n=9）。结论:本法灵敏度高,重现性好,适用于滑石粉中6种砷形态化合物的测定,试验表明药用滑石粉中检出毒性较大的As（Ⅲ）和[As（Ⅴ）],应关注其无机砷风险。     

成骨细胞的功能与损伤和骨质疏松的防治

骨质疏松是一种全身性骨骼疾病,导致骨折风险增加。成人的骨量通过破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成作用来维持动态平衡,治疗骨质疏松症的理想策略是抑制破骨细胞的骨吸收和/或增强成骨细胞的骨形成功能。目前针对保护成骨细胞及增强其功能的骨质疏松疗法相对较少。因此,本文针对成骨细胞相关功能蛋白、各种细胞损伤机制（内质网应激、氧化应激、机械过载、微小RNA和长链非编码RNA的影响等）及骨质疏松的治疗与预防作一综述,以期为针对增强成骨细胞功能的骨质疏松治疗策略提供新思路。     

CD44与肿瘤侵袭、转移及预后的关系

CD44是一种跨膜受体蛋白 ,属于黏附分子家族 ,可与透明质酸等配体结合 ,介导细胞与细胞、细胞与基质之间的黏附。近年来发现CD44及其变异体在许多肿瘤细胞中异常表达 ,且与肿瘤的发生发展及患者的预后存在着一定的关系 ,因此 ,可作为一个辅助性指标预测肿瘤的发展情况     

PTEN和DNA含量与非小细胞肺癌侵袭转移的关系探讨

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中抑癌基因PTEN的表达和DNA含量与NSCLC侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP方法检测PTEN在78例肺癌标本中的表达,并用流式细胞术检测30例肺癌标本中DNA含量.结果:肺癌标本中PTEN蛋白总缺失率为42.3%,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组肺癌表达缺失率分别为52.1%和26.7%(P＜0.05),其表达缺失率随TNM分期增加而上升,分期越晚表达缺失率越高.PTEN缺失率高者生存时间短.DNA指数(DI)的分布范围在1.04～1.93.异倍体肿瘤24例,DI值随TNM分期增加而增加(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关.结论 肺癌组织中PTEN的表达与肺癌淋巴结转移有显著相关性,肺癌细胞DNA含量与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.检测PTEN蛋白表达和DNA含量将有助于判断肺癌的转移及预后.     

Comparison of formation of thiolactones and active metabolites of prasugrel and clopidogrel in rats and dogs

1. Prasugrel and clopidogrel are antiplatelet prodrugs that are converted to their respective active metabolites through thiolactone intermediates. Prasugrel is rapidly hydrolysed by esterases to its thiolactone intermediate, while clopidogrel is oxidized by cytochrome P450 (CYP) isoforms to its thiolactone. The conversion of both thiolactones to the active metabolites is CYP mediated. This study compared the efficiency, in vivo, of the formation of prasugrel and clopidogrel thiolactones and their active metabolites.

2. The areas under the plasma concentration versus time curve (AUC) of the thiolactone intermediates in the portal vein plasma after an oral dose of prasugrel (1 mg kg^?1) and clopidogrel (0.77 mg kg^?1) were 15.8 ± 15.9 ng h ml^?1 and 0.113 ± 0.226 ng h ml^?1, respectively, in rats, and 454 ± 104 ng h ml^?1 and 23.3 ± 4.3 ng h ml^?1, respectively, in dogs, indicating efficient hydrolysis of prasugrel and little metabolism of clopidogrel to their thiolactones in the intestine.

3. The relative bioavailability of the active metabolites of prasugrel and clopidogrel calculated by the ratio of active metabolite AUC (prodrug oral administration/active metabolite intravenous administration) were 25% and 7%, respectively, in rats, and 25% and 10%, respectively, in dogs.

4. Single intraduodenal administration of prasugrel showed complete conversion of prasugrel, resulting in high concentrations of the thiolactone and active metabolite of prasugrel in rat portal vein plasma, which demonstrates that these products are generated in the intestine during the absorption process.

5. In conclusion, the extent of in vivo formation of the thiolactone and the active metabolite of prasugrel was greater than for clopidogrel’s thiolactone and active metabolite.