异硫氰酸苯乙酯对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用及机制研究

目的探讨异硫氰酸苯乙酯诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法以不同浓度异硫氰酸苯乙酯处理人乳腺癌MCF-7细胞,应用MTS法观察异硫氰酸苯乙酯对MCF-7细胞的抑制率,流式细胞术检测异硫氰酸苯乙酯对细胞凋亡、细胞周期以及活性氧表达的影响。结果将不同浓度的异硫氰酸苯乙酯作用于MCF-7细胞72h后,抑制了MCF-7细胞的增殖,其IC50为15.2μmol.L-1;以10和20μmol.L-1的异硫氰酸苯乙酯作用MCF-7细胞24h后,细胞出现凋亡现象,细胞周期阻滞在G2/M期,并造成细胞氧化损伤。结论异硫氰酸苯乙酯能够促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,影响细胞周期,其作用机制可能与异硫氰酸苯乙酯可造成肿瘤细胞氧化损伤有关。     

硫代葡萄糖苷及异硫氰酸酯的抗癌和抗氧化作用进展

目的为硫代葡萄糖苷及异硫氰酸酯的合理利用、功能性保健产品开发和抗癌辅助药物的研制提供依据。方法归纳总结近10年硫代葡萄糖苷和异硫氰酸酯的文献,对其在植物体的分布、理化性质、抗癌和抗氧化机制等方面进行详细阐述。结果硫代葡萄糖苷及其水解产物异硫氰酸酯具有良好的抗癌和抗氧化活性,可以预防和治疗多种癌症,对于由空气污染引发的呼吸系统及肺部疾病也具有良好的疗效;硫代葡萄糖苷及异硫氰酸酯可以清除血管和机体的自由基,保护心脑血管,延缓衰老。结论硫代葡萄糖苷及异硫氰酸酯开发成功能性保健产品和抗癌辅助药具有广阔的市场前景。     

异硫氰酸苄酯抑制人胶质瘤U87MG细胞体外侵袭和诱导凋亡的作用和机制

目的 研究异硫氰酸苄酯对人胶质瘤U87MG细胞体外侵袭和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法 采用MTS实验考察异硫氰酸苄酯对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用;2,5 μmol·L^-1异硫氰酸苄酯作用24 h后,采用Transwell实验、黏附实验和划痕实验观察异硫氰酸苄酯对人胶质瘤细胞侵袭、黏附和迁移能力的影响;应用Real-time-PCR和Western blot法检测相应浓度异硫氰酸酯处理后人胶质瘤U87MG细胞中MMP-2、MMP-9、CD44、Survivin、Bcl-2、Net1、RohA、caspase-3、caspase-8和p-AKT的表达变化;应用报告基因技术检测NF-κB转录活性的变化;采用ELISA法测定胞内8-OH-dG含量;10,20 μmol·L^-1异硫氰酸酯作用24 h后,采用流式细胞术观察其对细胞凋亡的作用。结果 异硫氰酸苄酯可显著抑制人胶质瘤U87MG细胞体外增殖;与0 μmol·L^-1组相比,2,5 μmol·L^-1异硫氰酸苄酯对人胶质瘤细胞U87MG侵袭、黏附和迁移能力有明显的抑制作用;不同浓度异硫氰酸苄酯处理后,肿瘤细胞MMP-2、MMP-9、CD44、Survivin、Bcl-2、NET1和RhoA的mRNA和蛋白表达、AKT磷酸化水平和NF-κB转录活性明显下调,caspase-3和caspase-8表达以及8-OH-dG含量显著上调;10,20 μmol·L^-1异硫氰酸苄酯可显著诱导细胞凋亡。结论 异硫氰酸苄酯抑制人胶质瘤细胞U87MG的侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号转导途径,进而调节侵袭和凋亡相关基因表达有关。     

超高效液相色谱法测定大鼠血浆中异硫氰酸烯丙酯含量及药动学参数

目的:建立大鼠血浆中异硫氰酸烯丙酯含量测定的UPLC法,并用该法研究大鼠静脉注射异硫氰酸烯丙酯后的药动学。方法:大鼠血浆样品,采用乙腈沉淀蛋白分析。色谱柱:BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相:甲醇-水(60∶40);流速0.2 mL·min-1;柱温30℃;紫外检测波长247 nm;大鼠静脉注射异硫氰酸烯丙酯20 mg·kg-1后,于不同时间点取血测定血浆中药物浓度并估算其药动学参数。结果:异硫氰酸烯丙酯在0.156～40.0μg·mL-1范围内,其线性关系良好,r=0.998 9,定量下限为0.156μg·mL-1,提取回收率为91.34%。大鼠静脉注射20 mg·kg-1异硫氰酸烯丙酯后其消除半衰期为77.36 min。结论:本方法灵敏度高,操作简便、快速、准确,可用于大鼠血浆中异硫氰酸烯丙酯的测定及药动学研究。     

GC-MS分析新疆芜菁子中挥发油的化学成分

目的 分析新疆芜菁子中挥发油的化学成分.方法 采用水蒸气蒸馏法提取芜菁子中的挥发油,用GC-MS分析其化学成分.结果 共分离出25个峰,鉴定出了23种成分,占挥发油总成分的98%以上.主要组分为异硫氰酸-3-丁烯酯(22.98%)、3-甲基-3-丁烯腈(21.29%)、5-甲硫基戊腈(10.07%)、2,3-二甲基-2-丁烯二酸(9.82%)、异硫氰酸丁酯(9.39%)、异硫氰酸烯丙酯(8.19%).结论 所提取的挥发油中含有异硫氰酸酯、羧酸、羧酸酯、腈类、少量醛和萜类等化合物.     

芜菁子中异硫氰酸丙烯酯的薄层色谱鉴别和含量测定

目的建立芜菁子中异硫氰酸丙烯酯的薄层色谱鉴别及HPLC法测定其含量的方法。方法采用硅胶H薄层板,以甲苯-乙酸乙酯(3∶1)为展开剂,鉴别芜菁子中的异硫氰酸丙烯酯。采用依利特惠杰型C_(18)柱(150mm×4.6mm,5μm);甲醇(A)-水(B)梯度洗脱(0~60min,60%~80%A);流速为1.0mL·min~(-1);检测波长为257nm;测定不同地区芜菁子中异硫氰酸丙烯酯的含量。结果 TLC图谱中可见异硫氰酸丙烯酯,斑点清晰,重复性好;含量测定中,异硫氰酸丙烯酯质量浓度在0.548 8~3.841 6μg·mL~(-1)范围内,线性关系良好,回收率为97.9%,RSD值为3.8%。结论该方法操作简便、结果准确、重复性好,可作为芜菁子定性、定量的质量控制方法。     

异硫氰酸-2,6-二甲苯酯的合成

异硫氰酸-2,6-二甲苯酯(1)是合成兽用麻醉药赛拉嗪(Xylazine,Rompun)的主要原料之一,也是某些合成药的中间体。我们经过摸索,参照合成异硫氰酸-α-萘酯的类     

GC法同时测定维药芜菁子中4种异硫氰酸酯类化合物的含量

目的:建立同时测定维药芜菁子中异硫氰酸酯类化合物含量的方法。方法:采用水蒸气蒸馏法提取芜菁子中的异硫氰酸酯,以异辛醇为内标物,利用气相色谱法分析异硫氰酸酯类化合物的组成并测定其含量。结果:芜菁子中含有4种异硫氰酸酯类化合物,分别为异硫氰酸苯乙酯(14.20%)、异硫氰酸叔丁酯(0.47%)、异硫氰酸异丙酯(0.29%)和异硫氰酸烯丙酯(5.10%)。4种化合物的进样量线性范围依次为10.06～50.30μg(r=0.9996)、0.25～1.26μg(r=0.9995)、2.83～14.15μg(r=0.9989)、3.34～16.72μg(r=0.9986);平均加样回收率分别为99.2%、100.2%、97.8%、98.2%,RSD分别为1.3%、1.9%、2.3%、2.1%(n均为9)。结论:本方法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可用于芜菁子的质量控制。     

顶空固相微萃取 - 气相色谱 - 质谱联用分析白芥子挥发性化学成 分简

目的 分析检测白芥子中挥发性成分的组成.方法 首先采用顶空固相微萃取（HS-SPME）技术萃取白芥子中的挥发性成分,再用气相色谱-质谱（GC-MS）技术对其挥发性成分进行分析鉴定.结果 从白芥子中共分离出37个色谱峰,鉴别出其中25个成分,占挥发性成分总量的81.15％.其主要化学成分为异硫氰酸烯丙酯（15.85％）、茴香脑（6.75％）、1-环丙基丙烷（5.98％）、苯并噻唑（3.87％）、巴豆腈（3.57％）、异硫氰酸环己酯（2.81％）等.结论 采用HS-SPME-GC-MS联用技术能快速全面获得白芥子挥发性成分的组成信息,为其进一步研究提供科学依据.     

科研技术简讯

S056 异硫氰酸芳酯的新合成PAK CS等〔Synthesis,(11):969～970 1982〕 N-芳香二硫代氨基甲酸甲酯(1)在较温和条件下,经碱催化裂解制得异硫氰酸芳酯(2)。收率佳,操作简便。     

海藻酸盐敷料止血作用及生物相容性研究

摘要：目的 研究海藻酸盐敷料的止血性能,并初步探究其生物相容性。方法 采用凝血指数试验测定体外凝血性能。采用新西兰兔耳和背部创伤止血试验测定止血性能。采用溶血试验和细胞毒性试验进行初步安全性评价。结果海藻酸盐敷料、明胶海绵的凝血指数BCI分别为33.1±4.9、72.0±3.3,海藻酸盐敷料凝血效果优于明胶海绵。在背部创伤出血模型中,海藻酸盐敷料、明胶海绵、纱布的平均止血时间为（55.3±5.1）s、（80.2±7.4）s、（101±14.7）s,Hb光度吸收值分别为1.5±0.7、2.5±0.5、3.8±0.7。与明胶海绵比较,海藻酸盐敷料的平均止血时间缩短了31.05%,Hb光度吸收值降低了40.00%;与纱布比较,海藻酸盐敷料的平均止血时间缩短了45.25%,Hb光度吸收值降低了60.53%。在兔耳动脉止血实验中,海藻酸盐敷料、明胶海绵、纱布的出血量分别为（2.4±0.2）g、（3.0±0.2）g、（3.9±0.2）g,止血时间分别为（226.3±6.5）s、（332.3±14.2）s、（466.5±19.1）s。与明胶海绵组比较,海藻酸盐敷料的出血量降低了20.00%,止血时间分别为缩短了31.90%;与纱布比较,海藻酸盐敷料的出血量降低了38.46%,出血时间缩短了51.49%。海藻酸盐敷料的溶血率低于5%。细胞毒性实验中各浓度的海藻酸盐敷料浸提液为0级或1级,提示其对细胞无明显毒性。结论 海藻酸盐敷料具有良好的止血效果,溶血率符合国标要求,且对皮肤成纤维细胞无细胞毒性。     

用Cu-PAN系统作EDTA对钙、钡、镁、铝、铬、锌、铁、铅、铋、汞、铜等化合物的测定

本文重新研究了EDTA絡合量法中用Cu-PAN系統滴定Ca⁺⁺,Ba⁺⁺,Mg⁺⁺,Al⁺⁺⁺,Cr⁺⁺⁺,Zn⁺⁺,Fe⁺⁺⁺,Pb⁺⁺⁺,Bi⁺⁺⁺,Hg⁺⁺,Cu⁺⁺等的pH、溫度、指示剂用量等条件,测定准确度为1%.建立了用Cu-PAN系統滴定鉻盐及鋇盐的方法,測定終点較用鉻黑T指示剂明显.測定了Cu-PAN絡合物的組成为1:1,稳定常数为:pH2,1.4×10⁶;pH4,1.9×10⁶;pH 6,1×10⁵;pH 8,7.5×10⁴;pH 10,2.1×10⁵.根据这些結論,改进了Cu-PAN系統的滴定方法。     

纳米锰锌铁氧体颗粒对L-02细胞的氧化损伤作用

目的 探讨磁性锰锌铁氧体纳米颗粒(Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄)对人肝细胞株L-02的毒性作用机制。方法 Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄ 800 mg·L^-1作用L-02细胞48 h,透射电镜观察细胞形态及超微结构的变化。Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄ 200, 400和800 mg·L^-1作用48 h后,检测L-02细胞内丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;荧光染色观察凋亡细胞形态;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;荧光定量PCR仪检测胱天蛋白酶3 mRNA表达。结果 Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄ 800 mg·L^-1作用48 h后,纳米颗粒进入细胞内,细胞膜发生破损,细胞器消失,染色体异常聚集。与正常对照组比较,Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄ 200~800 mg·L^-1使细胞内MDA含量逐渐升高,SOD与GSH活性逐渐降低(P<0.05)。Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄可使细胞周期发生改变,G₀/G₁期细胞百分率有降低的趋势,S期和G₂/M期细胞百分率有升高的趋势。Hoechst33258显示明显的细胞凋亡形态。Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄可引起L-02细胞发生剂量依赖性的细胞凋亡,Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄ 800 mg·L^-1作用48 h后,细胞凋亡率达到30.3%,是对照组细胞凋亡率(2.4%)的12.6倍。胱天蛋白酶3 mRNA表达量先增加后降低,但都明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄可破坏细胞膜完整性并进入细胞内,诱导细胞发生氧化应激,改变细胞周期,引发细胞凋亡,产生细胞毒性。     

^131I—CD44V6胃癌单抗放射免疫显像的初步研究

目的 探讨CD44V6单抗与胃癌转移模型的结合能力。方法 采用^131I标记CD44V6单抗,对裸鼠的胃癌转移模型进行放射免疫显像研究。结果 ^131I-CD44V6单抗成功地在裸鼠转移瘤内积聚并在96小时后清晰显像。结论 CD44V6单抗可与胃癌转移灶特异性结合,未来可作为胃癌转移灶放射免疫显像及治疗的导向载体。     

EFFECTS OF THE OPIOID PEPTIDES [MET5]ENKEPHALIN-ARG6-PHE7 AND [MET5]ENKEPHALIN-ARG6-GLY7-LEU8 ON CHOLINERGIC NEUROTRANSMISSION IN THE RABBIT ISOLATED ATRIA

1. The effect of the opioid peptides [Met5]enkephalin-Arg6-Phe7 (MEAP) and [Met5]enkephalin-Arg6-Gly7-Leu8 (MEAGL) were compared with those of [Leu5]enkephalin and [D-Ala2,Met5]enkephalinamide (DAME) on cholinergic neurotransmission in the rabbit isolated atria. 2. Rabbit isolated atria had a resting rate of 190 beats/min. In the presence of the beta-adrenoceptor antagonist propranolol (0.3 mumol/l), atria responded to electrical field stimulation with a cholinergically mediated negative chronotropic response. The opioid peptides had no effect on the resting rate, but inhibited the negative chronotropic response to field stimulation. The IC50 values for inhibiting the cholinergic responses were 1.4 mumol/l for [Leu5]enkephalin (LE), 1.4 mumol/l for MEAP, 1.3 mumol/l for MEAGL and 0.2 mumol/l for DAME. Responses of a similar magnitude to exogenous acetylcholine were unaffected. 3. Thus, MEAP, MEAGL and LE had similar potencies but DAME was about seven times more potent in inhibiting cholinergic neurotransmission in the rabbit isolated atria. The site of inhibition appears to be prejunctional.     

INTERACTIONS OF Na+, H2O2 AND THE Na+-Ca2+ EXCHANGER STIMULATE Ca2+ RELEASE IN CK1.4 CELLS

1. The present study aimed to demonstrate that interactions of cations, hydrogen peroxide (H₂O₂) and the Na⁺-Ca²⁺exchanger stimulate Ca²⁺ release and oscillations of cytosolic Ca²⁺ [Ca²⁺]i in non-transfected Chinese Hamster Ovary (CHO) C1 cells and in transfected CHO (CK1.4) cells that contained an expression vector coding the Na⁺-Ca²⁺ exchanger sequence. 2. The [⁴⁵Ca²⁺] uptake assay, fura-2 fluorescence imaging and 2² and 2³ factorial orthogonal statistics provide comparative, direct, efficient, quantitative and transient methods to delineate the effects of such interactions on Ca²⁺ influx, Ca²⁺release and [Ca²⁺]i in C1 and CK1.4 cells. 3. In contrast to the control of either Na⁺-, Ca²⁺- or H₂O₂-free or CI cells, an elevated [⁴⁵Ca²⁺] uptake was induced by Ca²⁺, Na⁺ and H₂O₂ individually and in combination, intracellular Ca²⁺ release was activated by H₂O₂ and by combinations of either H₂O₂ and Na⁺, H₂O₂ and the Na⁺-Ca²⁺ exchanger, Na⁺ and the Na⁺-Ca²⁺ exchanger or by H₂O₂, Na⁺ and the Na⁺-Ca²⁺ exchanger and a rise in [Ca²⁺]i was triggered by H₂O₂, Na⁺ and a combination of Na⁺ and the Na⁺-Ca²⁺exchanger. 4. These results indicate that interactions between H₂O₂, Na⁺ and the Na⁺-Ca²⁺ exchanger stimulate intracellular Ca²⁺mobilization via Ca²⁺-induced Ca²⁺ release mechanisms, ATP-activated G-protein coupled P_2y-purinoceptor-sensitive pathways, Na⁺-Ca²⁺ exchanger-mediated Ca²⁺ influx and cation-π interaction (a strong non-covalent force between the cation and the π face of an aromatic structure in the transmembrane protein). 5. The present findings provide important clues for understanding Ca²⁺ signal transduction mechanisms from the plasma membrane to the endoplasmic reticulum.     

不同剂量IVIG对川崎病患儿CD4^＋／CD8^＋的影响

目的研究不同剂量免疫球蛋白(IVIG)对川崎病急性期治疗前后CD4+/CD8+功能平衡的影响.方法采用流式细胞仪检测A、B两组川崎病患儿治疗前及治疗后4天CD4+、CD8+的值.结果治疗前A、B两组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+无显著差异(P＞0.05),治疗后B组与对照组有显著差异,A组与对照组差异无显著性;A组退热时间比B组明显缩短(P＜0.01).结论川崎病患儿急性期,IVIG 2 g/kg一次输入对CD4+/CDs+功能失衡能迅速纠正,缩短发热时间.     

In vitro antiviral activity of polyoxomolybdates. Mechanism of inhibitory effect of PM-104 (NH4)12H2(Eu4(MoO4(H2O)16(Mo7O24)4) · 13H2O on human immunodeficiency virus type 1

A screening for inhibitors of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) among various types of isopolyoxomolybdates and heteropolyoxomolybdates was carried out by using an in vitro assay system measuring the cytopathogenicity of HIV-1 in CD4⁺ human MT-4 cells. A novel heteropolyoxomolybdate named PM-104 with the chemical formula (NH₄)₁₂H₂(Eu₄(MoO₄)(H₂O)₁₆(Mo₇O₂₄)₄) · 13H₂O was found to be associated with potent anti-HIV-1 activity.

PM-104 interferes with virus infection at a very early step such as adsorption and/or penetration into the cells. In addition to the cytopathic effect of HIV-1 on MT-4 cells, syncytium formation between mock-infected MOLT-4 cells and MOLT-4 cells chronically infected with either HIV-1 or HIV-2 is suppressed by PM-104. PM-104 also blocks the replication of herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and type 2 (HSV-2). The antiviral properties of PM-104 could be attributed to the combined effect of europium atoms and its peculiar three-dimensional anion structure.     

3-去酮双氢甲基睾丸素的药理

3-去酮双氢甲基睾丸素(17α-甲基-5α-雄甾烷-17β-羟基,简称3-去酮HMT)系一蛋白同化作用较强的同化类固醇.本文研究了其某些药理作用,结果如下:(1)3-去酮HMT促进去势小鼠提肛肌海绵球肌和肾脏重量以及该两种组织内RNA含量的增加.(2)3-去酮HMT似无糖皮质激素样作用,同时也不增强或对抗皮质素的抗炎作用.(3)3-去酮HMT可显著降低饲喂含胆固醇饲料的大鼠肝胆固醇含量,而对血胆固醇水平无明显影响.(4)给小鼠注射乙硫氨酸和四氯化碳可引起脂肪肝,3-去酮HMT能对抗乙硫氨酸和四氯化碳的这一作用.(5)预先给予3-去酮HMT,雌大鼠戊巴比妥钠睡眠时间显著缩短,但对二乙基巴比妥钠睡眠时间无明显影响.由此认为,3-去酮HMT可能具有刺激肝脏药物转化酶的作用.     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定地龙中4个黄曲霉毒素

目的:建立同时测定地龙中4个黄曲霉毒素含量的高效液相色谱串联质谱法。方法:样品经甲醇-水(80∶20,v/v)提取,通过免疫亲和柱净化后,采用高效液相色谱串联质谱法测定其中4个黄曲霉毒素的含量,以多反应监测(MRM)方式分别监测离子对m/z 313→241(黄曲霉毒素B1,CE 50 eV),m/z 315→259(黄曲霉毒素B2,CE 43 eV),m/z 329→243(黄曲霉毒素G1,CE 38 eV)和m/z 331→245(黄曲霉毒素G2,CE 40 eV)。结果:黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测限分别为0.03,0.02,0.03,0.02μg.kg-1,回收率在88.0%～100.3%范围内,RSD均低于6.1%。结论:该方法快速、灵敏,结果准确,适用于地龙中4个黄曲霉毒素的同时检测。