ω-3多不饱和脂肪酸促进1型糖尿病模型小鼠胰岛β细胞再生的作用研究

目的 探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFAs)促进胰岛α细胞向β细胞转分化的作用。方法 在小鼠胰岛α细胞系αTC1培养基中添加不同配比的ω-3 PUFAs, 4周后，利用荧光染色观察胰岛素和胰高血糖素的表达，并通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胰岛α细胞和胰岛β细胞特异性基因表达情况。野生型(WT)组和mfat-1转基因组小鼠连续5天腹腔注射60 mg·kg^-1链脲佐霉素(streptozocin, STZ)。选取注射STZ 7周后的WT小鼠，给予97%EPA和75%鱼油(50%EPA和25%DHA)饮食干预，每周检测随机血糖。8周后，通过免疫荧光染色观察小鼠胰腺中胰岛β细胞再生情况。结果 在DHA与EPA混合液培养以及与单独EPA培养后，胰岛α细胞可分泌胰岛素，而对照组细胞没有胰岛素染色阳性；qRT-PCR结果显示，经过ω-3 PUFAs处理的细胞中，胰岛β细胞特异性基因明显上调。注射STZ后，mfat-1组和饮食干预组小鼠不仅随机血糖水平明显低于WT组，而且免疫荧光结果显示mfat-1组和饮食干预组小鼠胰岛中出现胰岛素和胰高血糖素共定位的细胞。结论...     

狼疮方-2与强的松治疗BXSB小鼠的实验研究

目的研究中药复方狼疮方二号(LCF-2)与强的松对BXSB狼疮鼠体重、死亡率及脾脏T淋巴细胞亚群的影响,探讨中、西药对狼疮小鼠的作用机制。方法将BXSB狼疮鼠随机分成4组:空白对照组、中药组、西药组、中西药合用组。采用动态观察方法测定小鼠体重变化,死亡率;间接免疫荧光法测定小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的阳性率;结果(1)LCF-2组及中西药合用组小鼠体重增长明显,与空白对照组比较有显著差异(P<0.05);(2)中药组死亡率为0,与空白对照组有明显差异(P<0.05),中西药组死亡率虽很低,但与空白对照组比较统计学无明显差异;(3)中药与中西药组对CD3 、CD4 、CD8 以及CD 4/CD 8T细胞均有显著的上调作用,而西药组对CD4 和CD4 /CD8 T细胞有明显的下调作用,对CD3 、CD8 T细胞作用不明显。结论中药复方LCF-2与强的松均对BXSB狼疮小鼠有明显的治疗作用,但二者对淋巴细胞的调节作用各有差异。     

当归多糖组分AP-3对不同淋巴细胞亚群的作用

目的观察当归多糖组分AP-3对不同淋巴细胞亚群的作用。方法免疫磁珠法制备T、B细胞亚群;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞术观察CD4+T细胞亚群比例的变化。结果在30~300μg/ml范围内,AP-3能显著促进小鼠脾淋巴细胞、巨噬细胞、混合淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖反应,而对B细胞增殖有一定的抑制作用;显著增加培养的脾细胞中CD4+T细胞亚群的比例。结论当归多糖具有独特的免疫调节特性,活化巨噬细胞、T细胞以及辅助性T细胞(Th细胞),但对B细胞有一定的抑制作用。     

儿童系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞亚群与疾病活动的研究

目的探讨儿童系统性红斑狼疮(SLE)患儿外周血中淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法采用流式细胞术检测59例SLE患儿及52名健康对照组患儿的外周血淋巴细胞亚群T细胞、B细胞、Th细胞、Tc细胞、NK细胞和总淋巴细胞数,并对结果进行比较,同时分析SLE患儿外周血淋巴细胞亚群与SLE疾病活动指数(SLEDAI)的相关性及其与狼疮肾炎、补体的相关关系。结果与健康对照组相比,SLE患儿Th细胞和Th百分比、NK细胞和NK细胞百分比及Th/Tc比值明显降低,而B细胞百分比、Tc细胞百分比增高,差异均有统计学意义(P<0.05);SLE患儿B细胞与SLEDAI评分呈正相关,NK细胞百分比与SLE评分呈负相关(P<0.05);狼疮肾炎组患儿的T细胞、Tc细胞计数和Tc细胞百分比均明显高于无狼疮肾炎的患儿,而狼疮肾炎组患儿Th细胞百分比、Th/Tc比值和NK细胞、NK细胞百分比明显低于无狼疮肾炎的患儿(P<0.05);补体降低组患儿的B细胞和B细胞百分比及SLEDAI评分均明显高于补体正常组(P<0.05)。结论 SLE患儿外周血淋巴细胞亚群存在异常,淋巴细胞亚群与SLEDAI评分、狼疮肾炎和补体之间存在显著的相关性,表明淋巴细胞亚群可能反映SLE患儿病情的严重程度。     

ω-3多不饱和脂肪酸对脓毒血症患者免疫功能及预后的影响

目的 探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFAs)对脓毒血症患者免疫功能及预后的影响.方法 72例脓毒血症患者分为常规全胃肠道外营养(TPN)组、ω-3鱼油脂肪乳组,各36例,2组均给予静脉营养支持,ω-3鱼油脂肪乳组在上述基础上加用ω-3鱼油脂肪乳(主要成分为ω-3PUFAs).治疗前及治疗5 d后分别检测外周血CD4+CD25+调解T淋巴细胞(Treg)、CD4+和CD8+T淋巴细胞、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)等.结果 ω-3鱼油脂肪乳组患者治疗后与常规TPN组比较,CD8+T淋巴细胞、CD4+CD25+Treg细胞比例明显降低,CD4+T淋巴细胞、CD4+/CD8+明显升高,血浆TNF-α和IL-10水平及IL-10/TNF-α比值明显降低(均P＜0.05).随访30 d,常规TPN组6例(16.7%)死亡,ω-3鱼油脂肪乳组3例(8.3%)死亡,2组病死率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ω-3PUFAs可增强脓毒血症患者机体免疫功能,调节促、抗炎因子的平衡,并改善预后.     

银杏叶提取物对小鼠免疫功能的影响

目的:了解银杏叶提取物对小鼠免疫功能的影响。方法:采用体外抗体形成细胞检测法检测银杏叶提取物对小鼠脾细胞产生抗体的影响;采用间接免疫荧光法测定银杏叶提取物对小鼠CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的影响;采用3 H-TdR掺入法检测银杏叶提取物对小鼠淋巴细胞转化活性的影响。结果:银杏叶提取物有促进小鼠体液免疫功能的作用(P<0.01);能通过调整CD4+/CD8+T细胞亚群的比值来增强小鼠免疫功能(P<0.05);能增加小鼠淋巴细胞转化活性(P<0.001)。结论:银杏叶提取物能增强小鼠免疫功能。     

人参二醇组皂苷提取物对再生障碍性贫血小鼠免疫调节作用的研究

目的观察自行提取分离的中药新药人参二醇组皂苷提取物(PDS-C)对再生障碍性贫血(再障)小鼠促进造血和调节免疫的作用。方法 BALB/c小鼠经亚致死量照射后输入DBA/2小鼠的淋巴细胞,制成免疫介导型再障模型。实验分6组,正常小鼠、模型组、PDS-C低、中和高剂量治疗组及环孢素阳性药物对照组,均灌胃给药15 d。检测外周血象、骨髓病理检查造血组织增生状况、脾脏T细胞亚群比例,及T细胞分化相关T-bet、GATA-3和FOXP3转录调控蛋白的表达水平。结果 PDS-C治疗再障小鼠的疗效明显,中、高剂量组的外周血红蛋白、白细胞和血小板计数均明显高于模型组,骨髓造血组织增生状况也明显优于模型组。PDS-C升高Th2细胞和调节性T细胞(Treg)的比例,降低Th1细胞比例,并上调GATA-3和FOXP3蛋白及下调T-bet蛋白的表达。结论 PDS-C有效地促进造血,改善再障的骨髓抑制,加快造血功能恢复而升高外周血象;同时通过恢复再障小鼠失衡的Th1/Th2/Treg细胞比例而参与调节免疫,该文为PDS-C的临床应用提供实验依据。     

肺癌患者外周血T、B淋巴细胞及NK细胞的检测

目的探讨肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞和B细胞与免疫状态的关系。方法采用流式细胞仪分别检测20例肺癌患者和20例正常人外周血T、B淋巴细胞及NK细胞,并对两者进行比较。结果肺癌患者CD3 、CD4 、CD16 56 均低于正常组(P<0.01),CD8 高于正常组(P<0.01),CD19 与正常组相比差异无显著性(P>0.05)。结论肺癌患者免疫功能普遍低下,检测T淋巴细胞亚群、B细胞、NK细胞可用于肺癌患者的免疫监测。     

过敏性紫癜患儿急性期免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的 探讨过敏性紫癜(HSP)患儿急性期血免疫球蛋白及淋巴细胞亚群的变化及其临床意义.方法 选择HSP急性期患儿78例(A组),健康儿童40例(B组),采用流式细胞仪和全自动生化分析仪检查其外周血淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T,CD19+B细胞)、自然杀伤(NK)细胞、CD4+/CD8+T细胞比值及免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体的水平.结果 A组患儿外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、NK细胞和CD4+ T/CD8+T细胞比值低于B组(P＜0.05),CD8+T细胞、CD19+B细胞水平高于B组(P＜0.05);HSP患儿IgA、IgG、IgM及补体C3升高(P＜0.05).结论 免疫功能改变在HSP患儿发病中起重要作用.     

六味地黄汤对免疫功能低下小鼠的药理作用

目的研究六味地黄汤对环磷酰胺所致免疫抑制模型小鼠细胞免疫及体液免疫的免疫调节作用。方法制备小鼠免疫功能低下模型,将免疫功能低下小鼠随机分为对照组、模型组及六味地黄汤治疗组。观察六味地黄汤对小鼠体重的影响。并测定小鼠外周血T淋巴细胞亚群及小鼠血清免疫球蛋白(Ig)的含量。结果六味地黄汤可以使小鼠体重明显增加,提高模型小鼠外周血CD3~+和CD4~+T细胞百分率,促进血清IgM,IgG和IgA的生成。结论六味地黄汤具有增强免疫功能低下小鼠的体液免疫和细胞免疫功能。     

胸腺肽对50例复发性口腔溃疡患者的免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨胸腺肽对复发性口腔溃疡患者的免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群的影响。方法：选取复发性口腔溃疡患者100例,依据随机分配原则分为维生素组和胸腺肽组各50例。维生素组患者给予20 mg维生素B2口服治疗,胸腺肽组患者在此基础上给予20 mg胸腺肽口服治疗。采用免疫酶法检测T淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）水平,随访1年,统计分析所有患者临床疗效、淋巴细胞转化率、红细胞玫瑰花环形成细胞率、T淋巴细胞亚群及不良反应发生情况。结果：治疗后,胸腺肽组患者治疗有效率、CD3、CD4、CD4/CD8、淋巴细胞转化率、红细胞玫瑰花环形成细胞率、IgA、IgG、IgM水平均明显高于维生素组（P<0.05）,而2组患者不良反应发生率无显著差异性（P>0.05）。结论：口服胸腺肽治疗可有效改善复发性口腔溃疡患者的免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群水平,增强机体免疫力,提高患者的临床疗效,且具有良好的安全性,值得临床作进一步实践。     

甲强龙调控CD4＋CD25＋Treg对狼疮肾炎治疗作用的研究

目的通过狼疮肾炎模型经甲强龙治疗后CIM＋CD25＋调节性T细胞（Treg）数量和功能基因的变化,探讨Treg在狼疮肾炎发病中的作用。方法采用慢性移植物抗宿主病（cGYHD）的方法诱导狼疮肾炎小鼠模型,分为正常对照组、模型未治疗组及模型治疗组。观察甲强龙治疗后狼疮肾炎小鼠尿蛋白和肾脏病理的改变,并检测Treg数量及其功能基因的变化。结果cGVHD的方法成功诱导狼疮肾炎模型,治疗组较未治疗组小鼠狼疮症状明显改善。未治疗组与对照组相比,治疗组和未治疗组Treg数量虽无明显差别,但Treg功能基因Foxp3表达增强,而CTLA-4表达水平则明显减低。结论甲强龙治疗后SLE模型鼠中枢和外周耐受异常的恢复,而T细胞活化受抑制,可能为狼疮肾炎好转的原因之一,为狼疮性肾炎的治疗提供了新的靶点。     

淋巴细胞亚群检测在儿童特发性血小板减少性紫癜中的临床意义

目的：探讨淋巴细胞亚群与儿童特发性血小板减少性紫癜（ITP）的关系及临床意义。方法：采用流式细胞术分别检测儿童ITP患者和对照者外周血Th和Tc细胞亚群、B细胞、NK细胞及Treg细胞变化。结果：持续性ITP组和慢性ITP组与对照组比较,CD8＋T淋巴细胞、CD19＋B细胞升高,CD3＋、CD4＋T细胞,CD4＋/CD8＋T细胞降低,CD4＋CD25＋/CD4＋T细胞和CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞/CD4＋T细胞降低,新诊断ITP组CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋T细胞低于与对照组;与持续性ITP组和慢性ITP组比,CD19＋B细胞降低,CD3＋、CD4＋T细胞,CD4＋/CD8＋T细胞,CD4＋CD25＋/CD4＋T细胞和CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋T细胞均升高,对照组CD16＋56＋NK细胞高于其他三组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞比例失衡与儿童持续性和慢性ITP的发病有关,外周血淋巴细胞亚群变化对儿童ITP的临床诊断及预后判断有一定价值。     

B淋巴细胞刺激因子相关生物制剂治疗系统性红斑狼疮研究进展

B淋巴细胞在系统性红斑狼疮(SLE)的发病机制中起重要作用,针对B淋巴细胞的治疗药物成为生物学疗法的焦点.B细胞主要针对病原体产生特异性抗体,但在SLE中B细胞则产生自身抗体.这已在SLE小鼠模型得到证实,B细胞缺陷的小鼠不能诱导出SLE.另外,研究表明,狼疮小鼠及SLE患者体内B淋巴细胞刺激因子(Blys)水平增高,阻断Blys的作用可以使狼疮小鼠的病情缓解,存活时间延长.因此,利用抗Blys单克隆抗体、Blys受体融合蛋白、Blys的抑制性短肽、Blys的免疫抑制重组子、Blys类似物及BAFF受体阻滞剂等Blys相关生物制剂可靶向治疗SLE,但生物靶向疗法治疗自身免疫病尚处在初级阶段,本研究对部分生物制刺治疗SLE最新进展作一综述.     

B淋巴细胞刺激因子相关生物制剂治疗系统性红斑狼疮研究进展

B淋巴细胞在系统性红斑狼疮(SLE)的发病机制中起重要作用,针对B淋巴细胞的治疗药物成为生物学疗法的焦点。B细胞主要针对病原体产生特异性抗体,但在SLE中B细胞则产生自身抗体。这已在SLE小鼠模型得到证实,B细胞缺陷的小鼠不能诱导出SLE。另外,研究表明,狼疮小鼠及SLE患者体内B淋巴细胞刺激因子(Blys)水平增高,阻断Blys的作用可以使狼疮小鼠的病情缓解,存活时间延长。因此,利用抗Blys单克隆抗体、Blys受体融合蛋白、Blys的抑制性短肽、Blys的免疫抑制重组子、Blys类似物及BAFF受体阻滞剂等Blys相关生物制剂可靶向治疗SLE,但生物靶向疗法治疗自身免疫病尚处在初级阶段,本研究对部分生物制刺治疗SLE最新进展作一综述。     

仙人掌多糖主要组分对糖尿病小鼠的免疫调节作用

目的研究野生仙人掌多糖(Opuntia dillenii Haw.Polysaccharides,ODPs)对糖尿病(DM)小鼠免疫调节作用的影响。方法建立链脲佐菌素(STZ)+环磷酰胺(Cy)诱导的DM免疫功能低下复合模型,观察ODPs主要组分ODP-I对DM小鼠NO含量、腹腔巨噬细胞的吞噬功能、血清IgM和IgG的含量、脾淋巴细胞增殖反应、外周血T淋巴细胞亚群比例的影响。结果 400 mg/kg ODP-I能调节DM小鼠NO至正常水平;极显著增强DM小鼠巨噬细胞的吞噬功能;显著提高DM小鼠血清IgM或IgG的含量;显著提高DM小鼠T、B淋巴细胞的增殖能力,且使之恢复至正常水平;能通过提高CD8+T细胞亚群比例,降低CD4+/CD8+T细胞比值,使之恢复至正常水平,改善DM小鼠的免疫紊乱现象。结论 ODP-I能从DM小鼠的非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫方面增强DM小鼠的免疫功能,改善DM症状,效果优于阳性对照药左旋咪唑。     

雷公藤多苷对小鼠细胞免疫功能的影响

目的 研究雷公藤多苷对正常小鼠细胞免疫功能的影响.方法 用流式细胞仪及T淋巴细胞增殖试验分别测定雷公藤多苷对正常小鼠外周血T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞增殖能力的影响.结果 与空白对照组比较,雷公藤多苷可显著降低成熟淋巴细胞(CD3+)、T辅助性及T诱导性淋巴细胞亚群(CD4+)百分比以及T淋巴细胞增殖能力,也可显著升高T抑制淋巴细胞亚群(CD8+)百分比.结论 雷公藤多苷具有一定的细胞免疫抑制作用.     

肾癌患者手术前后免疫功能检测及其临床意义

目的探讨肾癌患者手术治疗前后免疫功能检测及其临床意义。方法选取肾癌(RCC)患者240例,采用TNM临床分期诊断标准进行分组,其中A组:局限型1(Ⅰ期)、B组:局限型2(Ⅱ期)、C组:局部进展型(Ⅲ期)和D组:转移型(Ⅳ期)4组,每各60例。A组、B组、C组均经根治性手术治疗,D组中48例经手术切除,12例经穿刺病检,病理结果均为肾细胞癌。手术患者术前未做免疫及靶向治疗。对照组80名健康成人。所有患者及对照组均晨起空腹抽取外周静脉血,采血时间分为2次,手术治疗前1周,手术治疗后1个月。流式细胞仪检测免疫相关指标。结果 (1)术前T细胞亚群水平:A组肾癌患者与对照组相比,T细胞亚群CD3~+、CD4~+细胞百分率、CD4~+/CD8~+比值、CD8~+细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05)。B组、C组和D组肾癌患者与对照组相比T细胞亚群CD3~+、CD4~+细胞百分率、CD4~+/CD8~+比值明显低于对照组,CD8~+细胞百分率明显高于对照组(P<0.05),B组、C组和D组间相比T细胞亚群水平差异无统计学意义(P>0.05)。(2)术前外周血CD4~+T(Th)细胞分泌细胞因子水平:A组肾癌患者与对照组相比,外周血CD4~+T细胞分泌的各细胞因子差异无统计学意义(P>0.05)。B组、C组和D组肾癌患者与对照组相比,外周血Th1细胞中干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。外周血Th2细胞中IL-4明显升高(P<0.05),IL-6也明显升高(P<0.01),差异均有统计学意义。B组、C组和D组间相比CD4~+T细胞分泌的各细胞因子水平差异无统计学意义(P>0.05)。(3)术前外周血Treg表达水平:A组、B组肾癌患者与对照组相比,外周血Treg差异无统计学意义(P>0.05)。C组、D组与对照组相比,外周血Treg表达明显增高(P<0.01),C组、D组与A、B组间相比Treg表达明显增高(P<0.01)。A组与B组间及D组与C组间相比Treg表达差异无统计学意义(P>0.05)。(4)术后A组与术前对比差异无统计学意义。B组、C组肾癌患者术后与术前对比,T细胞亚群CD3~+、CD4~+细胞百分率、CD4~+/CD8~+比值、CD8~+细胞百分率、外周血CD4~+T(Th)细胞分泌细胞因子水平、Treg变化不大(P>0.05)。结论 (1)肾癌患者细胞免疫功能状态与其TNM分期有关,Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期细胞免疫功能明显降低。(2)Ⅱ期、Ⅲ期肾癌患者术前细胞免疫功能明显低下,根治手术后短期内免疫功能改善不明显,可以行免疫治疗。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群及NK细胞检测的临床意义

目的 研究慢性乙型肝炎及肝炎肝硬化患者外周血淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的变化.方法 应用流式细胞术检测对照组、慢性乙型肝炎(慢乙肝组)及肝炎肝硬化(肝硬化组)患者外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD18+、NK细胞、CD19+(B细胞)表达百分比.结果 慢乙肝组患者CD3+CD4+及NK细胞百分比降低,B细胞百分比增加,与对照组相比差异有统计学意义.肝硬化组患者CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+及NK细胞百分比均明显下降,B细胞百分比及CD4+/CD8+增高,与对照组相比差异有统计学意义.结论 慢性乙型肝炎患者体内存在体液免疫和细胞免疫功能紊乱.外周血淋巴细胞免疫分型检测对于了解患者免疫状态,判别病情及预后有一定临床意义.     

来氟米特对MRL/lpr狼疮鼠治疗作用的研究

目的 研究来氟米特( Leflunomide,LEF)对MRL/lpr狼疮鼠免疫状况的影响.方法 将MRL/lpr狼疮鼠随机分为3组:LEF组(10mg·kg-1·d)、生理盐水(NS)组(0.25mL)和环磷酰胺(CTX)组(50mg· kg-1·qw).每组各6只,CTX组隔日腹腔注射,其余两组每天灌胃,给药2个月后处死,ELISA法测各组小鼠外周血测血清ANA、抗ds-DNA抗体水平,考马斯亮蓝法测24h尿蛋白定量和流式细胞术测脾脏淋巴细胞亚群比例.结果 ①MRL/lpr小鼠LEF治疗组血清抗ds-DNA抗体水平和24h尿蛋白量较NS组明显降低(P＜0.01和P＜0.05)；②LEF治疗组小鼠NK细胞百分比明显高于NS对照组(P＜0.05),而CD19、CD3、CD3CD4阳性细胞百分比显著低于NS对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 LEF能抑制MRL/lpr狼疮鼠T、B淋巴细胞活化同时上调NK细胞功能,减少体内自身抗体和蛋白尿的产生,从而达到治疗狼疮的目的.