中药HPLC指纹图谱相似性研究的探讨

目的探讨中药HPLC指纹图谱相似性评价中药质量的几个相关问题。方法建立中药HPLC指纹图谱相似性方法 ,包括色谱条件建立 ,系统适用性试验 ,稳定性考察 ,精密度试验 ,特征峰提取 ,对照样品的选择 ,共有模式的建立 ,及欧氏距离、相关系数、夹角余弦、指数相似系数、相似性比为测度的相似度。结果欧氏距离为测度的相似度侧重于特征变量值上大小差异的样品间亲疏程度相似性的定量信息描述 ,而其余 4种测度的相似度 ,在样品鉴别真伪上有优势 ,它们是反映特征变量变化模式上的样品间亲疏程度相似性的描述。这些相似度的计算均可在Excel软件上实施。结论中药HPLC指纹图谱相似性可以用来评价中药质量     

瓜蒌薤白颗粒的高效液相色谱特征图谱及与组方药味的相关性

目的:研究瓜蒌薤白颗粒与组方药材瓜蒌、薤白有效部位特征图谱色谱峰的相关性。方法:以瓜蒌薤白颗粒醋酸乙酯部位和正丁醇部位为研究对象,通过HPLC/PDAD联用建立瓜蒌薤白颗粒及其组方药材有效部位特征图谱,以渐进窗口正交投影分析法进行色谱峰匹配,利用均值和中位数建立共有模式,采用相关系数和夹角余弦计算瓜蒌薤白颗粒及其组方药味与共有模式间的相似程度。结果:瓜蒌薤白颗粒及瓜蒌的醋酸乙酯部位间有22个共有峰,利用相关系数计算平均相似度:取均值为0.766 1,取中位数为0.732 3,利用夹角余弦计算平均相似度:取均值为0.847 2,取中位数为0.829 8;瓜蒌薤白颗粒及薤白的正丁醇部位间有10个共有峰,利用相关系数计算平均相似度:取均值为0.789 3,取中位数为0.775 6,利用夹角余弦计算平均相似度:取均值为0.829 0,取中位数为0.816 0。结论:瓜蒌薤白颗粒有效部位主要色谱峰与其组方药味间有较好的相关性,采用该法可帮助确定药效部位色谱峰的归属,进一步分析瓜蒌薤白颗粒有效部位化学组成及来源,为瓜蒌薤白颗粒的质量控制提供理论依据。     

应用X线衍射及拉曼光谱鉴别白石英

目的：建立白石英的X线衍射（X ray diffraction,XRD）谱及拉曼指纹特征图谱,为白石英的真伪鉴别提供新方法。方法：对15批白石英及其伪品样品进行性状、化学组分、XRD图谱及拉曼光谱分析,以10批白石英正品样品XRD共有特征峰作XRD指纹峰,以拉曼光谱共有特征峰作拉曼指纹峰,并进行相似度评价。结果：XRD分析表明1~10号样品为正品白石英,11号为掺伪品,12~15号为伪品。10批白石英正品样品的XRD图谱在晶面间距（d/10^-1 nm）4.24,3.335,2.45,2.28,1.81,1.54附近有6个共有峰（相对强度≥ 5%）,为白石英XRD指纹峰。10批白石英正品样品的拉曼光谱在拉曼位移128,206,355,464.5 cm^-1附近有4个共有峰（相对强度≥ 5%）,为白石英拉曼指纹特征峰。相似度评价表明,正品样品XRD图谱与平均图谱相关系数≥ 98.68%,余弦值≥ 98.94%,正品样品拉曼图谱与其平均数图谱相关系数≥ 99.30%,余弦值≥ 99.62%。掺伪品及伪品XRD及拉曼图谱与相应的平均数图谱相关系数和余弦值均小于正品。所建立的白石英XRD和拉曼指纹图谱可准确区分正品、伪品及掺伪品。结论：XRD图谱可准确分析白石英的物相组成,为白石英的拉曼光谱鉴定方法提供准确的原始样品数据。拉曼光谱鉴别白石英具有很好的专属性,可作为一种快速、准确区分白石英及其伪品的方法。     

生牡蛎X射线衍射分析及指纹图谱的建立

目的:建立生牡蛎的X射线衍射指纹图谱,考察X射线衍射分析在生牡蛎质量检测与鉴别中的应用价值。方法:应用X射线衍射法对11批生牡蛎样品进行定性分析,比较其共有峰的夹角余弦和相关系数的相似度。结果:各生牡蛎样品X射线衍射共有峰的相似度均达到95%以上。结论:生牡蛎的X射线衍射分析方法专属性强、准确可靠,能全面、客观地反映其内在质量特征。     

外加参照物不应参加中药指纹图谱相似度计算

目的考察外加参照物对中药指纹图谱相似度计算的影响。方法将10批待测样品(其中参照物为外加内标物)的数据导入中药指纹图谱相似度评价系统(similarity estimate system)软件,通过溶剂峰剪切、尾部剪切、参比峰设定、相对保留时间与相对峰面积计算等预处理,应用夹角余弦法分别计算有参照物色谱峰参与计算的相似度与参照物色谱峰不参与计算的相似度。结果有参照物参与计算的图谱及共有模式的相似度均在0.9以下,当去掉外加参照物的影响后,其相似度均在0.9以上,表明外加参照物的色谱峰对中药指纹图谱相似度计算有较明显的影响。结论外加参照物不应参加中药指纹图谱相似度计算。     

参芎葡萄糖注射液的UFLC指纹图谱研究

建立了参芎葡萄糖注射液的超快速液相色谱指纹图谱.采用Diamonsil C18色谱柱,以乙腈-0.05％磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长230 nm.17批参芎葡萄糖注射液样品的指纹图谱中确定了10个共有峰.通过与对照品比对,确认其中的7个特征峰分别为丹参素、盐酸川芎嗪、原儿茶醛、丹酚酸D、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A.17批参芎葡萄糖注射液指纹图谱的相似度均大于0.98,且制剂与药材、半成品的指纹图谱有良好的相关性.     

丹香冠心注射液HPLC指纹图谱及4种成分的含量测定

目的:建立丹香冠心注射液的HPLC指纹图谱,并测定其中4种有效成分的含量.方法:采用Agilent TC-C18色谱柱;流动相为乙腈-0.05%三氟乙酸水溶液,梯度洗脱;检测波长288 nm;流速1.0 mL·min-1;柱温40℃.通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度评价.结果:标定了13个共有峰,10批样品的相似度均大于0.98;测定了10批样品中丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B的含量,4种成分在标准曲线范围内线性关系良好(r>0.999),平均回收率均大于97%(n=6).结论:该方法简便、快速、准确,可用于该品的质量控制.     

不同厂家丹参注射液的质量考察

目的考察不同厂家,不同批号的丹参注射液的高效液相色谱图的相似性,并对其主要成分:丹参素和原儿茶醛进行含量分析。方法采用C18色谱柱,1.0%冰醋酸的甲醇溶液-1.0%冰醋酸的水溶液程序梯度洗脱,体积流量为1.0mL·min-1,检测波长281nm。采用夹角余弦法对3个厂家,5个批号的丹参注射液图谱进行相似性比较;建立丹参素和原儿茶醛的标准曲线,分别测出它们的含量。结果得到分离度较好的丹参注射液的各个样品的色谱图,通过计算求得各个样品图谱的相似度;3个厂家样品中丹参素、原儿茶醛的含量有显著性差异。丹参素和原儿茶醛分别在14.4～180μg·mL-1和2.16～43μg·mL-1内线性关系良好,相关系数达0.99968,0.99906;平均回收率丹参素为100.43%(RSD=1.71%,n=3),原儿茶醛为98.6%(RSD=2.47%,n=3)。结论不同厂家的丹参注射液存在质量差异,应加强和统一丹参注射液的质量控制标准。     

建立中药"对照指纹图谱"的可行性探讨

建立中药“对照指纹图谱”为标准中指纹图谱相似性比较及相似度限值的确定提供参考。以SPSS统计分析软件对人参、黄芩的HPLC色谱数据所代表的指纹图谱相似度及影响相似度的因素进行研究。中药指纹图谱相似度的影响因素由样品所含的主要化学成分所引起，相关系数法比夹角余弦法对指纹图谱中小色谱峰变化的反应明显。提出了在中药质量标准中使用“对照指纹图谱”作为中药指纹图谱相似度比较的参照系。     

丹瓜养目膏的HPLC指纹图谱研究

目的:建立丹瓜养目膏的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-0.026%磷酸(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为270 nm,柱温25℃,进样量为20μl。以橙黄决明素色谱峰为参照峰,测定10批丹瓜养目膏的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2.0版)进行共有峰鉴定和相似度评价。结果:10批丹瓜养目膏有25个共有峰,相似度均≥0.921。经验证,10批丹瓜养目膏指纹图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论:所建立的指纹图谱专属性强、结果稳定,可为丹瓜养目膏的质量评价和控制提供依据。     

不同厂家香丹注射液中丹参素钠和原儿茶醛含量的比较

目的：建立以高效液相色谱法同时测定香丹注射液中丹参素钠和原儿茶醛含量的方法,并比较不同厂家生产的香丹注射液中丹参素钠和原儿茶醛含量的差异,以控制香丹注射液的质量。方法：色谱柱为AlltimaC18柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.5%冰醋酸（90∶10）,检测波长为280nm。结果：丹参素钠、原儿茶醛的进样量分别在0.26～1.58μg（r=0.9995）、0.12～0.73μg（r=0.9996）范围内与各自峰面积的积分值呈良好的线性关系;丹参素钠、原儿茶醛的平均回收率分别为99.8%、99.7%,RSD分别为0.4%（n=6）、0.4%（n=6）。共测定12家企业生产的16批香丹注射液,丹参素钠、原儿茶醛含量范围分别为1.02～2.08mg·mL^-1、0.24～0.51mg·mL^-1。结论：该方法简便、准确、无干扰,可用于同时测定香丹注射液中丹参素钠和原儿茶醛的含量;不同厂家生产的香丹注射液之间存在显著质量差异,建议厂家重视原药材质量,改善制剂工艺,提高产品质量。     

不同厂家参麦注射液特征指纹图谱的比较

目的:研究不同厂家和不同批次参麦注射液指纹图谱及色谱峰面积的差异。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,比较不同厂家和同一厂家不同批次参麦注射液特征指纹图谱的差异,并通过相似度软件分析其相似性。结果:不同厂家生产的参麦注射液在所含色谱峰的数目和峰面积上存在很大差异;同一厂家10批参麦注射液所含色谱峰的数目基本相同,含量虽然也存在一定的差异,但相对不同厂家的差异较小。结论:不同厂家的参麦注射液指纹图谱变异范围差异较明显,同一厂家的产品质量基本稳定在一定水平内。     

Development of the chromatographic fingerprint of herbal preparations Shuang-Huang-Lian oral liquid

A simple, reliable and reproducible method, based on high performance liquid chromatography (HPLC), for developing chromatographic fingerprint of complex herbal medicine Shuang-Huang-Lian (SHL) oral liquid was described. Ten batches of SHL obtained from different pharmaceutical factories were used to establish the fingerprint. In addition, the contents of baicalin and chlorogenic acid, which are two marker constituents in the preparations, were also determined. Chromatographic fingerprint, together with the contents of the markers were applied for quality control of SHL. SHL comprises three kinds of medicinal herbs: Fols Lonicerae, Radix Scutellariae and Fructus Forsythiae. According to State Food and Drug Administration (SFDA) requirement, the chromatographic fingerprints of Fols Lonicerae, Radix Scutellariae and Fructus Forsythiae, the raw materials of SHL preparations, were also established. The data of fingerprints of SHL and its raw herbs established by HPLC were all processed with two kinds of mathematic methods including correlation coefficient and cosine value of vectorial angle to validate their similarities. In conclusion, fingerprints of Radix Scutellariae, Fols Lonicerae and Fructus Forsythiae are suitable for identification, differentiation of their geographic origins and quality control. The similarity of 10 batches of SHL oral liquid was more than 0.988, which showed the preparations from different pharmaceutical factories were consistent.     

补肾壮骨配方颗粒的HPLC指纹图谱研究

目的：建立补肾壮骨配方颗粒的指纹图谱。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法。色谱柱为InertsilC18（250mm×4．6mm.5μm）,流动相为乙腈-水（梯度洗脱）,流速为1ml／min,检测波长为285nm。采用直观分析和相似度软件评价10批补肾壮骨配方颗粒指纹图谱的相似度。结果：建立了补肾壮骨配方颗粒的指纹图谱,10批样品共标定了9个共有峰,各色谱峰分离度较好、相似度较高,符合中药色谱指纹图谱研究的技术要求。结论：该方法准确、可靠,建立的HPLC指纹图谱可为补肾壮骨配方颗粒的质量控制提供科学准确的依据。     

恩施产杜仲药材HPLC指纹图谱的研究

目的：建立恩施产杜仲药材水提液HPLC指纹图谱的分析方法。方法：10批恩施产杜仲药材水提,采用Wonda Sil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液二元线性梯度洗脱,检测波长230 nm,流速1.0 ml·min^-1,柱温25℃,进样量10μl,进行HPLC指纹图谱分析。结果：确定了12个共有峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）》计算10批杜仲药材水提液的指纹图谱整体相似度在0.596-0.997,并得出对照指纹图谱。结论：针对恩施产杜仲药材建立的HPLC指纹图谱分析方法,操作简便,稳定性高,重复性好,可有效地控制恩施产杜仲药材的内在质量。     

酒萸肉超高效液相色谱指纹图谱的建立及化学计量分析

目的建立酒萸肉的超高效液相色谱指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析。方法色谱柱为ACE3 C18-AR柱(100 mm×2.1 mm,3μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.2 m L/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为1μL。以马钱苷为参照峰绘制76批酒萸肉药材样品的指纹图谱,并与10批山萸肉药材样品的指纹图谱进行比较。采用Chempattern化学计量学软件进行相似度评价,并进行聚类分析和主成分分析。结果76批酒萸肉药材指纹图谱共确定7个共有峰、6种成分,分别为没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、山茱萸新苷;76批酒萸肉药材样品中有60批次的相似度大于0.8;76批酒萸肉药材样品和10批山萸肉药材样品聚为两大类,两大类的5-羟甲基糠醛含量差异明显;经主成分分析,峰6和峰2均是导致药材样品质量差异的重要因素。结论所建立的超高效液相色谱指纹图谱可用于酒萸肉的质量评价。