E—cadherin与PCNA在吸烟小鼠气道上皮中的表达

应用免疫组织化学和原位分子杂交方法,检测不同阶段吸烟小鼠支气管上皮细胞上皮钙粘附素（Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ,Ｅ－ｃｄ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达与分布。探讨吸烟气道Ｅ－ｃｄ表达变化对上皮增殖、重建的影响。结果：小鼠吸烟４周时,细支气管上皮Ｅ－ｃｄ表达与正常对照组比较明显下调,而ＰＣＮＡ阳性细胞率明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１）;吸烟８周时,Ｅ－ｃｄ表达上调,而ＰＣＮＡ表达比吸烟４周时明显减     

吸烟小鼠呼吸道上皮凋亡与增殖间的关系

利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学染色对不同阶段吸烟小鼠呼吸道粘膜上皮凋亡细胞、增殖细胞的阳性细胞率与分布进行检测，并结合电镜的形态学观察对照研究。结果：正常呼吸道粘膜上皮凋亡细胞位于表层、增殖细胞带位于基底部，而吸烟小鼠丧失了上述分布特征。小鼠吸烟４周时，呼吸道上皮凋亡细胞和增殖细胞阳性率均明显高于未吸烟正常对照组。吸烟８周时，凋亡细胞和增殖细胞阳性率与吸烟４周时相比明显减少。吸烟１２周时，凋亡细胞明显增多，而增殖细胞明显减少。结论：吸烟小鼠呼吸道上皮开始不仅存在大量细胞凋亡而且出现活跃的细胞增殖，随着吸烟时间延长，呼吸道上皮以细胞凋亡占优势，呈现为细胞损伤逐渐加重而细胞再生修复能力减弱的病变特征     

c-myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管周细胞增殖的影响

应用细胞培养、核酸斑点杂交、~３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（~３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞 ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０１）,反义ＯＤＮｓ显著阻抑 ＨＥＣＣＭ诱导的周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０５）,而同义ＯＤＮｓ无上述作用（Ｐ＞０．０５）。结果提示,ＨＥＣＣＭ可通过上调ｃ－ｍｙｃ基因表达促进肺血管周细胞增殖,反义ＯＤＮｓ通过下凋ｃ－ｍｙｃ基因表达,抑制ＨＥＣＣＭ诱导的肺血管周细胞增殖。     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（     

口腔粘膜癌前病变中P~（53）蛋白和增殖细胞核抗原的表达

对７８例口腔白斑中Ｐ５３蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的研究表明，正常口腔上皮和单纯性增生的白斑中Ｐ５３阳性细胞数量相似，上皮异常增生时，Ｐ５３阳性细胞明显增多，ＰＣＮＡ阳性细胞分布位置与严３阳性细胞一致；异常增生时，ＰＣＮＡ阳性的基底细胞明显增多。提示Ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达状况可能与癌前病变程度及癌变有关。     

大肠癌上皮c-myc蛋白、表皮生长因子受体和增殖细胞核抗原的表达及其与预后意义

应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ｃ－ｍｙｃ、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）对有随访资料的大肠癌的表达。结果提示：ｃ－ｍｙｃ阳性表达中，大肠癌（７０４９％）明显高于正常粘膜（２６６％，Ｐ＜０．０５）。正常大肠粘膜未发现ＥＧＦＲ阳性表达，而大肠癌有较高表达（７７０４％）。ＰＣＮＡ阳性表达中，大肠癌（４６４０±２６．５）％明显高于正常粘膜（１５１２±５．４４）％，Ｐ＜０．０５）。ＥＧＦＲ表达与大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ＜０．０５）。ＰＣＮＡ表达与大肠癌分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ＜０．０５）。大肠癌４年生存率ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ表达＞６５％组均明显低于＜２５％组（Ｐ＜０．０５），ＥＧＦＲ－ＬＩ和ＰＣＮＡ－ＬＩ与生存期均有明显负相关。结论表明：ｃ－ｍｙｃ、ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ表达与大肠癌的大肠癌细胞增殖有相关性。ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ表达与大肠癌的生存期均有明显负相关，该两项指标对大肠癌临床诊治和预后的评估有重要价值。     

口腔粘膜癌前病变中P^53蛋白和增殖细胞核抗原的表达

对７８例口腔白斑中Ｐ＾５３蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的研究表明，正常口腔上皮和单纯性增生的白斑中Ｐ＾５３阳性细胞数量相似，上皮异常增生时，Ｐ＾５３阳性细胞明显增多，ＰＣＮＡ阳性细胞分布位置与Ｐ＾５３阳性细胞一致；异常增生时，ＰＣＮＡ阳性的基底细胞明显增多。提示Ｐ＾５３和ＰＣＮＡ的表达状况可能与癌前病变程度及癌变有关。     

乳腺癌雌激素受体表达与增殖细胞核抗原表达和AgNOR计数关系的研究

目的研究乳腺癌雌激素受体（ＥＲ）表达与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达和ＡｇＮＯＲ计数关系。方法采用ＡｇＮＯＲ染色技术和免疫组化Ｓ－Ｐ法，用抗ＥＲ单克隆抗体及抗ＰＣＮＡ单克隆抗体（ＰＣ１０），研究５０例乳腺癌ＥＲ与ＰＣＮＡ表达及ＡｇＮＯＲ计数。结果３３例乳腺癌ＥＲ阳性者与１７例ＥＲ阴性者相比，ＰＣＮＡ表达低（Ｐ＜０．０５），ＡｇＮＯＲ平均颗粒少（分别为４．９１±１．６９，６．５２±２．１３，Ｐ＜０．０１）。结论乳腺癌ＥＲ表达与ＰＣＮＡ表达及ＡｇＮＯＲ计数有相关关系，ＰＣＮＡ表达率及ＡｇＮＯＲ计数对评估乳腺癌预后有一定意义     

大肠癌和腺瘤细胞凋亡的特征和意义

目的　观察大肠癌和腺瘤组织细胞凋亡的特征,探讨细胞凋亡和增殖在大肠癌和腺瘤组织中的意义。方法　采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）法检测凋亡细胞,以凋亡细胞百分率作为凋亡指数（Ａｐｏｐｔｉｃｉｎｄｅｘ,ＡＩ）对１５例大肠癌、１０例腺瘤、５例正常大肠粘膜进行凋亡细胞原位观察。结果　ＴＵＮＥＬ阳性物质位于细胞核内,常聚集于核膜附近,呈新月状和块状。大肠正常粘膜ＴＵＮＥＬ阳性细胞全部位于表层上皮中,数量很少（ＡＩ＝１．７４±１．０１）,腺瘤组织中ＴＵＮＥＬ阳性细胞相对较多（ＡＩ＝３３．４６±１１．３９）,大肠癌组织ＴＵＮＥＬ阳性细胞散在分布,与腺瘤相比数量明显减少（ＡＩ＝１１．０８±４．２７）（Ｐ＜０．０１）。结合增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）实验结果可见,腺瘤组织中ＡＩ,ＰＩ（ＰＩ＝２７．２４±７．６６）均高,而大肠癌组织中则以细胞增殖（ＰＩ＝５４．１８±１０．４１）占优势。结论　大肠肿瘤癌变过程中不仅存在活跃的细胞增殖,而且有大量的细胞凋亡,因而增加了粘膜上皮的不稳定性,高的增殖能力通过选择而占优势,从而导致癌变的发生。     

食管癌前病变和癌组织中增生细胞核抗原与细胞凋谢变化的关系

为探讨细胞凋谢与细胞增生在食管癌变过程中变化的关系，计数１９４例食管粘膜活检组织切片单位面积（ｍｍ２）中增生细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫阳性细胞数和凋谢细胞数，对其进行定量分析。结果：在食管正常上皮，ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数量低，从食管正常上皮到基底细胞增生，ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数稍有升高，到间变时明显升高，到癌时升高最显著，为正常上皮的近７倍（Ｐ＜０．０１）。在各级病变组织中，凋谢细胞数较低，在正常上皮中更低。随病变加重（基底细胞增生→间变→癌），单位面积凋谢细胞数均逐渐升高（Ｐ＜０．０１）。细胞凋谢指数与细胞增生指标ＰＣＮＡ呈显著正相关（ｒ＝０．３６３，Ｐ＜０．０１）。提示：细胞凋谢不仅可以反映食管癌变过程中上皮细胞的死亡状况，而且能反映细胞增生状况。     

卵巢上皮性肿瘤PCNA和p~(53)蛋白表达及其相关性

目的探讨PCNA和P53在卵巢癌变中的生物学意义。方法采用免疫组化（ABC）法检测5例正常卵巢、21例腺瘤、10例交界性肿瘤和35例腺癌（其中浆液性癌22例，粘法性癌13例）中PCNA和p53蛋白的表达状况，进一步了解PCNA和p53蛋白表达的相关性。结果正常卵巢、腺瘤、交界性肿瘤和腺癌中PCNA指数逐渐升高（P＜0．05和P＜0．01）.p53表达仅见于卵巢癌中，浆液性癌的表达率高于粘液性癌（P＜0.05）。p53蛋白表达阳性组和阴性组问PCNA指数无明显差异，但p53指数和PCNA指数呈显著的正相关。此外,PCNA指数和p53指数与癌组织分级有关。结论PCNA指数和p53指数是反映卵巢上皮性肿瘤生物学行为的有效指标；p53指数与PCNA指数密切相关。     

肺表面活性物质对吸烟致肺损伤大鼠的治疗作用

目的 探讨肺表面活性物质（PS）对吸烟致肺损伤大鼠的治疗作用。方法 使Wistar大鼠吸入烟草雾制作肺损伤大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组（8只）、吸烟3周组（8只）、吸烟7周组（8只）及PS治疗组（6只）。观察形态学、肺功能、肺组织CC16、SP-C mRNA表达及细支气管上皮细胞CC16蛋白的表达。结果 吸烟7周组细支气管Clara细胞比例降低,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生,小气道壁平滑肌面积增加（P＜0．05）,CC16、SP－C mRNA及CC16蛋白表达均降低（P＜0．05）。与吸烟7周组比较,PS治疗组大鼠Clara细胞比例增加（P＜0．05）,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生程度减轻,小气道平滑肌面积降低（P＜0．05）,气道阻力下降（P＜0．05）,CC16、SP－C mRNA及CC16蛋白表达均增高（P＜0．05）。结论 PS治疗吸烟致肺损伤大鼠是有效的;其机制之一可能是PS减轻了烟草雾对Clara细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞的损伤。     

人胎儿卵巢组织异种移植后卵母细胞的发育及成熟能力

目的探讨人胎儿卵巢组织冷冻复苏、体外培养和异种移植后卵母细胞的发育和成熟情况。方法取5例胎龄20周引产的胎儿卵巢,采用丙二醇慢速冷冻保存,复苏后在组织培养条件下进行体外培养,6d后移植到免疫缺陷小鼠的肾被膜下,应用卵泡刺激激素作用23周后取出卵巢组织,机械法取出窦卵泡内的卵母细胞,结合体外成熟培养,观察卵子成熟情况,并通过移植前后组织学和增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化观察卵泡发育情况。结果冷冻复苏组织和新鲜卵巢组织中各期卵泡的构成比之间差异无显著性(P>0.05);培养组织与新鲜组织和冻融组织相比,增殖期卵泡的比例显著增加(P<0.05);移植组织与新鲜组织、冻融组织和培养组织相比,增殖期卵泡比例亦显著增加(P<0.05)。各组织中原始卵泡均未见PCNA阳性表达,其表达最早出现于初级卵泡,新鲜组织和冻融组织中偶可见PCNA阳性表达,而培养组织和移植组织中可见明显的PCNA阳性表达。从移植卵巢的窦卵泡中获得未成熟卵子42个,经体外成熟培养有21.43%的卵子可发育到MII期。结论人胎儿卵巢组织能耐受冻融、组织培养和移植过程,其卵泡能够重新生长发育,恢复内分泌功能,且不影响卵母细胞的发育及成熟能力。     

增殖细胞核抗原在口腔鳞状细胞癌中的表达

采用鼠抗ＰＣＮＡ单克隆抗体，ＡＢＣ法，对１１例正常口腔粘膜及２９例口腔鳞癌进行了染色。结果表明：正常粘膜仅在基底层中有少量的ＰＣＮＡ阳性细胞，其阳性分级为１级。而鳞癌阳性分级主要是３～４级，随着组织学分级的升高，ＰＣＮＡ阳性表达率也相应增高。经统计学分析，正常组织与鳞癌之间及鳞癌各级均有非常显著差异（Ｐ＜００１）。提示：ＰＣＮＡ的表达与口腔鳞癌组织学分级有关。     

人膀胱癌荷瘤鼠中shRNA沉默△Np63基因对肿瘤的抑制和 cyclin D_1表达的影响

目的利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默ΔNp63基因的表达,研究其对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用,同时检测ΔNp63基因被抑制后对细胞周期素D1(cyclin D1)表达的影响。方法建立人膀胱癌裸鼠皮下移植模型,构建ΔNp63基因特异性shRNA(short hairpin)表达质粒,将表达质粒转染荷瘤鼠瘤体。将符合实验条件的15只裸鼠分为3组:ΔNp63-shRNA组、Control-shRNA组与生理盐水组,每组5只。观察各组肿瘤生长情况、瘤组织超微结构的改变,检测ΔNp63基因和蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)和cyclin D1蛋白表达的变化。结果转染质粒8周后,ΔNp63-shRNA组与生理盐水组瘤体积有显著性差异(P<0.01),抑瘤率为74.44%,Control-shRNA组与生理盐水组体积无显著性差异(P>0.05)。病理结果显示ΔNp63-shRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞核分裂象减少,可见大量肿瘤细胞坏死和凋亡、炎症细胞浸润。RT-PCR结果显示ΔNp63-shRNA组ΔNp63基因表达降低。免疫组化结果显示ΔNp63、PCNA、cyc-lin D...     

p16和PCNA在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达

目的探讨p16和PCNA表达产物在宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌中表达的意义。方法对正常宫颈鳞状上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织共95例,采用免疫组织化学S-P法,对宫颈癌变过程中p16和PCNA蛋白进行研究,将结果进行统计分析。结果p16蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01);PCNA蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01)。p16和PCNA两种蛋白在CIN和宫颈癌中的表达无明显差异。结论p16和PCNA蛋白的表达与宫颈癌的发生有关,提示这两种蛋白有可能成为高危人群早期筛查的一种免疫组化指标。     

增殖细胞核抗原在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其意义

目的 :探讨卵巢上皮性恶性肿瘤增殖细胞核抗原 (ProliferatingcellnuclearantigenPC NA)表达水平及临床意义。方法 :采用免疫组织化学SP法检测 4 7例卵巢上皮性肿瘤、17例卵巢良性肿瘤及 10例正常卵巢组织中PCNA的表达。结果 :卵巢良性和恶性上皮性肿瘤中PCNA表达阳性率分别为 11.76 %和 85 .11% ,两组比较差别十分显著 (P <0 .0 1) ,恶性肿瘤组织中的PC NA表达与病理分级正相关 ,与生存率呈负相关 ,与临床分期无关。结论 :PCNA表达水平的检测可作为判断卵巢上皮性肿瘤生物学行为和患者预后的重要指标。     

信号转导子和转录激活子6及其mRNA在哮喘大鼠细支气管中的表达与定位

目的:探讨信号转导子和转录激活子6(STAT6)及其mRNA在哮喘大鼠细支气管中的表达和细胞内定位分布规律.方法:采用免疫组化、组织原位杂交等技术,对变应原诱导的哮喘大鼠细支气管中的STAT6及其mRNA的表达和定位进行研究.结果:STAT6及其mRNA在哮喘大鼠细支气管、终末细支气管及呼吸性细支气管上皮细胞中广泛表达.与对照组相比明显升高,差异具有显著性(P＜0.01).结论:由变应原诱导的哮喘大鼠,STAT6及其mRNA在其细支气管中的表达对哮喘的发病机制的探讨和疾病的防治有很大的意义.     

植物雌激素α-玉米赤霉醇对人正常乳腺的影响

目的研究植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对人正常乳腺的影响.方法将人正常乳腺组织分别植入30只9～10周裸鼠体内,然后随机分为3组,每组10只,分别为:对照组(不给药)、α-ZAL 1 mg/kg组和5 mg/kg组(于植入2～6周时隔日肌肉注射给药).植入6周后取出所有植入乳腺组织,采用免疫组织化学方法检测乳腺上皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、抑凋亡基因Bcl-2、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的蛋白表达,并观察给药前后植入组织块体积的改变和组织形态学特征;采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测雌激素硫酸转移酶(EST)mRNA和BUN1的表达水平.结果α-ZAL对植入乳腺上皮细胞的Bcl-2、PCNA、PR和ER蛋白表达及植入组织块体积的改变和组织形态学无明显影响.α-ZAL上调植入乳腺组织BIN1mRNA的表达,但对ESTmRNA表达无明显影响.结论α-ZAL对人正常乳腺的组织形态学和细胞增殖及凋亡特征无明显影响,但可增强肿瘤抑制蛋白BIN1mRNA的表达,提示对乳腺有潜在的保护作用.