As2O3对组织因子、纤溶酶原激活物抑制剂-1和-2表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)在诱导NB4、HL-60和THP-1 白血病细胞凋亡过程中对细胞内组织因子(TF)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)-1和-2 表达的影响.方法使用不同浓度的As2O3处理NB4、HL-60和THP-1 细胞,以生长曲线观察As2O3对细胞体外增殖的影响,并以琼脂糖电泳及流式细胞术观察细胞凋亡情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测经As2O3处理后细胞内TF、PA I-1 和-2抗原含量的变化.结果① 1 μmol/L和8 μmol/L的As2O3分别作用NB4和HL-60细胞24 h后,细胞均出现典型的凋亡;而THP-1细胞在8 μmol/L As2O 3作用24 h后未出现细胞凋亡.② 1 μmol/L As2O3下调NB4细胞内TF抗原含量,与对照组相比差异显著(P<0.01),且TF抗原水平的降低呈As2O3剂量依赖性;而2 μmol/L As2O3诱导NB4细胞凋亡过程中,细胞内PAI-1抗原含量增加(P<0.0 5).③ 8 μmol/L As2O3诱导HL-60细胞凋亡过程中,细胞内TF抗原含量增加(P <0.01),但细胞内PAI-2抗原含量降低(P<0.05).④ THP-1细胞在8 μmol/L As 2 O 3处理24 h后,细胞内TF和PAI-2抗原含量均增加(P<0.05和P<0.01). 结论 As2O3对NB4、HL-60和THP-1细胞内的TF、PAI-1和PAI-2的表达有不同的影响.     

端粒在As2O3致L02和HepG2细胞凋亡及染色体畸变中的作用

目的 探索端粒、端粒酶活性及端粒逆转录酶基因表达在As2O3诱导L02和HepG2细胞凋亡及染色体畸变过程中的作用.方法 12μmol/L As2O3处理L02和HepG2细胞24、48、72 h,以处理0h作为对照组,流式细胞仪检测细胞凋亡;应用以PCR为基础的端粒重复序列扩增(TRAP-PCR)银染法检测端粒酶活性;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测端粒逆转录酶(hTERT)mRNA表达;0.625 μmol/LAs2O3处理L02和HepG2细胞2、4、6周,以处理0周作为对照组,染色体核型分析检测细胞染色体畸变;检测端粒酶活性及端粒逆转录(hTERT)mRNA表达.结果 12 μmol/L As2O3处理L02和HepG2细胞凋亡率较对照组增加(P＜0.05);端粒酶活性及hTERTmRNA的表达较对照组均明显下降(P＜0.05).0.625 μmol/L As2O3处理L02和HepG2细胞,染色体端-端融合及双微体的畸变率较对照组增加(P＜0.05);端粒酶活性及hTERTmRNA的表达增加(P＜0.05).结论 高浓度As2O3短期处理L02和HepG2细胞可诱导其凋亡.而低浓度As2O3长期处理L02和HepG2细胞可导致染色体畸变,畸变可使基因组不稳定是细胞癌变的基础.端粒、端粒活性及hTERTmRNA表达在此过程中的不同变化也许可部分解释As2O3抗癌和致癌的矛盾作用.     

三氧化二砷联合偏钒酸钠对HL-60细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)联合偏钒酸钠(NaVO3)对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度的As2O3、NaVO3单药或联合(1×10-8 mol/L NaVO3联合5×10-3 mol/LAs2O3)对HL-60细胞的生长抑制作用;琼脂糖电泳检测DNA条带;Hoechst 33258染色后荧光显微镜观察不同处理组中细胞核的变化;以AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测5×10-3mol/L As2O3、1×10-8 mol/L NaVO3单药或联合对HL-60细胞凋亡的影响.结果 MTT结果显示As2O3能抑制HL-60细胞的增殖,并呈剂量和时间效应;低浓度的NaVO3促进细胞增殖,高浓度(≥1×10-8 mol/L)的NaVO3抑制细胞的生长;两药联合抑制作用强于对应浓度单药抑制作用(P＜0.05).HL-60细胞经As2 O3和较高浓度(≥1×10-8 mol/L)的NaVO3处理24 h后均可见到DNA梯形条带.Hoechst 33258染色结果发现HL-60细胞经As2O3和较高浓度(1×10-9 mol/L NaVO3)的NaVO3处理24 h后可见细胞核呈现核浓缩现象.流式细胞术结果显示5×10-3 mol/L As2O3和1×10-8 mol/LNaVO3联合作用于HL-60细胞所诱导的早期凋亡细胞显著多于单独用药(P＜0.05).结论 As2O3及浓度大于1×10-8 mol/L NaVO3均可有效地抑制体外白血病细胞HL-60的增殖并诱导细胞凋亡,两药联合对于抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡具有加强作用.     

三氧化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)对T淋巴细胞白血病细胞株的作用及其机制.方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察药物对细胞株的生长抑作用,流式细胞仪测定细胞凋亡峰,端粒重复扩增法检测端粒酶活性,实时RT-PCR测定端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达.结果2～6μmol/L As2O3可抑制Molt-4细胞生长,且随着时间的延长和药物剂量的增大,这种抑制作用更为明显(P<0.05).药物作用72h,As2O3对Molt-4细胞生长抑制半数致死量为4.68μmol/L.2～6μmol/L浓度范围内,As2O3诱导Molt-4细胞的凋亡率随时间的延长和药物剂量的增大而升高(P<0.05).6μmol/L药物作用96h,K562细胞和Molt-4细胞的凋亡率分别为83.44%±18.04%和77.93%±6.00%.As2O3能显著抑制Molt-4细胞株端粒酶活性,下调hTERT mRNA表达.结论As2O3有明显抑制T淋巴细胞白血病细胞生长和诱导细胞凋亡的作用.通过下调hTERT mRNA表达,从而抑制端粒酶活性可能是As2O3的主要作用机制之一.     

三氧化二砷抑制U266细胞增殖、诱导凋亡及与血管内皮生长因子表达的关系

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡的影响及与血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系.方法 四唑盐比色法(MTT)观察As2O3对U266细胞增殖的影响;缺口末端标记法(TUNEL)分析As2O3对U266细胞凋亡的影响;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测2 μmol/L AS2O3不同处理时间后U266细胞VEGF mRNA表达的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测As2O3不同浓度不同处理时间对U266细胞VEGF蛋白表达的变化. 结果 (1)As2 Q3明显抑制U266细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)为2 μmol/L;(2)As2O3能诱导U266细胞凋亡,呈剂量依赖性;(3)As2O3(2,5,10μmol/L)分别处理72 h后细胞培养上清中VEGF量呈剂量依赖性减少;(4)考虑细胞增殖对VEGF分泌的影响,2 μmol/L As2O3处理组的上清VEGF量与对照组的差别无统计学意义,RT-PCR显示2μmol/L As2O3处理的U266细胞个体VEGF mRNA的表达无变化.结论 As2O3可以诱导骨髓瘤细胞凋亡,抑制其增殖.As2O3可以通过抑制细胞增殖、诱导凋亡,减少肿瘤负荷,减少VEGF总量,但是不改变细胞个体VEGF的表达.     

As2O3诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡与细胞内端粒酶活性关系的研究

目的探讨As2O3对HeLa细胞的诱导凋亡作用及对HeLa细胞端粒酶活性的影响.方法采用不同浓度的As2O3作用于人宫颈癌HeLa细胞不同生长时间段(24、48、72 h)后,显微镜下观察细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)测定细胞生长抑制情况,TRAP-ELISA方法测定细胞内端粒酶活性变化.结果2 μmol*L-1的As2O3处理HeLa细胞48 h后可降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,细胞内端粒酶活性比对照组明显下降.随着As2O3 浓度增加、作用时间延长,作用效果越明显.结论As2O3诱导HeLa细胞凋亡可能与其抑制细胞内端粒酶活性有关.     

维甲酸促进三氧化二砷诱导的细胞凋亡作用

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对非急性早幼粒细胞性白血病(acute prom y elocytic leukemia, APL)急性髓性白血病细胞的体外作用以及维甲酸(retinoic acid, R A )与As2O3之间的相互作用.方法:用维甲酸敏感(HL-60S)及维甲酸耐药(HL-60R)急性髓性白血病细胞株HL-60作为体系, 应用细胞计数及台盼蓝试验观察细胞活力及生长.采用细胞形态、DNA 片段梯度、末端核苷酸酶标记及流式细胞法观测细胞凋亡.结果: As2O3(0.5～4 μmol·L-1)抑制 HL -60R细胞生长,抑制能力与As2O3浓度及作用时间呈正相关;RA不仅促进HL-60S而且促进HL-60R 对As2O3的敏感性.结论:As2O3对细胞的抑制作用不局限于PML/RARα阳性细胞;As2O3可能对非APL急性髓性白血病有治疗作用 ,RA 与As2O3合用可能发挥更佳效果.     

丙戊酸钠联合三氧化二砷对HL-60细胞株的体外研究

目的:探讨丙戊酸钠(sodium valproate,SV)联合三氧化二砷(arsenous trioxide,As2O3)诱导HL-60细胞凋亡与bcl-2﹑bax mRNA之间可能的关系。方法:在对数生长期的HL-60细胞中分别加入不同浓度的SV和1.0μmol/LAs2O3,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率,用Annexin V-FITC/PI双重标记经流式细胞仪检测细胞早期凋亡率,RT-PCR检测bcl-2,bax mRNA在细胞中的表达。结果:SV抑制HL-60细胞生长并促进其凋亡,SV联合1.0μmol/L As2O3对HL-60细胞的生长抑制及促凋亡作用更明显。SV单独或联合1.0μmol/L As2O3作用于HL-60细胞,bcl-2mRNA表达下降,bax mRNA表达增高。结论:SV与As2O3有协同作用,抑制HL-60细胞生长并诱导其凋亡,bcl-2﹑bax mRNA的表达变化可能参与了SV对HL-60细胞的促凋亡作用。     

维生素C增强As2O3诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的:探讨维生素C是否能影响三氧化二砷(As2O3)诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡,以及它对细胞内端粒酶活性的影响。方法:用噻唑蓝(MTT)法筛选出维生素C的最佳浓度250μmol.L-1,并用该浓度联合不同浓度的As2O3同时处理HeLa细胞后,用光镜、MTT法和流式细胞术研究细胞生长和凋亡的情况,用TRAP-ELISA法检测细胞内端粒酶活性的变化。结果:单独1μmol.L-1As2O3处理过的细胞生长未受到明显抑制,但联合250μmol.L-1维生素C处理细胞,则细胞生长受到抑制,且部分细胞出现凋亡形态学特征。2、51、0μmol.L-1As2O3联合维生素C用药组的细胞凋亡率也比单独用As2O3组明显增高,且出现凋亡的时间提早。端粒酶活性检测结果提示,联合用药组细胞内端粒酶活性均明显比单独用As2O3组低。结论:小剂量维生素C能增强As2O3诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡,并能增强As2O3对细胞内端粒酶活性的抑制作用。     

三氧化二砷对鼠恶性黑素瘤B16细胞凋亡的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对鼠恶性黑素瘤B16细胞诱导凋亡的影响.方法:采用流式细胞术(FCM)检测不同浓度的As2O3诱导B16细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率.结果:As2O3浓度分别为5 μmol/L、10 μmol/L 、20 μmol/L时, B16细胞的早期凋亡率分别为7.18%、21.1%、3.59%,晚期凋亡率分别为2.63%、5.35%、6.34%,总凋亡率分别为9.81%、26.45%、9.93%.结论: B16细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率对As2O3有浓度依赖关系,高浓度的As2O3使B16细胞出现坏死.     

离子对反相色谱法测定桑叶中水溶性维生素含量

目的：测定新疆不同地区、不同采集期、不同品种桑叶中水溶性维生素B1、B2(VitB1、VitB2)的含量，以此作为开发利用的标准。方法：采用离子对反相色谱法测定桑叶中的水溶性维生素含量．结果：不同采集期桑叶中VitB1和VitB2的含量基本相同，无明显的变化规律，VitB1和VitB2的平均含量分别为6．10、22．4 μg／g，VitB2的含量大约是VitB1含量的3倍。南疆地区(阿克苏、喀什、和田)的桑叶中VitB1和VitB2的含量比北疆(乌鲁木齐)和东疆(哈密、吐鲁番)地区桑叶中的含量略高。黑桑和白桑中VitB1和VitB2的含量基本相同．VitB1和VitB2的平均回收率分别为97．2％和97．5％，VitB1和VitB2含量的RSD分别为3．45％(n=6)和1．54％(n=6)。结论：用离子对反相色谱法测定桑叶中的水溶性维生素，方法简单、快速，结果准确，重现性好。     

武警南、北方地域籍男战士、学员心肺机能差异的研究

目的 :研究武警南、北方地域籍男战士、学员心肺机能的差异 ,以期为部队选兵、体质评价以及指导训练提供基础资料。方法 :将Vo2 max、PWC1 70 和台阶指数作为心肺机能的三项评价指标 ,作因子分析 ,确定权重系数 ,进行T标准分处理 ,计算“机能分”。按南、北方地域籍进行分类比较。结果 :南方籍男战士、学员机能分为 49 60± 1 1 8,北方籍为 50 1 7± 1 1 7;南方低于北方 ,经u检验P <0 0 1 ,差异显著。结论 :不同地域籍男战士、学员心肺机能的差异是由于不同地域籍男战士、学员生长发育形态上的差异所决定的     

咳嗽变异性哮喘患儿尿白三烯E_4测定的临床意义

为探讨白三烯在咳嗽变异性哮喘发病中的作用 ,采用 ELISA法测定典型哮喘急性发作期患儿、咳嗽变异性哮喘急性发作期患儿及健康志愿儿童的尿液白三烯 E4 (尿 LTE4 )水平 ,结果显示 :发作期哮喘患儿、发作期咳嗽变异性哮喘患儿的尿 LTE4 水平均显著高于正常健康儿童 ( P<0 .0 1 ) ;发作期哮喘患儿尿 LTE4 水平显著高于发作期咳嗽变异性哮喘患儿 ( P<0 .0 1 ) ,说明咳嗽变异性哮喘患儿存在着白三烯参与的慢性气道炎症 ,但其炎症程度较典型哮喘患儿轻     

昆明小鼠正常PaO_2、PaCO_2、pH值、肺系数和PQLD_(50)的测定

目的　研究与ARDS密切相关的几个生理指标。方法　KM小鼠动物血pH、PaO2 、PaCO2 由美国NO VA血气分析直接测定 ,PQ中毒LD50 以寇氏法计算。肺系数由湿重除以体重乘 10 0 %得出数值。结果　KM小鼠正常动脉血pH值为 7 36 0 5± 0 0 6 7,PaO2 (kPa)为 12 47± 1 34 13,PaCO2 (kPa) 5 2 6± 0 4949;肺系数 (% )为 0 6 6 6 2±0 0 82 ;百草枯 (paraquat,PQ)中毒LD50 为 93 86 6mg kg。结论　以上所测定几个数据至今尚未见报道 ,我们把测定分析结果公开发表 ,填补KM小鼠理化常数方面的空白 ,为研究临床ARDS以及其他呼吸系统疾病提供极有意义的参考数据     

芜湖地区正常人血清rT_3水平的变化

目的　分析芜湖地区正常人血清 r T3水平在近两年来的变化。方法　采用放射免疫分析法检测 2 0 0例正常人血清 r T3 水平 ,并与 1995年统计的数据进行比较。结果　发现 1998年芜湖地区正常人血清 r T3 水平为 :0 .36～ 1.31nmol/ L ,显著高于 1995年统计数据 (0 .18～ 0 .92 nmol/ L ) (P<0 .0 1)。结论　为临床医生提供了新的参考标准。     

胰高糖素样肽-1(7-36)NH2引起胰岛β细胞cAMP的变化

目的 探讨ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２促胰岛素分泌的细胞内机制。方法 用放免法检测ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２在不同葡萄糖浓度下对培养的新生大鼠胰岛β细胞的胰岛素分泌量和ｃＡＭＰ含量的变化。结果 在２．８ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时,ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使β细胞胰岛素分泌和ｃＡＭＰ含量无明显增加;优降糖能使胰岛素分泌增加,而ｃＡＭＰ含量无明显变化。在５．６,１１．２和１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时,     

西红花酸的体外抗氧化作用的研究

目的 探讨西红花提取物中西红花酸的体外抗氧化作用。方法 采用H2O2和Vc-Fe^2 系统引起的脂质过氧化的抑制作用。结果 西红花酸对H2O2系统的羟自由基有较强的清除能力,并能抑制肝匀浆自氧化和Vc-Fe^2 系统羟自由基引起的脂质过氧化,对肝线粒体也有保护作用。结论 西红花酸具有较强的抗氧化作用。     

结直肠癌中CD_(44) V_6 PCNA的表达及其与浸润转移的关系

目的　探讨CD44V6和PCNA在结直肠癌中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 87例结直肠癌组织中CD44V6和PCNA的表达情况。结果　 87例结直肠癌组织中CD44V6蛋白的表达阳性率为 5 8.6 % ,PCNALI为 5 6 .5 1± 18.82。CD44V6阳性表达率和PCNALI在侵及浆膜层者明显高于侵及肌层者 ,淋巴结转移阳性组高于淋巴结转移阴性组 ,DukesC、D期明显高于A、B期 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。PCNA高LI者CD44V6阳性率明显高于PCNA低LI者 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　CD44V6和PCNA在结直肠癌浸润转移过程中发挥重要作用 ,可作为反映结直肠癌恶性程度的生物学标记物。     

尿微蛋白免疫透射比浊法测定及其临床意义

目的 探讨早期诊断肾脏损伤的方法，方法 采用免疫透射比浊法检测系统性疾病组（糖尿病，高血压，系统性红斑狼疮）尿转铁蛋白（ＴＦ）及微量白蛋白（ｍＡＬＢ），采用ｔ检验，卡方检验及相关回归分析。结果 尿蛋白阴性的系统性疾病患者尿ＴＦ及ｍＡＬＢ与尿肌酐（ＣＲ）比值较正常对照组增高（Ｐ〈０．０１），随机尿ＴＦ／ＣＲ与ｍＡＬＢ／ＣＲ呈正相关，ｒ＝０．８４，结论 联合检测尿ＴＦ和ｍＡＬＢ较面检测提高了阳性检出率     

精索静脉曲张不育症睾丸的糖原浸润（超微结构观察）

目的 探讨精索静脉曲张不育症的发生机理。方法 ２１例患者睾丸活检组织进行了电镜观察。结果 睾丸生精障碍以中晚期最著，支持细胞常有不同程度的糖原浸润，严重者形成糖原池。支持细胞有时水肿，崩溃，并可见再生现象。结论 鉴于支持细胞在睾丸组织碳水化合物代谢中的重要作用，其糖原浸润反映有碳水化合物代谢障碍存在，后者可能是不育症发生的关键环节。